Мяндина -Медицинская паразитология-

случае для диагностики заболевания применяются клопы-редувиды (переносчики этой болезни), т. к. в крови пациента не всегда удается выявить паразитов.

Магнитно-резонансная томография — это метод исследования внутренних органов и тканей человека без использования рентгеновских лучей. Маг- нитно-резонансная томография использует радиоволны и магнитные поля для получения изображения мягких тканей, органов и костей.

Полимеразная цепная реакция — метод молекулярной биологии, позволяющий получить значительное увеличение числа копий определенных фрагментов ДНК в биологическом материале (пробе). Полимеразная цепная реакция широко используется в биологической и медицинской практике для диагностики наследственных и инфекционных заболеваний, установления видовой принадлежности паразита, ля идентификации мутаций и клонирования генов.

Серологические исследования (лат. serum — сыворотка + logos — учение) — методы изучения определенных антител или антигенов в сыворотке крови больных, а также выявления антигенов паразитов с целью их идентификации, основанные на реакциях иммунитета.

Обнаружение в сыворотке крови больного антител к возбудителю инфекционной болезни или соответствующего антигена позволяет установить этиологический фактор заболевания. При выделении микроорганизма от больного проводится идентификация возбудителя путем изучения его антигенных свойств с помощью иммунной диагностической сыворотки (серологическая идентификация микроорганизмов).

Для выявления иммунных комплексов, образовавшихся при взаимодействии антиген-антитело, используют различные методы (серологические реакции). Различают реакции агглютинации, преципитации, нейтрализации, реакции с участием комплемента, с использованием меченых антител и антигенов.

Реакция с использованием меченых антител или антигенов. Реакция основана на том, что антигены тканей или микробы, обработанные иммунными сыворотками, меченными флюорохромами, способны светиться в ультрафиолетовых лучах люминисцентного микроскопа (реакция иммунофлюоресценции).

В иммуноферментном анализе вместо флюорохромов иммунную сыворотку можно метить ферментом (пероксидазой или щелочной фосфатазой). Реакцию оценивают по окрашиванию раствора в желто-коричневый (пероксидаза) или желто-зеленый (фосфотаза) цвет.

Радиоиммунологический метод — количественное определение антител или антигенов, меченных радионуклидами.

Ультразвуковые исследования (УЗИ) — метод, который применяется для исследования состояния внутренних органов, диагностирования хронических изменений тканей органов и заболеваний различной этиологии.

Гельминтологические методы исследования направлены на выявление яиц, личинок или фрагментов тел гельминтов. Поскольку основная масса гельминтов человека паразитирует в кишечнике, чаще всего исследуют фекалии больного. Фекалии должны доставляться в лабораторию свежими, в чистой посуде. При необходимости их консервируют добавлением жидкости, содержащей 1900 мл 0,2%-го водного раствора азотнокислого натрия, 250 мл крепкого раствора Люголя, 300 мл формалина и 75 мл глицерина. Для обнаружения фраг-

ментов тел гельминтов фекалии просматривают, затем смешивают с водой и исследуют небольшими порциями в чашке Петри на темном фоне. Все частицы помещают на предметное стекло в каплю воды и исследуют под лупой. Можно суточную порцию фекалий поместить в цилиндр с добавлением 5–10-кратного количества воды. После размешивания сосуд оставляют до полного осаждения взвешенных частиц. Поверхностный слой жидкости сливают и наливают чистую воду. Отмытый осадок просматривают небольшими порциями в чашках Петри под лупой. Для обнаружения яиц применяют микроскопические методы исследования.

Метод нативного мазка. Небольшое количество фекалий из разных мест исследуемой порции растирают на предметном стекле в капле 50%-го раствора глицерина, изотонического раствора хлорида натрия или воды. Смесь накрывают покровным стеклом и просматривают под микроскопом.

Метод всплывания по Фюллеборну. Одну часть фекалий размешивают в 20 частях насыщенного раствора хлорида натрия (удельный вес 1,18), добавляемого небольшими порциями. Всплывшие на поверхность крупные частицы немедленно удаляют, а смесь оставляют на 45 минут. В течение этого времени яйца гельминтов, имеющие меньший удельный вес, чем раствор хлорида натрия, всплывают на поверхность. Поверхностную пленку снимают проволочной петлей диаметром около 1 см и переносят на предметное стекло для исследования под микроскопом.

Метод Калантарян. Эффективность метода всплывания повышается при замене хлорида натрия насыщенным раствором азотнокислого натрия. В этом случае смесь выдерживают 10–15 минут.

Поверхностную пленку, образующуюся после отстаивания смеси фекалий с раствором хлорида натрия или азотнокислого натрия, можно снимать и предметным стеклом. С этой целью баночку, налитую до краев смесью фекалий с раствором соли, накрывают предметным стеклом так, чтобы нижняя его поверхность соприкасалась с жидкостью. После отстаивания стекло снимают и, быстро повернув кверху поверхностью, на которой находится пленка, просматривают под микроскопом.

Соскоб с перианальных складок (для выявления яиц остриц) делают утром до совершения туалета. Деревянным шпателем, смоченным в воде или в 50%-м растворе глицерина, производят соскабливание вокруг анального отверстия. Полученный материал переносят на предметное стекло в каплю воды или 50%- го раствора глицерина и просматривают под микроскопом. Шпатель можно заменить влажным ватным тампоном, которым протирают перианальную область, затем хорошо прополаскивают в воде. Воду центрифугируют и осадок исследуют под микроскопом.

Метод Берманна (для выявления личинок). Металлическую сетку с нанесенными на нее 5–6 г фекалий укрепляют на стеклянной воронке, вставленной в штатив. На нижний конец воронки надевают резиновую трубку с зажимом. Воронку наполняют водой, подогретой до 50 °С, так, чтобы нижняя часть сетки с фекалиями соприкасалась с водой. Личинки активно переходят в воду и скапливаются в нижней части резиновой трубки. Через 4 часа жидкость помещают в центрифужные пробирки, центрифугируют и осадок просматривают под микроскопом.

Метод культивирования личинок анкилостомид на фильтровальной бумаге. Свежие фекалии (0,5 г) намазывают на полоску фильтровальной бумаги размером 15 150 мм так, чтобы края полоски оставались свободными. Полоску помещают в пробирку диаметром 18 мм, содержащую 3 мл воды. Пробирку закрывают пробкой и выдерживают при температуре 25 °С в течение 5–7 дней. За это время развившиеся из яиц личинки спускаются по бумаге на дно пробирки. Их убивают нагреванием и осадок исследуют под микроскопом для дифференциального диагноза. Если точное определение вида паразита не требуется, пробирки просматривают невооруженным глазом.

Анализ мокроты, носовой слизи и влагалищных выделений используют для выявления яиц легочного сосальщика, личинок аскарид и анкилостомид, яиц остриц, фрагментов эхинококкового пузыря. Исследуемую порцию слизи (выделений) намазывают на стекло и просматривают на черном и белом фоне под лупой, а затем под микроскопом. Можно добавить к исследуемому материалу 25%-й раствор антиформина, тщательно взболтать и выдержать 1–1,5 часа в термостате для растворения слизи. Смесь центрифугируют и осадок исследуют под микроскопом.

Анализ дуоденального и желудочного сока проводят для выявления яиц печеночных трематод, анкилостомид, личинок кишечной угрицы. Все три порции дуоденального содержимого, полученные при зондировании, центрифугируют и осадок исследуют под микроскопом.

Исследование тканей. Для выявления личинок трихинелл кусочки биопсированной мышцы тщательно расщепляют на волоконца, сдавливают между компрессорными стеклами (толстые стекла с винтами) и исследуют под микроскопом с затененным светом. Для выявления цистицерков мышцы расслаивают препаровальными иглами, выделенный пузырек очищают от окружающей ткани, сдавливают между двумя предметными стеклами и исследуют под лупой.

Анализ крови (для выявления личинок филярий). Исследуют висячую каплю на покровном стекле, окантованном вазелином. Можно 0,3 мл крови смешать с 10-кратным количеством 3%-го раствора уксусной кислоты. Смесь центрифугируют и осадок исследуют под микроскопом. Для обогащения препаратов к 1 мл венозной крови прибавляют 3 мл 2%-го раствора формалина или 5-кратное количество жидкости, состоящей из 95 мл 5%-го раствора формалина, 5 мл уксусной кислоты и 2 мл концентрированного спиртового раствора гематоксилина. Смесь центрифугируют, осадок промывают дистиллированной водой путем центрифугирования и исследуют под микроскопом. Для дифференцирования разных видов филярий исследуют мазки, окрашенные по методу Гимзы—Романовского.

Методы иммунологической диагностики. Применяют серологические реакции (агглютинации, преципитации, связывания комплемента) и аллергические диагностические пробы с антигенами из соответствующего вида гельминта. Эти методы применяют для диагностики эхинококкоза, альвеококкоза, цистецеркоза и других гельминтозов.

ЗАДАНИЯ ДЛЯ САМОСТОЯТЕЛЬНОЙ РАБОТЫ

Заполните следующие таблицы.

Таблица 1. Сравнительная характеристика видов лейшманий

Название заболевания

Локализация в организме человека

Резервуар

Специфический переносчик

Инвазионная стадия

Морфологические стадии

Способ заражения

Диагностика

Профилактика

Название заболевания

Локализация в организме человека

Резервуар

Специфический переносчик

Инвазионная стадия

Морфологические стадии

Способ заражения

Диагностика

Профилактика

Таблица 3. Характеристика малярийных плазмодиев

Заболевание, тяжесть течения

Инвазионная форма

Специфический переносчик

Дефинитивный хозяин

Промежуточный хозяин

Периодичность выхода мерозоитов в плазму крови

Морфологические стадии в организме дефинитивного хозяина

Морфологические стадии в организме промежуточного хозяина

Способы размножения паразита в организме комара

Способы размножения в организме человека

Таблица 4. Характеристика простейших — паразитов кишечника человека

Название заболевания

Локализация в организме человека

Морфологические стадии

Инвазионная форма

Патогенные стадии

Действие на организм человека

Диагностика

Профилактика

Морфологические стадии паразита

Основной хозяин

Промежуточный хозяин

Пути заражения человека

Локализация в организме человека

Действие на организм человека

Диагностика

Профилактика

Название заболевания

Локализация половозрелых форм

Локализация яиц

Морфологические особенности яиц

Окончательные хозяева

Промежуточные хозяева

Инвазионная форма

Способ заражения

Морфологические стадии паразита

Диагностика

Профилактика

Название заболеваний

Локализация в организме человека

Признаки яиц

Окончательные хозяева

Промежуточные хозяева

Инвазионная форма

Способ заражения

Морфологические формы

Тип финны

Размер стробилы

Органоиды фиксации

Признаки гермафродитных проглоттид

Признаки зрелых проглоттид

Диагностика

Профилактика

Название заболеваний

Локализация в организме человека

Окончательные хозяева

Промежуточные хозяева

Инвазионная форма

Способ заражения

Морфологические формы

Органоиды фиксации

Строение и размер стробилы

Тип финны

Диагностика

Профилактика

Название заболевания

Локализация половозрелых форм

Признаки яиц

Окончательные хозяева

Промежуточные хозяева

Инвазионная форма

Способ заражения

Морфологические формы

Диагностика

Профилактика

Таблица 10. Сравнительная характеристика комаров р. Anopheles и p. Culex

Яйца

Признаки личинок

Расположение личинок относительно поверхности воды

Признаки куколок (форма дыхательного сифона)

Строение головки самки

Строение головки самца

Способ посадки имаго

Медицинское значение

ОТВЕТЫ НА ТЕСТОВЫЕ ЗАДАНИЯ

Тема «Медицинская протозоология»

Тема «Медицинская гельминтология»