Траншея с антителами

Рис. 6. 1. Принцип иммуноэлектрофореза:

а) электрофорез белков сыворотки крови; б) иммунодиффузия с образованием индивидуальных линий преципитации на каждый вид антигенов.

2. Иммуноэлектрофореграмма сывороточных белков (негатив).

III.2. Контрольные вопросы.

Укажите содержание общего белка в сыворотке крови

в норме.

В каких случаях отмечается гиперпротеинемия?

В каких случаях отмечается гипопротеинемия?

Укажите нормальные показатели тимоловой пробы.

При каких заболеваниях повышаются результаты тимоловой пробы?

Чему в норме равны значения пробы Вельтмана?

При какой патологии происходит повышение показателей пробы Вельтмана?

Какая патология сопровождается понижением показателей пробы Вельтмана?

Назовите основные фракции белков крови на электрофореграмме.

Перечислите иммунохимические методы определения белков.

Объясните основной принцип иммунохимических методов.

Материал для самоподготовки: I а)1. с.567-578; II; III.

Занятие № 18.

ТЕМА. СВЁРТЫВАНИЕ КРОВИ И ФИБРИНОЛИЗ

Цель занятия: 1.Ознакомиться с современными представлениями о свёртывании крови.

2.Знать роль основных факторов свёртывающей системы.

3.Усвоить природу противосвёртывающей системы крови.

4.Ознакомиться с методами определения фибриногена.

Исходный уровень знаний:

- структура и биологическая роль белков;

- классификация белков;

- каталитическая функция белков;

- кровь: химический состав, физико-химические характеристики, функции;

- форменные элементы крови;

- отличие плазмы крови от сыворотки.

Содержание занятия.

I.2. Плазменные факторы свёртывания крови: место синтеза, строение, функция.

Тромбоцитарные факторы свёртывания: название, функция.

"Внешний" и "внутренний" пути активации свёртывающей системы крови.

Схема фибринолиза.

Лекарственные препараты, используемые для лечения и профилактики тромбозов.

Гемофилии: природа, способы лечения.

II.1 Работа № 1. ОПРЕДЕЛЕНИЕ КОНЦЕНТРАЦИИ ФИБРИНОГЕНА ГРАВИОМЕТРИЧЕСКИМ МЕТОДОМ

(по Рутбергу Р.А.)

Принцип метода. При добавлении к плазме раствора хлористого кальция происходит свертывание фибриногена и выпадение его в осадок.

Количество выпавшего в осадок фибриногена определяют путем взвешивания сгустка на торсионных весах.

Порядок выполнения работы. В пробирку внести 1 мл плазмы и добавить 0,1 мл 5% раствора хлористого кальция. Пробирку встряхнуть и оставить в термостате при температуре 37⁰С на 15 минут. Образовавшийся фибриновый сгусток отжать на фильтровальной бумаге до исчезновения следов влаги. Отжатый сгусток взвесить на торсионных весах с точностью до 1 мг. Полученный результат умножить на коэффициент 0.222. Количественный результат выражается в граммах на 1 литр плазмы.

РЕЗУЛЬТАТ:

ВЫВОД:

Клинико-диагностическое значение.

У здоровых людей концентрация фибриногена в плазме колеблется в пределах 2 - 4 г/л. Значительное повышение концентрации фибриногена отмечается при системных заболеваниях соединительной ткани и острых воспалительных процессах. Снижение обусловлено, в первую очередь, нарушением синтеза при заболеваниях печени и потреблением в большом количестве при ДВС синдромах.

Работа № 2. МИКРОМЕТОД ОПРЕДЕЛЕНИЯ

ФИБРИНОГЕНА В В ПЛАЗМЕ

Принцип метода. Спиртовый раствор -нафтола осаждает из плазмы фибрин-мономеры и их комплексы с фибринопептидами А и В, фибриногеном.

Порядок выполнения работы. В центрифужную пробирку внести 0.5 мл. плазмы и добавить 2 капли 2% раствора -нафтола. Пробирку встряхнуть и оставить в штативе при комнатной температуре на 10 минут. При наличии в плазме фибриногена В в пробирке образуется сгусток, нити или гранулы.

Клинико-диагностическое значение.

В норме фибриноген В в крови не определяется. Появление фибриногена В в плазме обусловлено патологическим нарастанием уровня тромбина в крови, поэтому положительная реакция на фибриноген В имеет большое значение для диагностики пред- и тромботических состояний, ДВС-синдромов.

РЕЗУЛЬТАТ:

ВЫВОД:

III.2. Контрольные вопросы.

Какова концентрация фибриногена в плазме крови у здоровых людей?

Укажите причины гиперфибриногенемии, гипофибриногенемии.

Когда в плазме определяется фибриноген В?

Материал для самоподготовки: I а)1. с. 599-607; II; III.

64