- •1.Значение биотехнологии и история развития.
- •2.Состояние и применение достижений биотехнологии в народном хозяйстве.
- •3.Решение мировых проблем биотехнологическими методами.
- •4.Клональное размножение in vitro. Значение и преимущества.
- •5.Этапы микроклонального размножения растений in vitro.
- •6.Экспланты
- •7) Методы стерилизации эксплантов.
- •8) Питательные среды и условия выращивания растений in vitro.
- •9) Методы быстрого размножений растений in vitro
- •10. Распространение вирусов картофеля.
- •11. Подготовка растительного материала к оздоровлению: термотерапия и химиотерапия.
- •12. Термотерапия и химиотерапия при оздоровлении растений меристемным методом от патогенов.
- •13. Схема оздоровления картофеля от вирусных, виридных и микоплазменных болезней.
- •14. Ускоренное размножение оздорвленного картофеля.
- •15. Коллекция оздорвленных сортов картофеля для безпрерывного выращивания.
- •16. Технология выращивания и фитосанитария оздоровительного картофеля
- •17. Ифа. Метод двойных антител.
- •18. Антитела, антиген, конъюгат, метка – их роль при ифа.
- •19. Применение методов ифа при оздоровлении растений от патогенов.
- •20.Культивирование и слияние протопластов. Соматическая гибридизация.
- •21. Создание ассоциаций клеток растений с микроорганизмами.
- •22. Трансгенные растения. Значения, состояние в мире.
- •23. Получение трансгенных растений, устойчивых к грибным, вирусным болезням, стрессам, с повышенной продуктивностью.
- •24) Получение трансгенных растений устойчивых к вредителям.
- •25.Получение трансгенных растений,устойчивых к гербицидам
- •26.Этапы получения генномодифицированных растений. Векторы переноса генов в растения.
- •27.Организация бт лаборатории.
- •28.Работа в ламинарном боксе. Подготовка бокса ,способы стерилизации.
9) Методы быстрого размножений растений in vitro
1)Микрочер-е побега. Побег сохран апикальное доминирование. Применяют для растений образующие длинные стебли: виноград,картофель,хризантемы. Стебли разрезают на черенки и высевают на пит. среду ИУК.
2)Активация пазушных меристем. В пит среду добав цитокенин (6-БАП), к- й приводит к образ множества побегов, т.к. сниж-т апикаль доминирование. Побеги сним-т и высаж-т для укор-я на среду с уик, для образ побегов на среду 6-БАП. Земляника, малина, плодовые, цв. культуры (гвоздика), овощи (топинамбур, огурцы).
3)Образ-е адвинтив почек. АП возник из растит клеток и тканей, где они обычно не образуются, например на листьях. Питательная среды – цитокинины плюс индолилуксусная кислота. Размножает салат, томат, чеснок, гладиолусы. Томаты, лук, чеснок, фиалка, луковичные.
4)В ферментёрах. Ф-р с прозрач стенками, гот-т жидкую среду, помещ-т каллусную ткань, черенки. Калус превращ в стебелёк. Микроко-клубни кратофеля.
5)Образование соматических зародышей (не половых). Основан на эмбриогенезе Получают каусную ткань ее помещают в пит. среду культивируют в суспензионной культуре. Добавляют цитокинины, но понижают содержание 2,4 Д. Полученные зародыши капсулируют и получают драже (искусственные семена). Морковь, виноград, ячмень, пшеница, ель
10. Распространение вирусов картофеля.
Картофель зараж-ся 30-ю видами. Через семена вирусы не передаются, обеззараж через марганцовку.
вирус скручивания листьев картофеля, ВСЛК (potato leaf roll virus, PLRV);
Y вирус картофеля, УВК (Potato virus Y, PVY);
X вирус картофеля, XВК (Potato virus X, PVX);
S вирус картофеля, SВК (Potato virus S, PVS);
M вирус картофеля, MВК (Potato virus M, PVM)
Меньшее значение по широте распространения в России и степени вредоносности имеют:
A вирус картофеля, AВК (Potato virus A, PVA);
вирус аукуба мозаики картофеля (Potato aucuba mosaic virus, PAMV);
вирус метельчатости верхушки картофеля, BMBK (Potato mop top virus, PMTV);
вирус погремковости табака, «ратлл вирус» (Tobacco rattle virus, TRV);
вирус черной кольцевой пятнистости томатов (Tomato black ring virus, TBRV);
вирус желтой карликовости картофеля ВЖКК (Potato yellow dwarf virus, PYDV) и др.
зараженность в голландии 0,09%, Германия 0,5%
11. Подготовка растительного материала к оздоровлению: термотерапия и химиотерапия.
Термотерапия. Применяется t критич-я для раст-й, к-я сниж-т конц (затруд сборка вируса) и увеличв меристеме безвирусная зона, что позволяет увелич размер экспоантаи повыш их выжив-ть.
Безвир-я зона повыш до 0,3-0,5 мм. При t 25 хорошая сборка вирусов.
Режимы: клубни: 37-38 круглосуточно; 1-1,5 КлК; 80-90 % влаж-ть; 10-20 суток
Раст-я в горшках: 37-39 t; 4-6 клк; 90-95 % влаж-ть; 15-25 суток
Ин витро: 40-40 t вверху пробирки; 37-38 t у корней; 10-20 суток; 4-6 клк
У картофеля инактив-ся вирусы скруч-я листьев картофеля (ВСЛК) и вирус махровой верхушки картофеля.
Из исходных эксплантов извлек-т меристемы после стерилиз-и МБС-10 -> 6БАП. Сначала на небольшое освещение, постепенно повышая.
Химиотератия. Подавление вирусов спец-ми в-ми. Вирозол
Р-р препаратов пропускт через бак-й фильтр и вносят после стерилизации среды повыш-я выход безвирус-х меристем на 10-35 и здоровых растений получ-т в 2 р больше.