Растений

Виды	2п	Виды	2п
Человек	46	Сазан	104
Горилла	48	Речной рак	116
Шимпанзе	48	Таракан	48
Собака	78	Аскарида	2
Кошка	36	Малярийный плазмодий	2
Свинья	38
Осел	62	Радиолярия	1600
Крыса	42	Пшеница	42
Мышь	40	Лук	16
Курица	78	Картофель	48

Задание 2. Строение метафазной хромосомы

Пользуясь материалом занятия «Воспроизведение на кле­точном уровне. Жизненный цикл клетки» ответьте на вопросы:

• На какой стадии митотического цикла происходит уд­ воение хромосом? Как называются образующиеся в этот период две, морфологически идентичные, нити?

• На какой стадии митоза морфологическое строение хромосом становится хорошо выраженным?

• Какие выделяют типы метафазных хромосом в зависи­ мости от локализации центромерного района в хромо­ соме?

• Какие хромосомы называются спутничными?

• Всегда ли в районе вторичной перетяжки хромосом ло­ кализуется ядрышко?

• Отличаются ли по морфологии половые х- и у- хро­ мосомы друг от друга?

-41-

• С какими аутосомами сходны по морфологии Х-хро-мосома и Y-хромосома?

Изучите по табл. 2 особенности строения разных участков метафазной хромосомы. Зарисуйте схему строения метафазной хромосомы и обозначьте короткое и длинное плечи хромосо­мы, хроматиды, первичную и вторичную перетяжку, спутник, теломеры.

Таблица 2

Строение и роль разных участков метафазных хромосом

Участок хромосомы	Строение и роль
Центромера - пер­вичная перетяжка (С)	Имеется во всех хромосомах. Участок цен­тромеры содержит кинетохор, к которому прикрепляются микротрубочки - нити ми-тотического веретена деления клетки. Игра­ет ведущую роль в движении хромосом к полюсам деления и точном распределении хромосом по дочерним клеткам. Делит хромосому на плечи — короткое (р) и длинное (q).
Вторичная перетяжка (h)	Имеется не во всех хромосомах. У человека перетяжки короткого плеча (ph) в хромо­сомах 13, 14, 15, 21, 22 - области формиро­вания ядрышек (здесь локализованы гены рРНК). Перетяжки длинного плеча (qh) в хромосомах 1, 9, 16 и Y-хромосомах не свя­заны с ядрышком и представлены гетеро-хроматином.
Спутник (s)	Небольшой участок, отделяемый вторичной перетяжкой, в хромосомах 13, 14, 15, 21, 22.
Теломеры (t)	Концевые участки хромосом. Представлены гетерохроматином. Играют защитную роль.

-42-

Задание 3. Методика приготовления метафазных хромосом человека

Ознакомьтесь с основными этапами приготовления пре­паратов метафазных хромосом человека.

Объектом для приготовления препаратов могут служить делящиеся клетки костного мозга, ткани семенника, хорион, фибробласты кожи, клетки амниотической жидкости.

Наиболее удобным объектом является культура лим­фоцитов периферической крови - берут 1-2 мл венозной крови и добавляют её в смесь питательной среды с фитогемагглю-тинином (стимулятором митоза). Культивирование лимфоци­тов составляет 48-72 часа.

Для остановки процесса деления клеток на стадии ме-тафазы используют колхицин. Для получения четких метафаз­ных пластинок клетки помещают в гипотонический раствор хлорида кальция или цитрата натрия, где они набухают, разрываются, хромосомы разобщаются и свободно распо­лагаются в цитоплазме.

В результате образуется клеточная суспензия, которую ¹ фиксируют смесью метанола и уксусной кислоты (3:1), нано­сят на предметное стекло, высушивают и окрашивают краси­телем.

Анализируют препараты под большим увеличением мик­роскопа с использованием иммерсионного объектива, отыски­вая такие метафазные пластинки, в которых хромосомы рас­полагаются в одной плоскости, и фотографируют их.

Задание 4. Основные методы окрашивания хромосом

Ознакомьтесь по табл. 3 с основными методами окра­шивания хромосом человека.

Определить число, структуру и групповую принад­лежность хромосом (Денверская классификация) позволяет простой метод равномерной окраски хромосом - рутинный

-43-

I

Методы

Рутинный

С-метод

G-метод

Ag-метод

Q-метод

" FISH-метод (флуоресцент­ная гибриди­зация in situ)

(стационарная таблица в учебной комнате). Но индивиду­ализировать хромосомы (Парижская классификация) можно только с помощью методов дифференциальной окраски, кото­рые основаны на неоднородности (гетерогенности) хромосом по длине, что проявляется в наличии темных поперечных по­лос - мест связывания с определенным красителем (рис.1).

Поперечным темным полосам (бэндам), выявляемым с по­мощью дифференциальной окраски, присвоены определенные номера, относительно них картируют гены.

Гетерогенность хромосом по длине обусловлена раз­личным чередованием эу- и гетерохроматина в хромосоме; асинхронностью репликации и конденсации отдельных рай­онов хромосомы, например, хромосомы группы А содержат больше эухроматина и поэтому быстрее реплицируются и позднее конденсируются, Y-хромосома более гетерохрома-тизирована и поэтому реплицируется позднее, а конденси­руется быстрее; различным нуклеотидным составом хромосом.