- •Методичні рекомендації студенту по виконанню практичної роботи
- •1. Особливості посіву досліджуваного матеріалу від хворого з ознаками шигельозу.
- •2. Демонстрації:
- •2.1. Культуральні властивості бактерій роду Shigella на середовищах Левіна та Плоскирєва.
- •2.2. Мікроскопія мікропрепаратів "s.Flexneri 2a", "s.Sonnei" та "e.Coli о55:к59:н1"
- •2.3. Реакція аглютинації на склі з шигельозною аглютинуючою полівалентною сироваткою
- •2.4. Ріст шигели на середовищі Олькеницького
- •Цукролітичні та протеолітичні властивості шигел на середовищах Гісса
- •2.6. Серодіагностика шигельозу: рнга з парними сироватками
- •3.1. Діагностичні препарати для ідентифікації шигел за антигенними властивостями:
- •3.2. Діагностичні препарати для серодіагностики шигельозу
- •3.3. Бактеріофаг шигельозний полівалентний (рідкий)
- •3.4. Препарати, які використовуються для лікування шигельозу та корекції нормальної мікрофлори кишечнику
- •Пояснення до теми: "мікробіологія шигельозів" для самостійної роботи студента
- •Алгоритм дії при проведенні мікробіологічної діагностики шигельозу
- •Біохімічні властивості бактерій роду Shigella
Біохімічні властивості бактерій роду Shigella
Види шигел |
Ферментація |
Утворення |
|||||||
лактози |
глюкози |
мальтози |
маніту |
дульциту |
сахарози |
cірководню |
індолу |
каталази |
|
S.dysenteriae |
─ |
к |
─ |
─ |
─,+ |
─ |
─ |
─,+ |
─ |
S.flexneri |
─ |
к/кг |
± |
+ |
± |
─ |
─ |
─ |
─ |
S.boydii |
─ |
к |
± |
+ |
± |
─ |
─ |
─,+ |
─ |
S.sonnei |
[+] |
к |
+ |
+ |
─ |
[+] |
─ |
─ |
+ |
Умовні позначки: "+" - позитивна реакція, "─" негативна реакція, [+] - пізня реакція, що наступає не раніше 2-3 доби, "к" - ферментація до кислоти, "кг" – ферментація до кислоти та газу, "±" – більше число штамів дає позитивну реакцію, менше – негативну, "─,+" - більше число штамів дає негативну реакцію, менше – позитивну.
Найважливішою особливістю S.dysenteriae у порівнянні з іншими видами шигел є її негативна реакція у тесті з манітом. S.dysenteriae ферментує лише глюкозу з утворенням кислоти. Загалом характерним для S.dysenteriae є її слабка ферментативна активність.
Більш біохімічно активною є S.flexneri - ферментує маніт, глюкозу ферментує з утворенням кислоти або кислоти та газу, але не ферментує лактозу, сахарозу, не має ферменту каталази та не утворює індолу.
Найбільш активною за ферментативними властивостями є S.sonnei. Вона здатна, хоча й повільно, ферментувати лактозу, сахарозу, постійно ферментує маніт, мальтозу, глюкозу з утворенням кислоти, володіє ферментом каталазою, але не ферментує дульцит і дає негативну реакцію на індол.
2/ за антигенними властивостями: серологічну ідентифікацію виділеної чистої культури провести за допомогою реакцій аглютинації на склі спочатку з полівалентною аглютинуючою сироваткою проти шигел Флекснера та Зонне, які найчастіше викликають шигельоз, а потім з видовими, типовими та груповими аглютинуючими сироватками для визначення серовару чи підсеровару шигели.
Окрім діагностики шигельозу, бактеріологічне дослідження необхідно проводити також для виявлення осіб з атиповою, легкою або субклінічною формами інфекції серед працівників продовольчих підприємств, дитячих установ і лікарняних закладів та обстеження контактних осіб. З метою встановлення джерела інфекції при спалахах інфекції необхідно визначити фаговар шигели.
Експрес-метод діагностики шигельзу.
З метою швидкої та надійної ідентифікації виду чи серовару шигел поставити пряму або непряму реакцію імунофлуоресценції з люмінесцентними шигельозними сироватками. При наявності в досліджуваному матеріалі збудника шигельозу він утворює комплекс з сироваткою, яка має люмінесцентну мітку, та утворений комплекс викликає світіння у люмінесцентному мікроскопі.
Серологічний метод діагностики.
Застосовується для ретроспективного обґрунтування діагнозу шигельозу при атипових (стертих) та субклінічних формах захворювання. Інфекційний процес не супроводжується значним антигенним подразненням, тому титри антитіл у сироватках хворих та реконвалесцентів невисокі. Їх виявляють на 5-8 добу захворювання. Найбільша кількість антитіл утворюється на 2-3 тижнях.
Для серодіагносики шигельозу можна поставити розгорнуту реакцію аглютинації з шигельозними діагностикумами по типу реакції Відаля. Сироватку крові протитрувати від 1:50 до 1:800. Діагностичним титром антитіл до S.flexneri у дорослих хворих є 1:200, до S.dysenteriae та S.sonnei – 1:100 (у дітей відповідно 1:100 та 1:50).
Більш достовірні результати щодо захворювання на шигельоз отримують при постановці РНГА з парними сироватками. Діагностичне значення має зростання титру антитіл у 4 і більше разів.
1 Аглютиніни до деяких видів шигел можуть з‘являтися в низьких титрах у здорових людей. У зв‘язку з індивідуальними особливостями імунного статусу у людини можливе зниження реактивності організму і, як наслідок, титр антитіл у таких хворих буде нижче діагностичного. Такі обставини перешкоджають об‘єктивній оцінці результатів реакції непрямої (пасивної) гемаглютинації, поставленій з сироваткою крові хворого.
2 Середовише Левіна ─ важливе середовище при ідентифікації шигел, тому що вегетативні властивості середовища Плоскирєва недостатні для росту S.dysenteriae 1.
3 Агар Плоскирєва – селективне середовище для культивування шигел та сальмонел. Компоненти середовища інгубують ріст грампозитивної флори, значно затримують ріст ешерихій та роїння протею.
