- •Практический навык по микробиологии
- •Общая микробиология Правила работы на кафедре микробиологии
- •Запрещается
- •Перед началом работы студент обязан:
- •Обязанности студентов и дежурных во время лабораторной работы:
- •Обязанности студентов и дежурных по окончании работы:
- •Самостоятельная работа студентов на лабораторных занятиях:
- •Микроскопирование
- •Окончание работы (микроскопирования)
- •Микробиология как наука Бактериоскопический метод исследования. Простые методы окраски Практические навыки, осваиваемые студентами на занятии:
- •Приготовление мазка
- •Простые методы окраски
- •Морфология и ультраструктура бактериальной клетки Окраска по Граму
- •Сложные методы окраски
- •Морфология и ультраструктура бактериальной клетки (продолжение). Особенности морфологии актиномицетов, спирохет, риккетсий, хламидий, микоплазм Окраска по Цилю-Нильсену
- •Сложные методы окраски
- •Физиология прокариот Окраска по Нейссеру
- •Сложные методы окраски
- •Физиология прокариот (продолжение). Бактериофаги Культуральный метод исследования. Фаготипирование бактерий
- •Первый этап культурального метода исследования – получение изолированного роста чистой культуры
- •Второй этап культурального метода исследования – накопление чистой культуры
- •Третий этап культурального метода исследования – окончательная идентификация чистой культуры
- •Изучение культуральных признаков
- •Фаготипирование бактерий.
- •Генетика бактерий Изучение бактерий в живом состоянии
- •Приготовление препаратов для изучения микроорганизмов в живом состоянии.
- •Метод «раздавленной» капли.
- •Этапы приготовления препарата «раздавленная капля»
- •Экология микроорганизмов Изучение микрофлоры ротовой полости
- •Приготовление мазка из зубного налета
- •Окраска мазка простым методом с использованием метиленового синего:
- •Основы учения об инфекции Биологический метод исследования
- •Микробиологические основы химиотерапии бактериальных инфекций Методы изучения чувствительности бактерий к антибиотикам
- •Качественный метод определения чувствительности бактерий к антибиотикам (метод дисков).
- •Иммунология
- •Иммунология как наука. Естественный иммунитет Оценка функционального состояния фагоцитов
- •Иммунная система организма человека Определение активности системы комплемента
- •Клеточный иммунный ответ. Антигены Пластинчатая реакция агглютинации
- •Гуморальный иммунный ответ. Иммуноглобулины Объемная реакция агглютинации
- •Аллергия (гиперчувствительность) Реакция преципитации Практические навыки, осваиваемые студентами на занятии:
- •Иммунопрофилактика и иммунотерапия инфекционных болезней. Возрастные особенности иммунитета
- •Серологические реакции с использованием метки.
- •Постановка прямой и непрямой риф.
- •Практические навыки, осваиваемые студентами на занятии:
- •Стафилококки. Стрептококки. Нейссерии
- •Кишечная палочка. Шигеллы. Сальмонеллы
- •Вибрионы. Бруцеллы. Франциселлы. Yersinia pestis. Бациллы Микробиологическая диагностика холеры, бруцеллеза, туляремии, чумы, сибирской язвы Практические навыки, осваиваемые студентами на занятии:
- •Микобактерии. Актиномицеты. Листерии
- •Анаэробные бактерии
- •Содержание
Иммунология
Занятие № 11
Иммунология как наука. Естественный иммунитет Оценка функционального состояния фагоцитов
Практические навыки, осваиваемые студентами на занятии:
-
Определение показателей фагоцитоза в готовых препаратах, окрашенных по Романовскому-Гимзе.
Оценку фагоцитоза производят, подсчитывая соотношение между общим количеством фагоцитов в мазках и фагоцитов, в которых наблюдается фагоцитоз.
Для оценки иммунного фагоцитоза используют показатели опсонофагоцитарной пробы.
Табл. 1. Схема учета опсонофагоцитарной пробы
Количество фагоцитированных бактерий в одном лейкоците
Вычисление цифрового показателя
Оценка фагоцитоза Количество фагоцитов
0
+
++
+++
3
4 6 12
0
= 0
1=4
6-2
= 12
12-3
= 36
По данным табл. 1, показатель опсонофагоцитарной пробы равен 52. Максимальный показатель выражается цифрой 75, если фагоцитоз всех 25 лейкоцитов оценен тремя плюсами. У здоровых людей цифровой показатель равен 1-3. Показатель в пределах 10 -24 характеризует слабо положительную реакцию, 25 - 49 - ясно выраженную и 50 - 75 - резко положительную.
Для оценки степени завершенного фагоцитоза применяют показатель завершенности фагоцитоза. Его определяют количеством клеток с завершенным фагоцитозом на 100 фагоцитировавших нейтрофильных лейкоцитов.
О завершенности фагоцитоза судят по отсутствию роста на питательной среде, а при микроскопических исследованиях - по значительному уменьшению размеров фагоцитированных бактерий и их фрагментации.
Более достоверные данные о завершенном фагоцитозе можно получить, используя метод подращивания лейкоцитарно-бактериальной взвеси.
Для этого смесь крови в лимоннокислом натрии с тест-бактериями после инкубации при температуре 37 °С в течение 30 мин распределяют по поверхности чашки Петри с МПА. Затем чашки Петри помещают в термостат на 2 ч. За это время подращивания оставшиеся жизнеспособными бактерии образуют гигантские формы, которые легко отличаются от погибших.
Занятие № 12
Иммунная система организма человека Определение активности системы комплемента
Практический навык, осваиваемый студентами на занятии:
-
Определение активности системы комплемента.
Алгоритм постановки реакции титрования комплемента
Обычно для постановки РСК используют комплемент, выделенный из крови морской свинки. Титрование (определение концентрации) комплемента проводят в связи с тем, что содержание его у каждой морской свинки различно.
Для этого основной раствор комплемента (разведенный 1:10) разливают в ряд пробирок от 0,05 до 0,5 мл и в каждую из них прибавляют 0,85 % раствор натрия хлорида, доводя объем жидкости до 1,5 мл.
Ставят в термостат при температуре 37 °С на 45 мин, после чего во все пробирки добавляют гемсистему.
Пробирки вновь инкубируют в термостате 30 мин и затем определяют титр комплемента: или наименьшее количество (концентрация) комплемента, вызывающее гемолиз.
Занятие № 13