
- •Практикум по общей токсикологии
- •Предисловие
- •1. Теоретическая токсикология. Общие вопросы
- •Классификация ядов и отравлений
- •Работа 1. Определение основных токсикологических параметров при действии солей тяжелых металлов на прорастание семян
- •Ход работы
- •2. Влияние токсикантов на активность живых существ Общая характеристика токсического действия. Токсикокинетика
- •Всасывание, распределение, биотрансформация и выделение ядов
- •Работа 2. Влияние времени воздействия на активность движения одноклеточных
- •Ход работы
- •3. Механизмы воздействия токсикантов
- •Работа 3. Определение устойчивости клеток различных растений к обезвоживанию серной кислотой
- •Работа 4. Влияние солей тяжелых металлов на плазмолиз протоплазмы растительной клетки
- •Ход работы
- •Работа 5. Влияние солей тяжелых металлов на коагуляцию растительных и животных белков
- •Ход работы
- •Основные методы детоксикации организма при острых отралениях
- •Работа 6. Нейтрализация токсического действия фенола янтарной кислотой
- •Работа 7. Нейтрализация действия тяжелых металлов на прорастание семян с помощью комплексона Трилона б.
- •5. Экотоксикология
- •Работа 8. Определение токсичности сернистого газа, почв, воды, пестицидов методом высечек листьев (по разрушению хлорофилла)
- •Работа 9. Влияние солей тяжелых металлов на активность микроорганизмов почвы.
- •Работа 10. Влияние тяжелых металлов на активность водных ракообразных
- •Работа 11. Влияние солей тяжелых металлов на гликолитическую активность дрожжей
- •6. Основные нозологические формы отравлений Отравления алкоголем и его суррогатами
- •Использованная литература
- •Оглавление
- •Вопросы
- •Глава 1
- •Глава 2
- •Глава 3
- •Глава 4
- •Глава 6
- •Глава 7
- •Практикум по общей токсикологии
- •4200111 Казань, ул. К.Маркса,10
Работа 9. Влияние солей тяжелых металлов на активность микроорганизмов почвы.
Одно из самых важных мест в почвенных экосистемах занимают микроорганизмы. Они являются последней ступенью в большинстве пищевых цепей, т.е. редуценты.
Такие организмы, как плесневые грибки, используют в качестве пищи органические вещества остатков от растений и животных, минерализуя их, делая доступными для растений различные элементы. Тяжелые металлы могут сильно ингибировать их активность.
Оборудование, реактивы, материалы: чашки Петри, цилиндры, пробирки, раствор соли тяжелого металла с концентрацией 0,5 М, фильтровальная бумага, образец почвы.
Ход работы
Из первоначального раствора соли тяжелого металла методом последовательных разбавлений в 5 раз готовятся растворы с концентрацией 0,1 М, 0,02 М, 0,004 М, 0,0008 М, 0,00016 М, 0,000032 М и воды в качестве контроля. 8 мл этих растворов добавляются в чашки Петри, содержащие слой почвы 0,5 см. Поверх почвы накладывают кружок из фильтровальной бумаги. Чашки Петри устанавливаются в темное место, и регулярно поверхность бумаги смачивается, чтобы избежать высыхания. Эксперимент продолжается до тех пор, пока в контрольном варианте желтая плесень грибков Aspergillus или темно-зеленая Trichoderma не займут большую часть бумажного кружка. Тогда кружки бумаги вытаскиваются, осторожно отмываются от комочков почвы. Плесневые грибки в ходе своей жизнедеятельности выделяют различные окрашенные вещества, поглощаемые бумагой, и по размеру окрашивания можно судить об активности плесневых грибков. Изображение пятен переносится на кальку, и определяется площадь окрашивания.
На основании полученных результатов составляется график зависимости активности микроорганизмов от концентрации тяжелых металлов в почве.
Работа 10. Влияние тяжелых металлов на активность водных ракообразных
Водные экосистемы чрезвычайно чувствительны к повышенным концентрациям таких токсических веществ, как тяжелые металлы. Данная работа иллюстрирует действие солей тяжелых металлов на активность таких водных ракообразных, как вислоногие рачки дафнии.
Оборудование, реактивы, материалы: стаканчики, цилиндры, пробирки, раствор соли тяжелого металла с концентрацией 0,5 М, популяция дафний.
Ход работы
Из первоначального раствора соли тяжелого металла методом последовательных разбавлений в 5 раз готовятся растворы с концентрацией 0,01 М, 0,002 М, 0,0004 М, 0,00008 М, 0,000016 М, 0,0000032 М и воды в качестве контроля. Эти растворы в количестве 200 мл наливаются в стаканчики, туда же помещаются дафнии в количестве по 50 рачков. В течение 3 дней наблюдают изменения в поведении рачков, и записываются данные о выживаемости этих животных.
Результаты оформляются в виде графика.
Работа 11. Влияние солей тяжелых металлов на гликолитическую активность дрожжей
Дрожжи являются одними из наиболее изученных биологических объектов, поэтому их удобно использовать и как объекты для токсикологии. Они быстро размножаются. Их активность достаточно просто определить.
Оборудование, реактивы, материалы: стаканчики, цилиндры, пробирки, парафин, раствор соли тяжелого металла с концентрацией 0,5 М, препарат дрожжей.
Ход работы
Предварительно калибруются и выбираются пробирки с одинаковым диаметром. Из первоначального раствора соли тяжелого металла методом последовательных разбавлений в 5 раз готовятся растворы с концентрацией 0,1 М, 0,02 М, 0,004 М, 0,0008 М, 0,00016 М, 0,000032 М и воды в качестве контроля. Эти растворы в количестве 3 мл наливаются в пробирки. Сухие дрожжи распускают в воде, добавляют сахар из расчета 5 г/100 мл и добавляют в пробирки с солями. Парафин расплавляют, и осторожно наливают в пробирки с дрожжами и солями. Когда парафин застывает, он образует плотную пробку. Под пробкой образуется анаэробная среда. В этих условиях дрожжи сбраживают сахар, образуя этанол и углекислый газ. Объем выделившегося углекислого газа пропорционален активности гликолиза. Через заранее определенное по контролю время измеряется величина подъема пробки, которая пропорциональна объему выделившегося углекислого газа.
Результаты оформляются в виде графика зависимости подъема парафиновой пробки от концентрации соли тяжелого металла..
Экологическое нормирование
В общем виде ограничения на выбросы загрязняющих веществ, например, в атмосферу подчиняются требованию непревышения ПДК в любой точке населенного пункта
ΣS(qi)+CФ<пдк
где S(qi)– функция перехода от величины выброса i-го источника к концентрации, а Сф - фоновая концентрация нормируемого вещества.
Это соотношение дает однозначный ответ о предельной величине выброса лишь при i = 1. В реальной же ситуации имеется весьма большое число возможных комбинаций сокращения выбросов каждым из п источников для соблюдения условия С ≤ ПДК. При решении задачи приходится брать в расчет дополнительные условия приоритетности тех или иных производств.
Санитарно-гигиеническое нормирование недостаточно для защиты окружающей природной среды, ибо определяет загрязнения в среде непосредственного обитания человека. Ориентация на нормативы ПДК совершенно закономерно привела к тому, что проблему их обеспечения стали решать почти исключительно путем более эффективного и целенаправленного рассеивания загрязняющих веществ - разбавления стоков чистой водой, выброса газообразных и аэрозольных компонентов через дымовые трубы большой высоты, что привело к значительному загрязнению более отдаленных от жилья территорий.
Отсюда следует, что ориентация должна быть основана на общем объеме выбросов, определяющих их поступление в атмосферу, почву, поверхностные и грунтовые воды и далее в живые организмы. Этот уровень должен быть таким, чтобы не могли возникнуть недопустимо высокие концентрации токсикантов в критических звеньях природных экосистем. Таким образом, конечной целью экологического нормирования является установление предельно допустимых выбросов загрязняющих веществ и выявление предельных нагрузок, при которых ответная реакция экосистем не выходит за рамки допустимых отклонений.
Для решения этой задачи в общем виде предлагается рассмотреть экосистему, состоящую из п компонентов. Задача нормирования заключается в установлении таких уровней воздействий, ущерб от которых для каждого компонента экосистемы Di (Xi,Ci) не превышал бы заданной величины Dio:
Di (Xi,Ci ) < Dio
Подобного рода расчеты привели к выводу, что для достаточно крупных регионов при концентрациях экотоксиканта в атмосфере на уровне ПДК неизбежно происходит накопление в каком-либо компоненте окружающей среды этого токсиканта или продуктов его превращений.
Таким образом, санитарно-гигиенические нормативы во многих случаях не могут соответствовать даже прямой своей задаче - обеспечению безопасности человека. Тем более они не могут быть ориентирами при выполнении природоохранных мероприятий.