
- •Аннотация
- •Содержание
- •Введение
- •Теоретическая часть
- •1. Биологические особенности и характеристика бактерий различных родов аэробных азотфиксирующих бактерий
- •2. Роль свободноживущих азотфиксаторов в обогащении почвы азотом
- •3. Оптимальные факторы среды для развития аэробных азотфиксирующих бактерий
- •4. Влияние корневых выделений растений, органических удобрений, соломы, продуктов разложения клетчатки на активность фиксации азота азотобактером и размеры азотонакопления в почве
- •Практическая часть
- •1. Объект и методы исследования
- •1.1. Характеристика взятого образца почвы.
- •1.2. Методы биологического исследования почвы.
- •1.2.1.Отбор средней почвенной пробы для микробиологического анализа и требования к ней.
- •1.2.2. Определение влажности почвы.
- •1.2.3.Учет численности микроорганизмов почвы.
- •1.2.4.Приготовление почвенной суспензии и посев на питательные среды.
- •2.Результаты опыта. Учет численности микроорганизмов различных групп Учет количества микроорганизмов на плотных средах
- •Общ.Кол.Доминирующих микр./ общ.Кол.Микр. ×100%
- •Заключение
2.Результаты опыта. Учет численности микроорганизмов различных групп Учет количества микроорганизмов на плотных средах
Качественная и количественная оценка
микроорганизмов на МПА
После инкубации чашки с засеянными средами вынимают из термостата и в них подсчитывают число колоний, которые отражают число живых клеток микроорганизмов в почве.
Разведе- ние |
Общее количество колоний |
Количество микроорганизмов в 1 г абсолютно сухой почвы (КОЕ/г) |
Количество колоний доминирующих Микроорганизмов (Bacillus sp.) |
Доминирующие формы микроорганизмов на 1 г (КОЕ/г) |
Доля доминирующих форм в общей численности |
10-4 |
154 |
2905660 |
122 |
2259259 |
77,75% |
10-5 |
52 |
9811321 |
38 |
7169811 |
77,08% |
Количество микроорганизмов в 1г абсолютно сухой почвы:
Общее кол-во микроорганизмов = общее.кол.колон.× разведение / влажн. почвы
-
Общее кол-во микроорганизмов в 4 разв. = 154× 104/ 0,53 = 2905660
-
Общее кол-во микроорганизмов в 5 разв .= 52×105/ 0,53 = 9811321
Количество микроорганизмов доминирующей формы в 1г абсолютно сухой почвы:
-
Общ. кол-во доминирующих микр. в 4 разв. = 122×104/0,53 = 2259259
-
Общ. кол-во доминирующих микр. В 5 разв. = 38×105/0,53 = 7169811
Доля доминирующих форм в общей численности микроорганизмов:
Общ.Кол.Доминирующих микр./ общ.Кол.Микр. ×100%
-
Доля домин.форм в 4 разв. = 2259259/2905660×100% = 77,75%
-
Доля домин.форм в 5 разв. = 7169811/9811321×100% = 77,08%
Признаки доминирующих микроорганизмов:
Культуральные |
Морфологические |
1. Форма колонии – округлая 2. Размер – 1,2 см 3. Цвет – бежевый 4. Блеск – матовый 5. Поверхность – гладкая 6. Структура – однородная |
1. Форма клетки - палочковидная 2. Характер расположения клеток – хаотичный 3. Способность клеток к спорообразованию -спорообразующие |
Рис. 1 Bacillus sp.
Увеличение: х1600
Фото 1. Среда МПА (Bacillus sp.)
Фото 2 и 3. Среда МПА (Bacillus sp.) 4-ое разведение
Фото 4 и 5. Среда МПА (Bacillus sp.) 5-ое разведение
Качественная и количественная оценка
микроорганизмов на СА
Разведе- ние |
Общее количество колоний |
Количество микроорганизмов в 1 г абсолютно сухой почвы (КОЕ/г) |
Количество колоний доминирующих Микроорганизмов (Penicillum sp.) |
Доминирующие формы микроорганизмов на 1 г (КОЕ/г) |
Доля доминирующих форм в общей численности |
10-2 |
93 |
17547 |
52 |
9811 |
55,91% |
10-3 |
84 |
158490 |
44 |
83019 |
52,38% |
Количество микроорганизмов в 1г абсолютно сухой почвы:
1)Общее кол-во микроорганизмов во 2 разв. = 93× 102/ 0,53 = 17547
2)Общее кол-во микроорганизмов в 3 разв .= 84×103/ 0,53 = 158490
Количество микроорганизмов доминирующей формы в 1г абсолютно сухой почвы:
1)Общ. кол-во доминирующих микр. во 2 разв. = 52×102/0,53 = 9811
2)Общ. кол-во доминирующих микр. в 3 разв. = 44×103/0,53 = 83019
Доля доминирующих форм в общей численности микроорганизмов:
1)Доля домин.форм во 2 разв. = 9811/17547×100% = 55,91%
2)Доля домин.форм в 3 разв. = 83019/158490×100% = 52,38%
Признаки доминирующих микроорганизмов:
Культуральные |
Морфологические |
1. Форма колонии – округлая 2. Размер – 0,4-0,6 см 3. Цвет – серо-зеленый 4. Блеск – мучнистый 5. Поверхность – шероховатая 6. Структура – неоднородная |
1.Форма клетки – цепочки конидий 2. Характер расположения клеток – цепочка 3. Способность клеток к спорообразованию - спорообразующие |
Рис.
2 Penicillium
sp.
Увеличение: х1600
Фото 6.
Среда CА
(Penicillum
sp.)
Фото
7 и 8. Среда СА (Penicillum
sp.)
2-ое разведение
Фото 9 и 10. Среда СА (Penicillum sp.) 3-е разведение
Качественная и количественная оценка
микроорганизмов на КПА
(на данной среде были обнаружены актиномицеты и бациллы)
Разведе- ние |
Общее количество колоний |
Количество микроорганизмов в 1 г абсолютно сухой почвы (КОЕ/г) |
Количество колоний доминирующих Микроорганизмов (Streptomyces sp.) |
Доминирующие формы микроорганизмов на 1 г (КОЕ/г) |
Доля доминирующих форм в общей численности |
10-3 |
25 |
47170 |
17 |
32075 |
68,00 |
10-4 |
12 |
226415 |
8 |
150943 |
66,67 |
Количество микроорганизмов в 1г абсолютно сухой почвы:
1)Общее кол-во микроорганизмов в 3 разв. = 25× 103/ 0,53 = 47170
2)Общее кол-во микроорганизмов в 4 разв .= 12×104/ 0,53 = 226415
Количество микроорганизмов доминирующей формы
в 1г абсолютно сухой почвы:
1)Общ. кол-во доминирующих микр. в 3 разв. = 17×103/0,53 = 32075
2)Общ. кол-во доминирующих микр. в 4 разв. = 8×104/0,53 = 150943
Доля доминирующих форм в общей численности микроорганизмов:
1)Доля домин.форм. в 3 разв. = 32075/47170×100% = 68,00 %
2)Доля домин.форм. в 4 разв. = 150943/226415×100% = 66,67 %
Признаки доминирующих микроорганизмов:
Культуральные |
Морфологические |
1. Форма колонии – округлая 2. Размер – 0,3-0,4 см 3. Цвет – серый 4. Блеск – мучнистый 5. Поверхность – шероховатая 6. Структура – неоднородная |
1.Форма клетки – ветвящиеся палочки и кокки 2. Характер расположения клеток – хаотично 3. Видны разветвленные гифы |
Рис. 3 Streptomyces sp.
Увеличение: х1600
Фото 11. Среда для актиномицетов (Streptomyces sp.)
Фото 12 и 13. Среда для актиномицетов (Streptomyces sp.)
3-е разведение
Фото 14 и 15. Среда для актиномицетов (Streptomyces sp.)
4-е разведение
Качественная и количественная оценка
микроорганизмов на среде Гетчинсона
(на данной среде были обнаружены микроскопические грибы рода Fusarium, Penicillium, Trichoderma)
Разведе- ние |
Общее количество колоний |
Количество микроорганизмов в 1 г абсолютно сухой почвы (КОЕ/г) |
Количество колоний доминирующих Микроорганизмов (Trichoderma sp.) |
Доминирующие формы микроорганизмов на 1 г (КОЕ/г) |
Доля доминирующих форм в общей численности |
10-2 |
300 |
56604 |
179 |
33774 |
59,67 |
10-3 |
160 |
301887 |
145 |
273585 |
90,62 |
Количество микроорганизмов в 1г абсолютно сухой почвы:
1)Общее кол-во микроорганизмов во 2 разв. = 300× 102/ 0,53 = 56604
2)Общее кол-во микроорганизмов в 3 разв .= 160×103/ 0,53 = 301887
Количество микроорганизмов доминирующей формы в 1г абсолютно сухой почвы:
1)Общ. кол-во доминирующих микр. во 2 разв. = 179×102/0,53 = 33774
2)Общ. кол-во доминирующих микр. в 3 разв. = 145×103/0,53 = 273585
Доля доминирующих форм в общей численности микроорганизмов:
1)Доля домин.форм. во 2 разв. = 33774/56604×100% = 59,67 %
2)Доля домин.форм. в 3 разв. = 273585/301887×100% = 90,62 %
Признаки доминирующих микроорганизмов:
Культуральные |
Морфологические |
1. Форма колонии – округлая 2. Размер – 0,3-0,4 см 3. Цвет – зеленый 4. Блеск – матовый 5. Поверхность – шероховатая 6. Структура – неоднородная |
1.Форма клетки – собраны в кисти 2. Характер расположения клеток – хаотично
|
Фото 16. Penicillium sp. Фото 17. Trichoderma sp.
Увеличение: х1600
Увеличение:
х1600
Фото 18. Среда Гетчинсона
(Trichoderma sp.)
Фото
19 и 20. Среда Гетчинсона (Trichoderma
sp.)
2-е разведение
Фото 21 и 22. Среда Гетчинсона (Trichoderma sp.) 3-е разведение
Качественная оценка микроорганизмов на среде Эшби методом обрастания комочков почвы
Общее число комочков |
Количество обросших комочков |
% обросших комочков от общего числа |
30 |
21 |
70% |
Фото 23. Среда Эшби (Azotobacter ch.)
Цвет колонии – коричневый
Консистенция – слизистая
На среде обнаружен Azotobacter choroococcum
Рис. 4 Azotobacter choroococcum
Увеличение: х1600
Численность микроорганизмов различных групп в 1г воздушно-сухой почвы.
Общее кол-во микроорганизмов на МПА (КОЕ/г) |
Общее кол-во актиномицетов (КОЕ/г) |
Общее кол-во микроскопических грибов (КОЕ/г)
|
Кол-во микро- организмов, разлагающих Клетчатку (КОЕ/г)
|
Плотность азотобактера в почве, в %
|
6358491 |
136793 |
249246 |
179246 |
70%
|