4. Ферменты цтк, кдз их определения. Роль витаминов в цтк.

Ферменты ЦТК и клинико-диагностическое значение их определения.

ЦК играет также главную роль в процессах глюконеогенеза, переаминирования , дезаминирования аминокислот и липогенеза. Хотя ряд этих процессов протекает во многих тканях, печень - единственный орган, в котором идут все перечисленные процессы. Поэтому серьезные последствия вызывает повреждение большого числа клеток печени или замещение их соединительной тканью, как это имеет место при остром гепатит е или циррозе. О жизненно важной роли ЦК свидетельствует и тот факт, что у человека почти неизвестны генетически обусловленные изменения ферментов, катализирующих реакции цикла; вероятно, наличие таких нарушений несовместимо с нормальным развитием.

Для двух ферментов цикла Кребса измерение активности нашло применение в диагностике некоторых заболеваний. Это изоцитрат- и малатдегидрогеназы. Повышение их активности в крови свидетельствует о степени повреждения тканей. Малатдегидрогеназа нашла применение как фермент, используемый для определения активности трансаминаз в комбинированном наборе реактивов.

Функцию ЦТК изучают:

• по убыли ацетил-КоА, используя реактив Фолина, появляется синее окрашивание.

• По образованию углекислого газа, который связывается с гидроксидом кальция и определяется при добавлении серной кислоты (выделяются пузырьки газа).

• По образованию атомов водорода, которые взаимодействует с 2,4-дихлорфенолиндофенолом с обесцвечиванием раствора.

Роль витаминов в ЦТК.

В цикле лимонной кислоты выполняют специфические функции четыре водорастворимых витамина группы B.

1) Рибофлавин (В₂ )входит в состав ФАД, который является кофактором альфакетоглутаратдегидрогеназного комплекса и сукцинатдегидрогеназы .

2) Никотинамид (РР) входит в состав НАД, который является коферментом трех дегидрогеназ цикла:

изоцитратдегидрогеназы , α-кетоглутаратдегидрогеназы и малатдегидрогеназы.

3) Тиамин (B1) входит в состав тиаминдифосфата , который является коферментом α-кетоглутаратдегидрогеназы.

4) Пантотеновая кислота (В₅) входит в состав кофермента A , который является кофактором, связывающим "активные" ацильные остатки, например, в ацетил-КoA или сукцинил-КoA .

5. Энергетический баланс цтк, его биологическое значение.

Скорость реакций цитратного цикла зависит от скорости тканевого дыхания митохондрий, от интенсивности процесса окислительного фосфорилирования. А скорость дыхания и фосфорилирования в свою очередь зависит от того, как быстро расходуется АТФ (или увеличивается концентрация АДФ).

Определяющим фактором регуляции активности цикла Кребса является дыхательный контроль, т.е. отношение АТФ/АДФ: чем меньше это отношение, тем интенсивнее идет дыхание, обеспечивающее выработку АТФ. При увеличении концентрации АДФ увеличивается скорость дыхания, т.е. интенсивнее потребляются субстраты цикла Кребса и скорость протекания реакций этого цикла увеличивается.

Активность цитратного цикла зависит также от соотношения НАД⁺/НАДН, что в свою очередь зависит от скорости потребления АТФ. При недостатке НАД⁺ активность дегидрогеназ цикла будет снижаться, поскольку именно окисленная форма кофермента является акцептором водорода субстратов цикла Кребса.

Кроме такой общей регуляции, зависящей от функционирования дыхательной цепи, имеется регуляция на уровне самого цикла.

Так, АТФ может ингибировать цитратсинтазу по аллостерическому механизму. Основным регуляторным ферментом является изоцитратдегидрогеназа. Она аллостерически ингибируется АТФ и НАДН, а активируется АДФ. Сукцинатдегидрогеназа ингибируется избытком оксалоацетата.