Условия хроматографирования
|
Колонка |
размером 125 × 4,0 мм, сорбент октадецилсилилсиликагель (С18), 5 мкм | |||
|
Предколонка |
размером 4 × 4 мм, сорбент октадецилсилилсиликагель (С18), 5 мкм | |||
|
ПФ |
А — ацетонитрил; В — фосфорной кислоты концентрированной раствор 5,0 г/л в воде. | |||
|
Способ элюирования |
программа градиента | |||
|
Время, мин |
А, об. % |
В, об. % | ||
|
0 – 5 |
47 |
53 | ||
|
5 – 7 |
47→50 |
53→50 | ||
|
7 – 9 |
50 |
50 | ||
|
9 – 16 |
50→60 |
50→40 | ||
|
16 – 20 |
60 |
40 | ||
|
20 – 25 |
60→100 |
40→0 | ||
|
25 – 30 |
100→47 |
0→53 | ||
|
30–45 |
47 |
53 | ||
|
Скорость потока, мл/мин |
1 | |||
|
Температура колонки, °С |
(20 ± 2) | |||
|
Детектор |
спектрофотометрический или диодная матрица | |||
|
Длина волны, нм |
220 | |||
|
Объем вводимой пробы, мкл |
10 | |||
|
Время регистрации хроматограммы, мин |
20 | |||
Хроматографируют раствор СО валереновой кислоты, получая не менее 3 хроматограмм. Результаты считаются достоверными, если выполняются требования теста «Проверка пригодности хроматографической системы».
Хроматографируют попеременно испытуемый раствор и раствор СО валереновой кислоты, получая не менее 3 хроматограмм. Расчет содержания суммы сесквитерпеновых кислот проводят методом внешнего стандарта. Обсчету подлежат основной пик валереновой кислоты и пик с относительным временем удерживания (по валереновой кислоте).
Содержание суммы сесквитерпеновых кислот в пересчете на валереновую кислоту в абсолютно сухом сырье в процентах (Х) вычисляют по формуле:
где S – площадь пика валереновой и ацетоксивалереновой кислот на хроматограмме испытуемого раствора;
а– навеска сырья, г;
ао– навеска СО валереновой кислоты, г;
Р– содержание основного вещества в СО валереновой кислоты, %;
Sо – площадь пика на хроматограмме раствора СО валереновой кислоты;
W – влажность сырья, %.
Экстрактивные вещества.В соответствии с требованиями ОФС «Определение содержания экстрактивных веществ в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах» (метод 1, экстрагент – спирт 70 %).
Примечание.Сумму сесквитерпеновых кислот определяют для сырья, предназначенного для получения лекарственных растительных препаратов (пачки, фильтр-пакеты) и экстрактов; экстрактивные вещества, извлекаемые спиртом 70 %, определяют для сырья, предназначенного для получения экстрактов.
Упаковка, маркировка и транспортирование. В соответствии с требованиями ОФС «Упаковка, маркировка и транспортирование лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».
Хранение.В соответствии с требованиями ОФС «Хранение лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».