
- •1.Значение биотехнологии и история развития.
- •2.Состояние и применение достижений биотехнологии в народном хозяйстве.
- •3.Решение мировых проблем биотехнологическими методами.
- •4.Клональное размножение in vitro. Значение и преимущества.
- •5.Этапы микроклонального размножения растений in vitro.
- •6.Экспланты
- •7) Методы стерилизации эксплантов.
- •8) Питательные среды и условия выращивания растений in vitro.
- •9) Методы быстрого размножений растений in vitro
- •10. Распространение вирусов картофеля.
- •11. Подготовка растительного материала к оздоровлению: термотерапия и химиотерапия.
- •12. Термотерапия и химиотерапия при оздоровлении растений меристемным методом от патогенов.
- •13. Схема оздоровления картофеля от вирусных, виридных и микоплазменных болезней.
- •14. Ускоренное размножение оздорвленного картофеля.
- •15. Коллекция оздорвленных сортов картофеля для безпрерывного выращивания.
- •16. Технология выращивания и фитосанитария оздоровительного картофеля
- •17. Ифа. Метод двойных антител.
- •18. Антитела, антиген, конъюгат, метка – их роль при ифа.
- •19. Применение методов ифа при оздоровлении растений от патогенов.
- •20.Культивирование и слияние протопластов. Соматическая гибридизация.
- •21. Создание ассоциаций клеток растений с микроорганизмами.
- •22. Трансгенные растения. Значения, состояние в мире.
- •23. Получение трансгенных растений, устойчивых к грибным, вирусным болезням, стрессам, с повышенной продуктивностью.
- •24) Получение трансгенных растений устойчивых к вредителям.
- •25.Получение трансгенных растений,устойчивых к гербицидам
- •26.Этапы получения генномодифицированных растений. Векторы переноса генов в растения.
- •27.Организация бт лаборатории.
- •28.Работа в ламинарном боксе. Подготовка бокса ,способы стерилизации.
12. Термотерапия и химиотерапия при оздоровлении растений меристемным методом от патогенов.
Основное преимущество МКР - получение генетически однородного, безвирусного посадочного материала.
Успех МКР зависит от меристематического экспланта. При этом отмечается закономерность: чем больше листовых зачатков и тканей, тем легче идут процессы морфогенеза, заканчивающиеся образованием целого растения.
Снизить риск попадания вирусов в здоровые ткани можно путем применения предварительной термо- или химиотерапии исходных растений.
термотерапия применяется как в условиях in vivo, так и in vitro и предусматривает использование горячего сухого воздуха.
-при высоких t разрушаются белковая оболочка и нуклеиновая кислота вируса.
-действие высоких t на вирусы через метаболизм растений.
При такой t начинает преобладать деградация вирусных частиц, а синтез их, наоборот, уменьшается. Растения, подвергающиеся термотерапии, помещают в термокамеры, где t в течение первой недели повышается с 25 до 37оС путем ежедневного увеличения t на 2°. Все остальные режимы обязательно поддерживаются в оптимальном состоянии: освещенность, высокая относительная влажность воздуха, определенный фотопериод. Продолжительность термостатирования зависит от состава вирусов и их термостойкости. Если для гвоздики достаточно 10 - 12 недельного воздействия теплом, то для хризантемы превышает 12 недель.
Помимо положительного действия высоких t на освобождение от вирусов, выявлено аналогичное влияние их на точку роста и процессы морфогенеза некоторых цв культур (гвоздики, фрезии) в условиях in vitro. Высокие t увеличивают коэффициент размножения на 50 - 60%, повышаю адаптацию пробирочных растений к почвенным условиям и позволяют получить больше безвирусных маточных растений.
химиотерапия. В питательную среду, на которой культивируют апикальные меристемы, добавляют препарат вирозола в концентрации 20-50 мг/л - противовир препарат широкого спектра действия. Применение его позволяет увеличить число безвирусных растений с 40% до 80 - 100%.
13. Схема оздоровления картофеля от вирусных, виридных и микоплазменных болезней.
Этапы:
Подготовка клубней к проращиванию и взятию ростков длиной 1-2 см.
Вычленение из ростков меристем
Размножение in vitro на пит среде. Проверка на вирусы методом ИФА. Зараженные меристемы выбраковываем, а потомство безвирусных меристем размножаем.
Растения высаживаем на in vitro.
Высадка в грунт теплицы. Получение мини-клубней (тепличные клубни).
14. Ускоренное размножение оздорвленного картофеля.
Размножение частями растений после оздоровления.
Использ жидкую среду М_С без агара, сахаров, витаминов, но с гармонами. В среду кладут вату, чтобы не утанули - залив пит среды - высаж-е - крышка.
Размнож-е верхушками побегов. Кончик в корневин - накрыть плёнкой
Размнож-е черенками. Разрез-т, подсуш-т (чтобы срезы опробковели). Срез обраб золой - посадка
1) Размножение in vitro.
2) Размножение в поле/теплицы.
1 – Верхушками побегов.
2 – размнож боковых побегов.
3 – Микроклубни in vitro
4 – Листовыми черенками.
5 – Ростками.
Летом-верхушки побегов. Зимой и весной - ростки с клубня.