Занятие 6. Определение интенсивности дыхания Задание 22. Упрощенный метод определения интенсивности дыхания (по Бойсен-Иенсену)

Настоящий метод основан на учете количества углекислого газа, выделяемого растением в замкнутом пространстве и поглощаемого баритом. Удобным объектом для работы служат семена. Нужно сравнить интенсивность дыхания прорастающих и покоящихся семян пшеницы.

Следует иметь в виду, что у этого метода есть недостатки: объект находится в замкнутой атмосфере, где может возникнуть дефицит кислорода, и в парах барита, ядовитого для организмов.

Ход работы. В три конические колбы с пробками емкостью на 100-200 мл налить с помощью бюретки по 10 мл 0,1N Ва(ОН)₂. Барит ядовит для человека, и пипеткой брать его небезопасно! Колбы закрыть пробками, чтобы избежать попадания в барит углекислоты из воздуха.

На технических весах взять навески по 3 г сухих и прорастающих семян пшеницы и поместить их в марлевые мешочки. Мешочки подвесить в колбы над баритом с помощью крючков, вставленных в резиновые пробки. Необходимо следить, чтобы марля не касалась раствора барита. Третью колбу без семян использовать в качестве контроля.

Экспозиция опыта не должна превышать 1 часа, так как семена могут оказаться в анаэробных условиях. В ходе опыта колбы надо аккуратно покачивать, чтобы разрушить пленку углекислого бария, образующегося на поверхности раствора при поглощении СО₂. Время опыта должно быть точно учтено.

В конце опыта барит в колбах оттитровать 0,1 N раствором щавелевой кислоты. Титрование лучше начать с контрольной колбы. Сначала установить мениск раствора щавелевой кислоты в бюретке, только после этого открыть пробку и вынуть мешочек с семенами. В раствор барита внести 2-3 капли фенолфталеина, который в щелочи приобретает розовую окраску. Титрование проводить по возможности быстро, чтобы барит не успел поглотить много СО₂ из воздуха. Конец титрования определяется по обесцвечиванию фенолфталеина от одной капли щавелевой кислоты. Раствор становится молочно-белым, и при дальнейшем прибавлении щавелевой кислоты окраска его не меняется. Поэтому важно не пропустить конец титрования. Для проверки точности титрования в обесцвеченный раствор можно капнуть барит: при хорошей работе от одной капли Ва(ОН)₂ раствор снова порозовеет.

Расчет интенсивности дыхания сделать по формуле:

J =((a-b)* 2,2*60) / (n*t) мг СО₂/г/час (8),

где а - количество щавелевой кислоты, пошедшей на титрование в контроле, мл;

в - количество щавелевой кислоты, пошедшей на титрование в опытном варианте, мл;

2,2 - мг СО₂, соответствующей 1 мл 0,1 N щавелевой кислоты;

n- вес сухих семян, г;

t - время опыта, мин.

Результаты титрования и расчетов записать в таблицу..

Таблица 17.

Схема записи опыта

Объект	Навеска семян, г	Продолжи-тельность опыта, мин	Пошло на титрование 0,1N щавелевой кислоты, мл		Интенсивность дыхания семян, мг СО2/г/час
			контроль	опыт
Сухие семена
Прорас-тающие семена

В конце работы сделать вывод о зависимости интенсивности дыхания от влажности семян