2.7. Микологическое исследование

Для микологического исследования берут пробы от только что погибших или живых рыб. В замороженном виде их можно хранить до 3-х суток, а в консерванте до 2-х суток.

Подтверждение или исключение микозной природы болезни осуществляется с помощью следующих методов:

- микроскопическое исследование - наиболее важный метод обнаружения и исследования грибов, позволяющий установить наличие гриба, его локализацию, а иногда и вид;

- гистологическое исследование - метод исследования пораженной ткани при микозах, является основным методом диагностики, так как многие грибы невозможно культивировать на искусственных питательных средах;

- постановка биопробы.

Культивирование грибов позволяет изучить морфологию колоний, типичные формы спороношения, сохранить культуры и получить заразный агент для биопробы.

8. Паразитологическое исследование

Это последовательное вскрытие органов и тканей с целью обнаружения паразита. Для исследования берется не менее 15 живых или только что уснувших рыб каждого вида и возраста и не менее 25-ти экземпляров личинок рыб.

Для обнаружения паразитов используют компрессионный способ, когда ткань или орган помещают между стеклами, сдавливают до прозрачности, а потом исследуют под микроскопом. Для определения интенсивности инвазии гельминтов и ракообразных учитывают в абсолютных величинах, а простейших - в 25-ти полях зрения микроскопа (7х10, 7х40 в зависимости от величины паразита.

Порядок проведения работы следующий:

1. Осмотр рыбы (крустацеозы, бделлозы,постдиплостомоз, филометроидоз). Соскоб скальпелем слизи с поверхности тела и исследование ее под микроскопом в капле воды или изотонического раствора натрия хлорида под покровным стеклом (простейшие).

2. Берут кровь из сердца или хвостовой артерии. И готовят мазок. Сразу, после взятия крови, вскрывают полость сердца, выпускают кровь на стекло и под микроскопом исследуют на наличие сангвиникол. Изготовленный мазок фиксируют 5 минут в метиловом спирте и окрашивают по Романовскому.

3. Осматривают плавники (простейшие, моногенеи, рачки) под микроскопом.

4. Исследуют жабры. Удаляют жаберные крышки, с двух сторон отсекают жаберные дуги. Первоначально исследуют жаберные дуги на наличие крупных паразитов, затем делают соскоб и просматривают его при малом и большом увеличении. Скальпелем отделяют жаберные лепестки от дуг и компрессионным способом просматривают под микроскопом (простейшие, моногенеи, личинки трематод, цисты микроспоридий).

5. Проводят исследование глаз. Отделяют глазное яблоко, извлекают хрусталик. Компрессионным способом исследуют под микроскопом (диплостомоз, миксоспоридии).

6. Вскрывают полость тела, осматривают и извлекают внутренние органы: кишечник и, связанные с ним, органы (печень, желчный пузырь, селезенку), кишечник отсекают у ротовой полости и анального отверстия; гонады, плавательный пузырь, почки, мочевой пузырь. Отпрепарированные органы помещают в бактериологические чашки, следя за тем, чтобы они не соприкасались друг с другом и были постоянно влажными.

Осматривают брюшную полость (личинки цестод, нематод, трематод). Затем исследуют желчный и мочевой пузыри, их разрезают и изучают содержимое под микроскопом (амебоиды, миксоспоридии, трематоды, инфузории). Исследуют печень, селезенку, гонады, почки, жировую ткань. Небольшой кусочек от каждого органа исследуют под микроскопом под микроскопом на наличие спор миксоспоридий. Затем компрессионным способом под МБС (трематоды, цестоды, нематоды).

Кишечник разделяют на небольшие части и каждую разрезают вдоль, производя осмотр содержимого (микро- и макроосмотр). Затем под микроскопом исследуют соскоб со слизистой оболочки кишечника исследуют под микроскопом и компрессионно изучают кишечник (простейшие, трематоды, цестоды, нематоды).

Плавательный пузырь осматривают внешне, а затем делают соскоб и компрессионно исследуют под микроскопом.

Мускулатуру освобождают от кожи, делают через 0,5 мм поперечные разрезы, визуально осматривают, раздвигая их препаровальной иглой. Компрессионно исследуют 1 см мускулатуры, (цестоды, нематоды, трематоды).