Лабораторная работа №3
Определение биологических показателей качества воды
Цель работы: обучение студентов проведению микробиологических исследований качества воды.
Объем работы: 2 часа.
Прямое количественное определение возбудителей всех инфекций для контроля за качеством воды неосуществимо в связи с многообразием их видов и трудоемкостью анализа. Поэтому в практической санитарной микробиологии прибегают к косвенным методам, позволяющим определить потенциальную возможность заражения воды патогенными микроорганизмами.
Санитарно-биологическая оценка качества воды основана на определении двух основных показателей: микробного числа и числа бактерий группы Coli.
Определение микробного числа
Микробное число дает представление об общей обсемененности воды аэробными сапрофитами, которые составляют только часть общего числа микробов в воде. Однако существует прямая зависимость между величиной микробного числа и вероятностью присутствия в воде патогенных микроорганизмов.
Микробное число водопроводной воды не должно превышать 100.
Его определяют методом посева на питательную среду – мясопептонный агар
( МПА ).
Ход определения. В чашку Петри пипеткой вносят 1 мл исследуемой питьевой воды
( если исследуют сточную воду, ее разбавляют стерильной водой в несколько раз ), затем заливают пробу 10 – 12 мл остуженного питательного мясопептонного агара
( МПА ), имеющего температуру приблизительно 450С. После застывания среды чашку помещают в термостат и выдерживают при температуре 370С в течение 24 часов. За это время в чашке Петри вырастают колонии, которые видны при увеличении в 2 – 5 раз.
Обычно вырастает от 30 до 300 колоний.
По полученным данным определяют степень загрязнения воды.
Характеристика воды |
Число бактерий в 1 мл |
очень чистая чистая умеренно загрязненная загрязненная грязная очень грязная |
а · 10 а · 102 а · 103 а · 104 а · 105 а · 106 |
«а» имеет значение от 1 до 9.
Определение бактерий группы Coli
Бактерии группы Coli являются постоянными обитателями кишечника человека и животных; постоянно и в большом числе выделяются во внешнюю среду; дольше, чем патогенные микроорганизмы сохраняют жизнеспособность в этой среде; более устойчивы к действию хлора, чем возбудители большинства инфекций. Поэтому их используют в виде санитарно-показательных микроорганизмов.
Для количественного определения коли-форм применяют фуксин-сульфитный агар
( среда Эндо ).
Анализ водопроводной и чистой природной воды проводят после предварительного концентрирования воды на мембранных фильтрах. Результаты выражают в виде коли-индекса - числа бактерий в 1 л воды или коли-титра - наименьшего объема воды ( в мл ), содержащего 1 кишечную палочку.
Коли-индекс водопроводной воды не должен превышать 3, а коли-титр 300 мл.
Ход определения. В фильтровальный аппарат помещают стерильный мембранный фильтр и фильтруют 300 – 500 мл воды. После окончания фильтрования фильтр снимают обожженным пинцетом с прибора и накладывают на поверхность среды Эндо, помещенной в чашку Петри. Чашку помещают в термостат при температуре 370С на 24 часа и затем подсчитывают колонии, окрашенные в красный цвет с металлическим блеском.
Формула для расчета:
Коли-индекс =
,
где
m – количество бактерий,V – анализируемый объем воды, л
Контрольные вопросы :
Какие показатели определяют безопасность питьевой воды в эпидемиологическом отношении? Опишите методику определения общего количества бактерий в воде.
Как определяют коли-титр и коли-индекс? Какие факторы влияют на данные показатели качества воды?
Подсчет числа колоний на среде Эндо показал, что при посеве 1 мл сточной воды без разбавления выросло 3 колонии. Определите коли-индекс и коли-титр данной воды.
Оцените качество хлорирования воды на водопроводной станции: микробное число 50; коли-индекс – 2; запах – хлорный, 1 балл.
Оцените качество артезианской воды, предлагаемой для водоснабжения больницы: запах и вкус – 2 балла; мутность – 0,5 мг/дм3; общая жесткость – 2,0 мг-экв/л; микробное число – 80; коли-индекс – 3.
Для определения каких показателей качества воды используют фуксин- сульфитный агар?