
- •Практичне заняття № 21 тема: мікробіологія ешерихіозів теоретичні питання
- •Література:
- •Методичні рекомендації по виконанню практичної роботи
- •1. Правила оформлення направлення на мікробіологічне дослідження матеріалу (додаток 3).
- •2. Правила взяття та посіву матеріалу від хворого на кишковий ешрихіоз та контактних осіб.
- •3. Діагностичні та лікувально-профілактичні препарати:
- •3. 1. Аглютинуючі сироватки для визначення антигенної структури e.Coli:
- •3.2. Препарати, що використовуються для корекції нормальної мікрофлори кишечнику:
- •4. Демонстрації:
- •4.1. Культуральні властивостей e.Coli на середовищах Ендо та Левіна
- •4.2. Мікропрепарати ”e.Coli о1:к1” та ”e.Coli о55:к59:н1”
- •4.3. Реакції аглютинації на склі з ока– та монорецепторною сироватками
- •4.4. Ріст e.Coli на середовищі Олькеницького
- •4.5. Ріст e.Coli на середовищах Гісса (короткому ”строкатому ряду” та у пептонній воді).
- •4.6. Вивчення чутливості e.Coli до антибактеріальних препаратів методом стандартних дисків
- •Пояснення до теми: ”Мікробіологія ешерихіозів”
- •Алгоритм дії при проведенні мікробіологічної діагностики діареєгенного ешерихіозу
- •Ііі етап – ідентифікація виділеної чистої культури:
- •2 Етап Облік результатів посіву
- •3 Етап Ідентифікація чистої культури
4.2. Мікропрепарати ”e.Coli о1:к1” та ”e.Coli о55:к59:н1”
E.coli О1:К1
E.coli О55:К59:Н1
При мікроскопії мікропрепаратів ”E.coli О1:К1” та ”E.coli О55:К59:Н1”, пофарбованих за методом Грама, студент повинен пересвідчитись у тому, що серовари штамів E.coli - прямі грамнегативні монобактерії середніх розмірів і зробити висновок: штами патогенної (E.coli О55:К59:Н1) та умовно-патогенної (E.coli О1:К1) E.coli за морфологічними та тинкториальними властивостями не розрізняються між собою.
4.3. Реакції аглютинації на склі з ока– та монорецепторною сироватками
Студент повинен запам‘ятати, що спочатку при вивченні антигенної структури E.coli встановлюється належність мікроорганізму до патогенної серогрупи, тому що на середовищах Ендо та Левіна колонії патогенних та умовно-патогенних кишкових паличок не відрізняються одна від одної. Для цього ставлять реакцію аглютинації на склі з ешерихіозною полівалентною аглютинуючою ОКА-сироваткою (містить аглютиніни до 22 О- та К-антигенів E.coli). Для визначення серогрупи збудника використовують аглютинуючу групову сироватку, наприклад О55:К59
Студент повинен побачити утворення аглютинату з ешерихіозними ОКА– та О55:К59 сироватками і зробити висновки: 1/ мікроорганізм, який виріс на середовищі Ендо, є E.coli; 2/ за результатами РА з полівалентною ОКА-сироваткою - E.coli є орієнтовно патогенним мікроорганізмом; 3/ за результатами РА з груповою О55:К59 E.coli орієнтовно відноситься до серогрупи О55:К59.
4.4. Ріст e.Coli на середовищі Олькеницького
Студент повинен пересвідчитися в тому, що особливості росту мікроорганізму на середовищі Олькеницького є додатковим доказом того, що культура, яка вивчається, є E.coli.
Аглютинабельні E.coli ферментують глюкозу, лактозу, що входять до складу середовища, з утворенням кислоти та газу. Студент повинен побачити, що відбулася зміна кольору всього об‘єму середовища у порівнянні з вихідним (рожевий колір середовища змінився на жовтий). Це свідчить про ферментацію цукрів з утворенням кислоти, а розрив стовпчикової частини середовища ─ про газоутворення.
4.5. Ріст e.Coli на середовищах Гісса (короткому ”строкатому ряду” та у пептонній воді).
Аглютинабельні E.coli ферментують середовища Гісса з глюкозою, лактозою, манітом, мальтозою з утворенням кислоти та газу і не ферментують сахарозу. Доказом ферментації цукрів є зміна кольору середовищ, а газоутворення ─ утворення пухирців повітря у товщі середовища або його розриви. E.coli не утворила сірководень при культивуванні її у пептонній воді (відсутнє почорніння папірця, який насичений Pb(CH3COO)2, а реакція на індол ─ є позитивною (спостерігається почервоніння папірця, який насичений n-диметиламідобензальдегідом у соляній кислоті).
1 2 3 4 5 6
Отримані результати є підставою для висновку, що за біохімічними властивостями бактерія є E.coli.