20. Возбудитель туляремии. Микробиологическая диагностика. Специфическая профилактика.

Возбудитель: Francisella tularensis, сем. Brucellaceae

Спор и капсул нет, капсула мало выражена

Грамотрицательные коккобактерии, аэробы (по мнению А.М. Королюка факультативные анаэробы)

Специальные методы окраски: метиленовой синькой, малахитовым зеленым.

На простых средах не растет. Специальные среды: кровяной агар с цистеином и глюкозой, желточно-солевой агар.

Колонии небольшие, беловатого цвета с голубым оттенком.

Факторы патогенности: эндотоксин, капсула, ферменты (нейроминидаза, плазмакоагулаза, фибринолизин), аллергические свойства клеточной стенки, О-АГ и Vi-АГ, высокая инвазия.

Источник инфекции: животные (грызуны, овцы, козы)

Пути передачи: контактный, алиментарный, воздушно-пылевой, трансмиссивный (укусы клещей, комаров, слепней)

Материал для исследования: слизь из зева, кровь, фекалии, моча, мокрота, пунктат из бубонов, вода, ткани погибших грызунов, пунктат лимфоузлов, гной.

Методы диагностики: бактериологический (через пассаж на животных), биологический (на мышах, морских свинках), серологичекий – РП по Асколи, РИФ, РНГА (титр 1:100), кровяно-капельная реакция на стекле (титр 1:100), кожно-аллергическая с тулярином.

Профилактика: живая ослабленная сухая накожная вакцина Гайского-Эберта. Вводят однократно. Иммунитет не менее 5-7 лет.

Лечение: АБ (аминогликозиды, тетрациклины)

Воротами инфекции чаще являются микротравмы кожи. Для развития болезни при внедрении в кожу или аспирационным путем достаточно 10-50 жизнеспособных микроорганизмов, а при алиментарном инфицировании нужно свыше 108 микробных клеток. На месте внедрения развивается воспалительный процесс, происходит массивное размножение микробов, затем они проникают в регионарные лимфатические узлы, вызывая воспаление. Здесь микробы размножаются, частично гибнут, выделяя эндотоксин, который поступает в кровь и вызывает явления общей интоксикации. При попадании микробов в кровь происходит гематогенная диссеминация в различные органы и ткани. Возникает множественное увеличение лимфатических узлов, могут развиваться гранулемы в разных органах (печень, селезенка, легкие). Гранулематозный процесс особенно выражен в регионарных лимфатических узлах, здесь образуются участки некроза. Большое количество гранулем обнаруживается в селезенке, печени. По клеточному составу туляремийные гранулемы напоминают туберкулезные. Перенесенное заболевание оставляет после себя стойкий иммунитет.

21. Возбудитель сибирской язвы. Микробиологическая диагностика. Специфическая профилактика.

Сибирская язва - острая антропонозная инфекционная болезнь, вызываемая Bacillus anthracis, сем. Bacillaceae, характеризуется тяжелой интоксикацией, поражением кожи, лимфатических узлов. Морфологические свойства. Очень крупные грамположительные палочки с обрубленными концами, в мазке из чистой культуры располагаются короткими цепочками (стрептобациллы). Неподвижны; образуют расположенные центрально споры, а также капсулe в организме человека. Культуральные свойства. Аэробы (факультативные анаэробы). Хорошо растут на простых питательных средах в диапазоне температур 10—40С, температурный оптимум роста 35С. На жидких средах дают придонный рост; на плотных средах образуют крупные, с неровными краями, шероховатые матовые колонии (R-форма), напоминают львиную гриву. На средах, содержащих пенициллин, через 3ч роста сибиреязвенные бациллы образуют сферопласты, расположенные цепочкой и напоминающие в мазке жемчужное ожерелье.

Специальные среды: среды с кровью, сывороткой, пенициллином, желатином. Биохимические свойства. Ферментативная активность достаточно высока: возбудители ферментируют до кислоты глюкозу, сахарозу, мальтозу, крахмал, инулин; обладают протеолитической и липолитической активностью. Выделяют желатиназу, обладают слабой гемолитической, лецитиназной и фосфатазной активностью. Выделяют желатиназу, проявляют низкую гемолитическую, лецитиназную и фосфатазную активность. Антигены и факторы патогенности. Содержат родовой соматический полисахаридный и видовой белковый капсульный антигены. Образуют белковый экзотоксин, обладающий антигенными свойствами и состоящий из нескольких компонентов (летальный, протективный и отечный). Другими факторами патогенности являются капсула, адгезия, инвазия, антифагоцитарный фактор, клеточный АГ. Резистентность. Вегетативная форма неустойчива к факторам окружающей среды, споры чрезвычайно устойчивы и сохраняются в окружающей среде, выдерживают кипячение. Чувствительны к пенициллину и другим антибиотикам; споры устойчивы к антисептикам. Эпидемиология и патогенез. Источник инфекции — больные животные, чаще крупный рогатый скот, овцы, свиньи. Человек заражается в основном контактным путем, реже алиментарным, при уходе за больными животными, переработке животного сырья, употреблении мяса. Входными воротами инфекции в большинстве случаев являются поврежденная кожа, значительно реже слизистые оболочки дыхательных путей и желудочно-кишечного тракта. В основе патогенеза лежит действие экзотоксина, который вызывает коагуляцию белков, отек тканей, приводят к развитию токсико-инфекционного шока. Различают кожную, легочную и кишечную формы сибирской язвы. При кожной (локализованной) форме на месте внедрения возбудителя появляется характерный сибиреязвенный карбункул, сопровождается отеком. Легочная и кишечная формы относятся к генерализованным формам и выражаются геморрагическим и некротическим поражением соответствующих органов. Иммунитет. После перенесенной болезни развивается стойкий клеточно-гуморальный иммунитет. Микробиологическая диагностика:

Материалом для исследования являются кровь, фекалии, моча, рвотные массы, отделяемое карбункулов и язв, почва, вода, продукты питания, шерсть. Наиболее достоверным методом лабораторной диагностики сибирской язвы является выделение из исследуемого материала культуры возбудителя. Диагностическую ценность представляют также реакция термопреципитации по Асколи и кожно-аллергическая проба. Бактериоскопическое исследование. Изучение окрашенных по Граму мазков из патологического материала позволяет обнаружить возбудителя, представляющего собой грамположительную крупную неподвижную стрептобациллу. В организме больных и на белковой питательной среде микроорганизмы образуют капсулу, в почве— споры. Бактериологическое исследование.Исследуемый материал засевают на чашки с питательным и кровяным агаром, а также в пробирку с питательным бульоном. Посевы инкубируют при 37С в течение 18ч. В бульоне В. anthracis растет в виде хлопьевидного осадка; на агаре вирулентные штаммы образуют колонии R-формы. Авирулентные или слабовирулентные бактерии образуют S-формы колоний. В. anthracis обладает сахаролитическими свойствами, не гемолизирует эритроциты, медленно разжижает желатин. Под действием пенициллина образует сферопласты, имеющие вид «жемчужин». Это явление используется для дифференциации В. Anthracis от непатогенных бацилл. Биологическое исследование. Исследуемый материал вводят подкожно морским свинкам, кроликам. Готовят мазки из крови и внутренних органов, делают посевы для выделения чистой культуры возбудителя. Экспресс-диагностикапроводится с помощью реакции термопреципитации по Асколи и ИФА. Реакцию Асколи ставят при необходимости диагностировать сибирскую язву у павших животных или у умерших людей. Образцы исследуемого материала измельчают и кипятят в пробирке с изотоническим раствором хлорида натрия в течение 10 мин, после чего фильтруют до полной прозрачности. Метод иммунофлюоресценции позволяет выявить капсульные формы В. anthracis в экссудате. Мазки из экссудата через 5—18 ч после заражения животного обрабатывают капсульной сибиреязвенной антисывороткой, а затем флюоресцирующей антикроличьей сывороткой. В препаратах, содержащих капсульные бациллы, наблюдается желто-зеленое свечение возбудителя. Кожно-аллергическая проба. Ставится на внутренней поверхности предплечья — внутрикожно вводят 0,1 мл антраксина. При положительной реакции через 24 ч появляются гиперемия и инфильтрат. Лечение: антибиотики и сибиреязвенный иммуноглобулин. Для антибактериальной терапии препарат выбора – пенициллин. Профилактика. Для специфической профилактики используют живую сибиреязвенную вакцину. Для экстренной профилактики назначают сибиреязвенный иммуноглобулин. Сибиреязвенная живая вакцина СТИ. Высушенную взвесь живых спор В. anthracis авирулентного бескапсульного штамма. Прививают однократно накожно или внутрикожно. Ревакцинация через год.Применяется для профилактики сибирской язвы. Противосибиреязвенный иммуноглобулин. Гамма-глобулиновая фракция сыворотки крови лошади, гипериммунизированной живой сибиреязвенной вакциной и вирулентным штаммом В.anthracis, используется с профилактической и лечебной целью.