ИММУНОГЛОБУЛИНЫ
Ультрафильтрация также успешно используется для получения 16,5% раствора иммуноглобулина из фракции II по Кону (чистота иммуноглобулина более 95%). Данные приводимого ниже примера основаны на результатах работы реальной системы, производящей раздельную обработку 50 литров фракции ГГ по Кону.
Фракция II по Кону
Объем: 5 литров
|
а) Растворение: |
|
|
|
добавить до 10 л/кг 0,154 NaCl |
|
|
|
содержащего 0,3 М глицерина |
|
|
|
для растворения пасты |
Объем: 55 литров |
|
Фракция II по Кону (раствор) |
|
||
|
|
||
Иммуноглобулин: 30 г/л |
|
|
|
Спирт: |
30 г/л |
|
|
|
|
|
|
б) Предварительное концентрирование (х 3)
Иммуноглобулин: 90 г/л Спирт: 30 г/л
в) Отмывание (схема трех объемов)
Иммуноглобулин: 90 г/л Спирт: 30 г/л
г) Концентрирование (х 2,1)
Иммуноглобулин: 190 г/л Спирт: 3 г/л
Добавить смывки с кассеты «Пелликон» (1,4 л)
Объем: 18 литров
Объем 18 литров
Объем: 9,1 литра
Иммуноглобулин: 165 г/л |
Объем: 10,5 литра |
||||
Спирт: |
3 г/л |
||||
|
|||||
|
|
|
|
|
|
|
|
Стерилизующая фильтрация и заполнение |
|
||
|
|
|
|
|
|
|
|
Раствор |
|
|
|
|
|
иммуноглобулина |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Рис.6. Получение иммуноглобулинов ультрафильтрацией
а) Растворение
Фракция II по Кону имеет консистенцию пасты и перед обработкой методом ультрафильтрации необходимо ее растворить в солевом растворе, содержащим глицин. Глицин играет роль стабилизатора иммуноглобулина.
б) Предварительное концентрирование
Эта операция проводится с той же целью, что и при получении альбумина, как описано в разделе в).
в) Отмывание при постоянном объеме
На этом этапе обработка при постоянном объеме производится для удаления спирта и низкомолекулярных примесей. Для осуществления этой стадии используется тот же солевой
6
ООО "МикроТех" 8(495)943-13-99 8(495)778-68-00 www.ecolabmicrotex.ru
раствор, что и при растворении пасты фракции II. Промывка осуществляется тремя объемами, что означает, что удаляется 90% общего содержания спирта.
г) Концентрирование
Конечное концентрирование осуществляется в две стадии, как и при очистке альбумина:
1.Концентрация увеличивается до содержания иммуноглобулина 190 г/л, что превышает требуемую концентрацию. Эта концентрация является ограничивающей, так как растворы иммуноглобулина отличаются высокой вязкостью и концентрации выше 190 г/л приводят к очень низким скоростям ультрафильтрационного потока.
2.Кассетная система «Пелликон» промывается 1,3 литрами апирогенной воды и эти промывки добавляются к концентрированному раствору иммуноглобулина, снижая его концентрацию до 165 г/л.
д) Комплектация и рабочие характеристики ультрафильтрационной системы
Оборудование для ультрафильтрации: |
2 ячейки «Пелликон» большого объема |
Ультрафильтрационная мембрана: |
установленные параллельно |
|
|
Тип: |
РТНК (порог отсечения 100 000 дальтон) |
Конфигурация: |
0,465 м2 на кассету |
Расположение: |
5 кассет/ ячеку |
Общая поверхность: |
4,65 м2 |
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
Настоящая краткая техническая информация содержит описание процессов очистки растворов альбумина и иммуноглобулина с использованием кассетной ультрафильтрационной системы «Пелликон».
Приводимые данные характерны только для сходных систем, работающих при сходных условиях и в зависимости от состава и происхождения - обрабатываемых фракций плазмы может потребоваться изменение некоторых деталей процесса.
Однако, кассетная система «Пелликон» убедительно продемонстрировала свои рабочие возможности в области фракционирования плазмы за последние пять лет с тех пор, как она впервые была использована для очистки альбумина.
Квалифицированные специалисты фирмы «Миллипор» всегда готовы оказать помощь при необходимости приспособления системы к конкретным требованиям и условиям рабочего процесса.
Для заказа обращайтесь в ООО "МикроТех" www.ecolabmicrotex.ru, info@mctex.ru 8(495)943-13-99 8(495)778-68-00
MILLIPORE
7
ООО "МикроТех" 8(495)943-13-99 8(495)778-68-00 www.ecolabmicrotex.ru