IV. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ

1. Опыт по диффузии

Для количественной оценки проницаемости гемодиализной пленки можно воспользоваться формулой Коллендера - Берлунда:

dmdt PS C ,

где dm/dt – скорость проникновения вещества через гемодиалнзную пленку, (dm – масса вещества, проходящего через пленку за время dt), P – коэффициент проницаемости гемодиализной пленки, S – площадь пленки, C – разность концентраций вещества по обе стороны пленки,.

Следовательно: P m ,

S C t

где m – масса вещества, проходящего через пленку за время t.

Для практического определения коэффициента проницаемости следует провести опыт по диффузии.

Единицы измерения

Мы принимаем следующие единицы измерения:

C – г/мл, t – с,

m – г,

S – см2.

Значит единица измерения коэффициента проницаемости:

Единица измерения коэффициента проницаемости имеет размерность скорости, т.е. коэффициент проницаемости определяет скорость диффузии.

105

Описание установки

пробирка

уровень воды в стакане

раствор метиленового - синего стакан с водой

Небольшое количество однопроцентного раствора метиленового синего находится в пробирке, отверстие которой затянуто гемодиализной пленкой. Метиленовый синий – это краситель, используемый в биологии для оценки функционального состояния живых тканей.

Т.к. мы используем 1% раствор метиленового синего, то в пробирке C1 = 0.01 г/мл а в стакане (с дистиллированной водой) C2 = 0 г/мл, т.е. известна разность концентраций по обе стороны пленки ΔC.

При выполнении работы пробирка располагается гемодиализной пленкой вниз. При этом слой метиленового синего составляет 3-5 мм. Пробирка с пленкой и метиленовым синим погружается в стаканчик с дистиллированной водой на такую глубину, чтобы поверхность метиленового синего в пробирке находилась на одном уровне с поверхностью воды в стаканчике.

Вследствие проницаемости гемодиализной пленки, некоторая часть метиленового синего переходит в дистиллированную воду и окрашивает ее. Для определения концентрации окрашенного раствора в данной работе используется фотоколометрический метод анализа.

2. Определение концентрации фотоколориметрическим методом

Для подготовки прибора к измерениям и их выполнения:

1.Закрывают шторку осветителя; выставляют эталонный раствор в правый световой пучок.

2.Выставляют на шкалах правого и левого барабанов значения 0 (используют красные числа на шкалах, означающие оптическую плотность).

3.Открывают шторку и вращением левого барабана устанавливают стрелку гальванометра на ноль (при этом интенсивности правого и левого световых потоков одинаковы).

4.Переводят в правый световой пучок кювету с растворителем (водой).

5.Вращением правого барабана устанавливают стрелку гальванометра на ноль.

6.По шкале правого барабана определяют оптическую плотность D.

7.По полученным данным для пяти растворов строят калибровочный график в координатах оптическая плотность – логарифм концентрации.

106

8.Используя калибровочный график, определяют для полученных в процессе эксперимента растворов их концентрацию и рассчитывают проницаемость мембраны.

Фотоколориметр: внешний вид

шкала для отсчета значения оптической

правый барабан

отсек для кювет

гальванометр

левый

107

Лабораторная работа № 24

Определение коэффициента проницаемости биологических структур

на примере гемодиализной плёнки

Студент:

Группа:

Преподаватель:

Дата:

Оценка:

108