- •Вопросы для зачета по молекулярной биологии
- •История открытия и изучения нуклеиновых кислот.
- •Доказательства генетической роли днк.
- •Методы изучения нуклеиновых кислот.
- •Строение днк. Альтернативные формы двойной спирали днк.
- •Типы рнк, их распространенность и локализация в клетке. Строение рнк на примере тРнк.
- •Денатурация и ренатурация нуклеиновых кислот. Гибридизация рнк и днк.
- •Функции нуклеиновых кислот.
- •Механизм репликации по Уотсону и Крику. Эксперимент Мезельсона и Сталя.
- •Модели репликации.
- •События в репликативной вилке.
- •Ферменты репликации.
- •Особенности репликации днк у про- и эукариот.
- •Репликация теломерных участков. Теломеразная теория старения. Теломераза и онкогенез.
- •Репликация рнк.
- •Спонтанные и индуцированные повреждения днк.
- •Прямая коррекция поврежденной днк.
- •Sos репарация.
- •Световая репарация.
- •Эксцизионная репарация.
- •Рекомбинативная репарация.
- •Значение репарации.
- •Апоптоз.
- •Кроссинговер, его механизм и биологическое значение.
- •Значение рекомбинации.
- •Синтез рнк на днк- матрице. Общие принципы транскрипции.
- •Организация и функции промоторов.
- •Ферменты транскрипции.
- •Особенности транскрипции у про- и эукариот.
- •Ингибиторы транскрипции.
- •Интроны и экзоны. Основные характеристики интронов.
- •Процессинг рнк эукариот и прокариот.
- •Альтернативный сплайсинг.
- •Теории мозаичного строения генов эукариот.
- •Обратная транскрипция, ее медицинское и хозяйственное значение.
- •История открытия и свойства генетического код.
- •Трансляция у прокариот.
- •Трансляция у эукариот.
- •Репрограммирование трансляции.
- •Ингибиторы трансляции.
- •Строение и функции рибосом у про- и эукариот.
-
Модели репликации.
1. Полуконсервативная ( каждая из цепей выполняет функцию шаблона, а вновь синтезированные молекулы являются гибридными -состоят из одной старой и одной новой цепей)
2. консервативная (раскручивания спирали ДНК не происходит, она служит матрицей для двух новых цепей, в результате чего родительская спираль целиком состоит из старого, а дочерняя — из нового материала)
3. Дисперсивная( родительская спираль ДНК при удвоении разрывается на каждом полуобороте путем множественной фрагментации, а синтез новых цепей происходит на фрагментах)
-
События в репликативной вилке.
Нуклеиновые кислоты синтезируются только от 5'- к З'-концу. Проблема решается таким образом, что на одной из родительских нитей новая нить синтезируется непрерывно в направлении 5'-3', что совпадает с движением вилки репликации. Это называется лидирующей или ведущей. Другая нить называется отстающей или запаздывающей, так как синтез на ней идет с некорой задержкой по сравнению с лидирующей нитью. Это связано с тем, что ДНК на этой нити синтезируется также от 5' к 3', но в направлении, противоположном движению вилки и короткими фрагментами. Благодаря этому разнонаправленный синтез ДНК может осуществляться в рамках одной структуры – репликативной вилки. Длина таких коротких фрагментов у прокариот составляет 1000-2000 пн. По имени открывшего их ученого они были названы «фрагментами Оказаки». По мере движения репликативной вилки концы соседних фрагментов Оказаки соединяются с образованием непрерывной отстающей нити.
Вилка репликации может двигаться как в одну сторону от точки инициации, тогда этот процесс называется однонаправленной репликаций, так и в обе стороны. В таком случае речь идет о двунаправленной репликации. У эукариот репликация обычно двунапраленная.
Механизмы инициации репликации в точке начала репликации и при образовании фрагментов Оказаки в отстающей цепи в принципе аналогичны, хотя имеются некоторые тонкие различия. В обоих случаях происходит образование коротких РНК-затравок (праймеров),комплементарных матричной ДНК, в виде продолжения которых синтезируется новая цепь ДНК. В дальнейшем короткие вставки РНК замещаются сегментами ДНК, которые затем объединяются с образованием непрерывной отстающей нити.
-
Ферменты репликации.
В каждой точке ori образуется 2 ферментных комплекса.
-
Геликаза- расплетает ДНК
-
Топоизомеразы- разрезают нить ДНК (топоизомераза α), сшивают. Топоизомераза 2 режет обе нити ДНК
-
ДНК-полимеразы
Прокариоты-3 вида
Эукариоты-8 видов
-
Один нуклеотид соединяет с другими, производит самопроверку на комплементарность
-
Убирает праймеры, заполняет бреши после праймеров
-
Репаративный синтез ДНК
-
ДНК- праймаза. Синтезирует праймеры, отдельные ферменты у прокариот, часть ДНК-полимеразы у эукариот
-
Особенности репликации днк у про- и эукариот.
Эукариоты:
-
Репликация начинается во многих точках ori и происходит асинхронно
-
Скорость репликации 20-100 нукл/сек
-
5 типов ДНК-полимеразы
-
α-синтез праймера
-
β-синтез праймера, застраивание бреши
-
γ- репликация митохондриальной ДНК
-
δ-основной фермент репликации
-
ε-фермент реплицирующий отстающую цепь ДНК
-
Из-за удаления последнего праймера отстающая цепь всегда короче
-
Теломерные участки реплицируются по специальному механизму
-
Не все полимеразы обладают экзонуклеазной активностью
-
Фрагмент Оказаки длиной 150-200 нуклеотидов
-
ДНК в комплексе с гистонами
Прокариоты:
-
Один репликон и одна точка ori, которой ДНК фиксируется к плазмалемме
-
Скорость 1000 нукл/сек
-
Три типа ДНК-полимеразы
-
I- учавствует в репликации, коррекции, репарации и удалении РНК-праймеров
-
II-фермент репарации, заполняет бреши и удаляет праймеры
-
III-главный фермент репликации, обладает полимеразной и экзонуклеарной активностями
-
Полимеразы являются экзонуклеарными
-
Фрагменты Оказаки длиной 1000-2000 нуклеотидов
-
ДНК не связана с белками