Добавил:
Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
Основы биотехнологии методичка.doc
Скачиваний:
107
Добавлен:
13.03.2016
Размер:
292.86 Кб
Скачать

Ход анализа Определение объема раствора йода, необходимого для работы

В коническую колбу на 250 мл отбирают 5 мл свежеприготовленного 0,8н. раствора сульфита и приливают к нему из бюретки раствор йода до появления светло-коричневой окраски. Так определяют необходимый объем раствора йода (α). Затем добавляют 0,5 мл 1% раствора крахмала и титруют 0,1н. раствором тиосульфата до исчезновения синей окраски. На титрование должно пойти 1-3 мл тиосульфата. Далее проверяют правильность определения объема йода (α): в чистую колбу на 250 мл наливают (α) мл 0,1н. раствора йода и титруют его тиосульфатом. Если объем йода подобран правильно, то на его титрование идет около 30-40 мл тиосульфата.

Определение сульфитного числа до и после аэрации

Для анализа наливают 100 и 300 мл 0,8 н. раствора сульфита в конические колбы. Затем из каждой колбы отбирают по 5 мл сульфита в конические колбы на 250 мл, в которые заранее наливают по (α) мл раствора йода. Колбы закрывают часовыми стеклами и оставляют в темноте на 5—10 мин., затем споласкивают часовые стекла дистиллированной водой в ту же колбу, которую они закрывали, и титруют содержимое 0,1 н. тиосульфатом. Количество тиосульфата в мл (Пн) записывают в таблицу.

Колбы с разными объемами сульфита помещают на 20 минут на качалку (время включения и выключения качалки замечают с точностью до 1 мин). К моменту выключения качалки в 2 колбы на 100 мл наливают подобранный для работы раствор йода (α). Остановив качалку, отбирают из встряхиваемых колб по 5 мл раствора сульфита и приливают пробы к раствору йода. Снова включают качалку еще на 20—25 мин. Отобранные пробы выдерживают в темноте и титруют 0,1 н. раствором тиосульфата, как указано выше. Количество мл тиосульфата (Пх1) записывают в таблицу. В ту же таблицу вносят результаты (Пх2), полученные титрованием пробы сульфита, отобранной еще через 20—25 мин.

Так как сульфит при аэрировании окисляется в сульфат, то на его связывание требуется все меньше йода и соответственно все больше тиосульфата идет на титрование свободного йода.

Расчет сульфитного числа

Скорость поступления кислорода в раствор сульфита:

мг О2/л/мин,

где Пн — количество мл 0,1 н. раствора тиосульфата, пошедшее на титрование, 5 мл раствора сульфита до аэрации;

Пх— количество мл 0,1 н. раствора тиосульфата, пошедшее на титрование, 5 мл раствора сульфита после аэрации;

Т — время аэрации в минутах;

0,8 — количество мг кислорода, идущее на окисление 1 мл 0,1 н. раствора тиосульфата;

α — коэффициент перерасчета на 1 литр сульфита; в данном случае он равен 200, так как на титрование берут 5 мл сульфита.

Для каждой колбы рассчитывают сульфитные числа после первого и второго периодов аэрации и берут среднее из двух чисел. Полученные результаты записывают в таблицу.

Зависимость скорости поступлений кислорода в раствор сульфита от интенсивности аэрации

Условия опыта

Пн

Пх1

Пх2

Скорость поступления кислорода в раствор сульфита в мг О2л/мин.

1

2

средняя

100 мл сульфита

300 мл сульфита

Контрольные вопросы

  1. Что характеризует сульфитное число?

  2. Достоинства и недостатки сульфитного метода оценки массообмена?

  3. Приведите уравнение скорости массопередачи по кислороду в процессе биосинтеза.

  4. Что входит в понятие «объемный коэффициент массопередачи»?

  5. Какие выводы можно сделать по Вашей лабораторной работе?

  6. Какие факторы оказывают влияние на массообмен по кислороду в ферментере и какими приемами его можно повысить?