21. Определение чувствительности микробов к антибиотикам. Понятие о минимальной ингибирующей концентрации (мик) и терапевтической дозе.

МИК — наименьшая концентрация препарата, тормозящая рост культуры.

Минимальная терапевтическая доза — минимальная доза лекарства, оказывающая лечебный эффект.

Серийные разведения в жидких средах

берут пробирки, готовят серию двойных разведений на питательной среде, концентрацию уменьшают.конечный объем в пробирке каждой — 1 мл. контрольная проба с чистой питательной средой. В каждую вносят по 0,05мл физ р-ра с содержанием микробных клеток 10(6)/мл. Инкубируют 10-18 ч при 37. далее учитывают результаты по изменению оптической плотности среды. Можно использовать индикаторы.

Серийный разведения в плотных средах.

Вносят по 1 мл разведенного перпарата в пробирки с 4мл охлажденного до 45 агара. Одной пипеткой с перенесенеем препарата от меньшей концентрации к болшей, затем агар засевают исследуемой культурой, инкубируют и учитывают по отсутствию роста в пробирках, содержащих наименьшие концентрации препарата.

Диффузные методы. Исходный метод.

Чашки Петри заполняют агаром, на них микробную взвесь, подсушивают в термостате, в агаре пробивают лунки изаполняют их 0,1 мл раствором препаратов, инкубируют 18 ч при 37. активность учитывайтся, измеряя диаметр зоны подавления роста для каждого препарата.

Метод дисков.

После посева культуры на агар, накладыываются диски из бумаги, пропитанные антибиотиками, после инкубации проводят измерение зон торможеня роста.

Определение способности к образованию бета-лактамаз

использование дисков, пропитанных нитроцефином — цефалоспорином, изменяющие окраску диска при гидролизе антибиотика.

У анаэробных те же методы, короме метода дисков. Чаще применяют методы серийных разведений в агаре.

22. Механизмы возникновения и распространения лекарственной устойчивости у бактерий. Осложнения при антибиотикотерапии.

2 вида устойчивости: естественная (связана с видовыми признаками микроба, всвязи с отсутствием мишеней на клеточной стенке либо непроницаемостью ее для некоторых липосахаридов) и преобретенная.

Устойчивость, не связанная с наследуемыми свойствами

• Изменение метаболической активности клеток — мишеней. Для бактерей, прибывающих в латентной стадии (туберкулез)

• уменьшение количества мишеней для липосахаридов. При проведении химиотерапии уменькается количества клеток-мишеней или они переходят под дествием пен ициллина в L-форму без клеточной стенки.

Устойчивость, обусловленная изменениями генома.

Мутации (спонтанные и селекция штаммов)

плазмиды резистентности, транспозоны, несущие нужнй ген.

Побочные реакции.

Токсические :

-поражение паренхимы почек (тетрациклины, левомицетин). При недостатке глюкурони-трансфераз левомицетин может накапливаться в крови и развивются симптомы интоксикации, серый цвет кожи.

-Поражение почек (линкомицин, аминогликозиды)

-поражение органов кроветворения (левомицетин)

-дисбактериозы

-аллергии

-иммунодепрессивные эффекты(цитостатическое действие преаратов на иммунокомпетентные клетки)