Характеристика Trp- -мутантов бактерий Pseudomonas

Мутант	Рост на минимальной среде с добавлением метаболита:				Накапливаемый метаболит
	антранилат	КФАДРФ	индол	триптофан
trpA	–	–	–	+	индол-3-глице-рофосфат
trpB	–	–	–	+	индол
trpC	–	–	+	+	КФАДРФ
trpD	–	+	+	+	антранилат
trpE	+	+	+	+	хоризмат

Примечание: КФДАРФ – 1-(о-карбоксифениламино)-1-дезоксирибулозо-фосфат.

Определите последовательность этапов синтеза триптофана и расположите гены в порядке контролируемых ими этапов.

21. Предположим, что синтез клеточного метаболита G у бактерий E. coli осуществляется по пути, включающему несколько этапов. Соединения А, B, C, D, E и F являются промежуточными продуктами этого пути, однако порядок их синтеза не известен. Для того чтобы установить очередность синтеза этих соединений, были получены мутанты (номера с 1-го по 7-й) с блоками различных этапов этого пути. Затем мутанты были проверены на способность к росту на среде, содержащей тот или иной предшественник. Ниже в таблице приведены характеристики полученных мутантов (табл.8).

Таблица 8

Способность к росту мутантов e. Coli на соединениях а - g

Мутанты	Соединения
	A	B	C	D	E	F	G
1	+	+	+	+	+	-	+
2	-	-	-	-	-	-	+
3	-	+	+	-	+	-	+
4	-	+	-	-	+	-	+
5	+	+	+	-	+	-	+
6	+	+	+	+	+	+	+
7	-	-	-	-	+	-	+

Определите последовательность этапов синтеза промежуточных продуктов А–G в изучаемом биосинтетическом пути и установите местоположение мутаций 1–7.

22. Путь биосинтеза глютамина (Gln) и пролина (Pro) имеет несколько общих промежуточных продуктов. У дрожжей были получены ауксотрофные мутанты 1–7, нуждающиеся для своего роста либо в глутамине, либо пролине. У полученных мутантов также была проверена способность к росту на предшественниках А–Е. Характеристика мутантов представлена в табл.9.

Таблица 9

Способность к росту мутантных дрожжей

на предшественниках синтеза глутамина и пролина

Мутанты	Соединения
	А	В	С	D	E	Gln	Pro	Gln+Pro
1	+	-	-	-	+	-	+	+
2	-	-	-	-	-	-	+	+
3	-	-	+	-	-	-	-	+
4	-	-	-	-	-	+	-	+
5	-	-	+	+	-	-	-	+
6	+	-	-	-	-	-	+	+
7	-	+	-	-	-	+	-	+

Определите последовательность этапов синтеза предшественников глютамина и пролина, а также установите местоположение изучаемых мутаций.

23. Были изолированы мутанты Aspergillus, нуждающиеся для роста на минимальной среде в добавке соединения G. Соединения А-Е являются промежуточными продуктами пути синтеза G, однако порядок их синтеза не известен. Для того, чтобы определить этапы синтеза данного соединения мутанты были проверены на способность к росту на средах в присутствии каждого из этих соединений (табл. 10).

Таблица 10

Способность к росту мутантов дрожжей

на промежуточных продуктах пути синтеза соединения G

Мутанты	Соединения
	А	В	С	D	Е	G
1	-	-	-	+	-	+
2	-	+	-	+	-	+
3	-	-	-	-	-	+
4	-	+	+	+	-	+
5	+	+	+	-	-	+

1. Какова очередность синтеза соединений А-G в рассматриваемом биосинтетическом пути?

2. Определите местоположение мутаций 1-5.

На каких добавках будут расти гетерокарионы, сформировавшиеся у двойных мутантов после скрещивания – 1, 3 и 2, 4; 1, 3 и 3, 4; 1, 2 и 2, 4 и 1, 4?

132