- •Общая биотехнология
- •Оглавление
- •Работа 1. Культивирование клеток микроорганизмов с использованием ферментационного комплекса Biostat a plus
- •Работа 2. Определение интенсивности аэрации сульфитным методом
- •Ход анализа Определение объема раствора йода, необходимого для работы
- •Определение сульфитного числа до и после аэрации
- •Расчет сульфитного числа
- •Зависимость скорости поступлений кислорода в раствор сульфита от интенсивности аэрации
- •Определение азота и белка в кормовых дрожжах
- •Работа 3. Определение содержания общего азота (сырого протеина)
- •Проведение испытания
- •Обработка результатов
- •Работа 4. Определение массовой доли белка по Барнштейну
- •Проведение испытания
- •Работа 5. Определение липидов в кормовых дрожжах
- •Проведение испытания
- •Обработка полученных результатов
- •Техника безопасности при выполнении работы
- •Работа 6. Продукты метаболизма микроорганизмов. Спиртовое брожение
- •Динамика выделения со2в процессе брожения осуществляемого дрожжами
- •Работа 7. Дихроматно-йодометрический метод определения концентрации спирта
- •Проведение испытания
- •Основы микробиологического контроля биотехнологических производств
- •Работа 8. Определение общей бактериальной обсемененности.
- •Проведение испытания
- •Обработка результатов.
- •Рекомендации по оформлению отчета
- •Правила техники безопасности
- •Список литературы
Динамика выделения со2в процессе брожения осуществляемого дрожжами
|
Время, ч |
Вес колбы, г |
Количество СО2 | |||
|
от начала опыта |
за интервал времени | ||||
|
V, мл |
г/л |
г/л |
г/л/час | ||
|
|
|
|
|
|
|
Брожение обычно продолжается 2—4 суток. Завершение процесса устанавливают по прекращению газообразования. При снятии опыта необходимо провести расчет количества образовавшегося спирта из сброженного сахара исходя из массы выделившегося диоксида углерода в соответствии с уравнением спиртового брожения.
Контрольные вопросы
Какие условия влияют на интенсивность спиртового брожения?
Почему в качестве гидрозатвора используется серная кислота?
Как оценивается спиртообразующая способность различных штаммов дрожжей?
Какие ферменты участвуют в процессе спиртового брожения?
Работа 7. Дихроматно-йодометрический метод определения концентрации спирта
Дихроматно-йодометрический метод определения спирта широко распространен в виноделии, пивоваренном, спиртовом и ликерно-водочном производстве. Основное преимущество метода заключается в том, что им можно достаточно точно определять спирт в небольших объемах жидкости. Метод дает хорошо воспроизводимые результаты опытов при анализе водно-спиртовых продуктов с содержанием спирта 0,5—25 %. Точность метода значительно повышается за счет йодометрического определения избытка дихромата калия.
Для гарантии полноты окисления спирта до уксусной кислоты избыток дихромата калия должен быть не менее 2—3 мл, а в сферу реакции всегда должно вводиться одно и то же количество спирта. Поэтому продукты с содержанием спирта 5—15 % разбавляют в 10 раз, а более концентрированные растворы — в 20 раз, однопроцентные растворы анализируют без разбавления. Опыт проводят при температуре 18—20 °С.
Вследствие высокой концентрации титрованного раствора дихромата калия измерение его в ходе опыта должно быть очень точным, так как ошибка в 0,1 мл дает отклонение в крепости ± 0,2 об. %.
На точность результатов анализа дихроматно-йодометрическим методом влияют примеси этилового спирта, которые также окисляются дихроматом калия, но эти погрешности значительно ниже тех, которые имеют место при пикнометрических и ареометрических определениях спирта в низко-концентрированных водно-спиртовых растворах.
При определении спирта в винах, ликерах, наливках, пиве, спиртованном соке, морсе и бражке их вначале перегоняют.
Дихроматно-йодометрический метод определения спирта основан на окислении спирта дихроматом калия до уксусной кислоты. Избыток же дихромата калия, точно внесенного, и не прореагировавшего определяется, титрованием йодистым калием по уравнению:
К2Сr2O7 + 6KJ + 7H2SO4 = 3J2 + 4K2SO4+Cr2(SO4)3+ 7H2O.
Выделившийся свободный йод титруют тиосульфатом натрия. При этом йод окисляет Na2S2O3 до тетратионата натрия, восстанавливаясь доJ-12Na2S2O3+J2 =2NaJ +Na2S4O6.
В ходе этой реакции присущая йоду темно-бурая окраска исчезает постепенно, поэтому для установления конца реакции применяется чувствительный реактив на свободный йод — раствор крахмала, который с йодом образует соединение интенсивно синего цвета.
Титрование заканчивают, когда ярко-синяя окраска раствора перейдет в голубовато-зеленую.
По количеству израсходованного тиосульфата натрия устанавливают расход дихромата калия, пошедшего на окислениеспирта. Зная эквивалент раствора дихромата калия по спирту, определяют содержание этилового спирта в исследуемом растворе.
Эквивалент 0,5 н. раствора К2Сr2O7 по спирту рассчитывают из реакции окисления спирта:
2К2Сr207 → 3С2Н5ОН
2×294,22 г → 3×46,01 г
0,0245 → Х г
где Х — количество спирта, окисляемое 1 мл 0,5 н. раствора, К2Сr2O7 , г;
0,0245 — содержание К2Сr2O7 в 1 мл 0,5 н. раствора, г.
г.
или 0,00575/0,789 = 0,0073 мл.
Следовательно, 1 мл 0,5 н. раствора К2Сr2O7 эквивалентен 0,0073 мл спирта.
Реактивы.
0,5 н. раствор дихромата калия;
0,1 н. раствор тиосульфата натрия;
серная кислота, х. ч., d=l,84;
1 %-ный раствор крахмала;
10 %-ный раствор йодида калия.
