Задание 4. Нуклеосомный уровень компактизации хроматина

Напишите последовательность уровней компактизации ДНП у эукариот в жизненном цикле клетки, начиная с нукле-осомного уровня.

Рассмотрите на слайде и зарисуйте схему строения нукле­осомы. Обозначьте белковый кор, накрученную на него ДНК, линкерную ДНК.

Рассчитайте число нуклеосом, необходимых для упаковки ДНК гена, кодирующего белок из 400 аминокислот. Величина фрагмента ДНК одной нуклеосомы равна примерно 200 парам нуклеотидов.

Ответьте на вопросы:

• Какие белки обеспечивают нуклеосомный уровень ор­ ганизации хроматина? Какие функции они выполняют?

• Какова степень укорочения хроматина на уровне нук- леосомной нити, элементарной фибриллы, интерфазной и метафазной хромосом?

Задание 5. Метафазные хромосомы эукариот

Метафазные хромосомы можно рассмотреть на постоян­ном препарате «Клетки корешка лука» или на приготовленном самостоятельно временном препарате этого объекта.

Для изготовления препарата поместите отрезанный коре­шок лука в краситель на 30 минут, затем промойте в течение 2 минут в пузырьке с 45%-ным раствором уксусной кислоты.

-37-

К орешок, придерживая его препаровальной иглой, расщепите на поперечные полоски толщиной примерно 1мм. Полоски (1-2) по­местите на предметное стекло в каплю 45%-ного раствора саха­розы, накройте покровным стеклом и через слой фильтрованной бумаги слегка надавите большим пальцем.

Под -малым увеличением микроскопа найдите делящиеся клетки, переведите на большое увеличение и изучите клетки, на­ходящиеся на стадии метафазы. Зарисуйте несколько метафазных хромосом.

Задание 6. Политенные (или гигантские) хромосомы

Политенные хромосомы характерны для клеток слюнных желез личинок ряда видов двукрылых насекомых (дрозофил, хирономид). Они представляют собой лентовидные многонит­чатые (до 500 нитей) образования. Формируются гигантские хромосомы в результате эндомитоза - многократной реплика­ции ДНК в одной и той же клетке и последующем нерасхо­ждении хромосомных нитей. По длине неоднородны - состоят из чередующихся дисков и междисков, создавая поперечную видоспецифичную исчерченность. Диски - более конденсиро­ванные участки, междиски - менее конденсированные. В таких хромосомах встречаются пуфы - локусы с рыхло упакованны­ми фибриллами хроматина. Здесь идет активный синтез РНК.

Изучите под малым увеличением микроскопа постоянный препарат политенных хромосом. Зарисуйте участок политен-ной хромосомы, обозначив диски, междиски, пуфы, ядрышко.

Ответьте на вопросы:

• К интерфазным или метафазным хромосомам относятся политенные хромосомы двукрылых насекомых?

• Какое значение имеют политенные хромосомы двукры­ лых насекомых в цитогенетических исследованиях?

-38-

Задание 7. Хромосомы типа «ламповых щеток»

Хромосомы типа «ламповых щеток» обнаружены в ядрах ооцитов и сперматоцитов животных и растений. У человека встречаются в ооцитах I порядка на стадии диплотены профа­зы I мейоза. Состоят из двух гомологов, каждый из которых окружен петлями из нитчатых структур; имеется ось и хромо-меры. Петли парносимметричные, они отходят от оси и пред­ставляют собой деконденсированные участки активного хро­матина. Ось представлена спаренными сестринскими хромати-дами. Хромомеры - участки конденсированного хроматина -соответствуют дискам политенной хромосомы. В раскручен­ном состоянии представляют собой петлю хромосом типа «ламповых щеток».

Рассмотрите на фотографиях строение хромосом типа «ламповых щеток». Найдите ось хромосомы, хромомеры.