
- •3513 Практикум з мікробіології, вірусології та імунології
- •Частина 1 Загальна бактеріологія та імунологія
- •Передмова
- •Cписок скорочень
- •Правила роботи у бактеріологічній лабораторії. Морфологія бактерій. Світлова мікроскопія з використанням імерсійного об’єктива. Прості методи фарбування препаратів
- •Дeмонстрація
- •1. Бактеріологічний посуд: бактеріологічна петля (рис. 1д), чашка Петрі (рис. 1а), пробірки, градуйовані піпетки, колби
- •2. Предметні та покривні скельця (рис. 1б, в). Скельця з лунками. Спиртівка. Пісочний годинник, олівець “для скла”
- •3. Мікроскоп. Імерсійне масло
- •Правила роботи з імерсійною системою
- •Можливі помилки під час роботи з мікроскопом
- •Догляд за мікроскопом
- •Пояснення до самостійної роботи з теми:
- •Загальна будова навчального світлового мікроскопа
- •2. Будова бактеріальної клітини. Складні методи фарбування. Фарбування за методом Грама. Мікроскопічний метод діагностики збудників інфекційних захворювань
- •Теоретичні питання
- •Практична робота
- •Демонстрація
- •Пояснення до самостійної роботи з теми «будова бактеріальної клітини. Складні методи фарбування. Фарбування за методом Грама. Мікроскопічний метод діагностики інфекційних захворювань»
- •Спори та методи їх виявлення
- •Капсула
- •Класифікація бактерій за кількістю і розташуванням джгутиків
- •Методи виявлення джгутиків у бактерій
- •Практична робота
- •Демонстрація
- •Пояснення до самостійної роботи з теми
- •«Особливості ультраструктури спірохет,
- •Рикетсій, хламідій, мікоплазм.
- •Сучасні методи мікроскопічного дослідження»
- •Звивисті форми бактерій
- •Загальна схема будови Treponema pallidum
- •4. Основи асептики та антисептики. Дезінфекція. Стерилізація
- •Теоретичні питання
- •Практична робота
- •Демонстрація
- •3. Автоклав
- •Пояснення до самостійної роботи з теми «основи асептики та антисептики. Дезінфекція. Стерилізація»
- •Види та завдання дезінфекції
- •Практична робота студентів
- •Пояснення до самостійної роботи з теми
- •«Фізіологія бактерій.
- •Перший етап бактеріологіного методу діагностики.
- •Біологічний метод діагностики»
- •Метаболізм
- •Конструктивний (анаболізм) Енергетичний (катаболізм)
- •6. Ріст та розмноження мікроорганізмів.
- •Теоретичні питання
- •Практична робота
- •Демонстрація
- •Пояснення до самостійної роботи з теми «ріст та розмноження мікроорганізмів.
- •Теоретичні питання
- •Практична робота
- •Демонстрація
- •Пояснення до самостійної роботи з теми «ііі – IV етап виділення чистої культури аеробних бактерій. Ферменти бактерій. Антибіотики»
- •8. Облігатні Анаероби. Виділення чистої культури
- •3. Метод Фортнера
- •4. Ріст Cl. Perfingens на середовищі Вільсон-Блера
- •Пояснення до самостійної роботи з теми «облігатні Анаероби. Виділення чистої культури облігатних анаеробних бактерій»
- •V етап Врахування та аналіз результатів дослідження. Відповідь
- •9. Бактеріофаги. Генетика бактерій
- •Теоретичні питання
- •Практична робота студентів
- •Демонстрація
- •5 . Дослід із виявлення множинної стійкості мікроорганізмів до антибіотиків
- •2 Мл культури реципієнта (f-)
- •1 Мл бульйонної культури реципієнта
- •Пояснення до самостійної роботи з теми «бактеріофаги та їх практичне використання. Генетика бактерій»
- •Бактеріофаги та їх практичне використання. Генетика бактерій
- •Перевага методу плр – полімеразної ланцюгової реакції для діагностики інфекційних захворювань
- •10. Нормальна мікрофлора тіла людини. Дисбактеріоз
- •Теоретичні питання
- •Практична робота
- •Демонстрація
- •3.1. Замалюйте мікроскопічні препарати.
- •3.2. Бакпечатка для вивчення мікрофлори тіла людини
- •3.3. Біологічні препарати (еубіотики): колібактерин, лактобактерин, біфідумбактерин, біфікол.
- •Пояснення до самостійної роботи з теми «нормальна мікрофлора тіла людини. Дисбактеріоз. Вчення про інфекцію»
- •Дисбактеріоз
- •11. Вчення про інфекцію
- •Теоретичні питання
- •Практична робота
- •1. Виявлення гемолітичної властивості бактерій
- •2. Виявлення плазмокоагулазної активності бактерій
- •4. Виявлення лецитовітелазної активності
- •Демонстрація
- •Пояснення до самостійної роботи з теми «нормальна мікрофлора тіла людини. Дисбактеріоз. Вчення про інфекцію»
- •12. Імунітет. Фактори і механізми вродженого захисту організму
- •Теоретичні питання
- •Практична робота
- •Демонстрація
- •2. Фагоцитоз у новонародженої і дорослої людини
- •3. Визначення бактерицидної активності сироватки крові
- •Пояснення до самостійної роботи з теми «імунітет. Фактори і механізми вродженого захисту організму»
- •Особливості імунної системи
- •13. Антигени
- •Теоретичні питання
- •Практична робота
- •Демонстрація Діагностичні препарати: Діагностикуми і антигени
- •Алергени для шкірноалергічних проб
- •Лікувально-профілактичні препарати
- •Пояснення до самостійної роботи з теми «антигени»
- •Класифікація антигенів
- •Антигени – сторонні макромолекули
- •Інфекційні
- •14. Адаптивна гуморальна імунна відповідь. Імуноглобуліни (антитіла). Серологічні реакції флокуляції, нейтралізації
- •Теоретичні питання
- •Практична робота
- •Демонстрація
- •1. Імунні сироватки (антитоксичні) та імуноглобуліни
- •2. Титрування антитоксичної сироватки методом флокуляції
- •Пояснення до самостійної роботи з теми «гуморальна імунна відповідь. Імуноглобуліни (антитіла). Серологічні реакції флокуляції, нейтралізації»
- •Набутий (адаптивний) імунітет
- •Практична робота
- •Демонстрація
- •1. Реакція непрямої гемаглютинації (рнга)
- •Пояснення до самостійної роботи з теми «серологічні реакції: реакція зв’язування комплементу (рзк), реакції з використанням мічених антитіл та антигенів – іфа, ріф, ріа»
- •16. Адаптивна клітинна імунна відповідь. Імунологічна толерантність. Регуляція імунної відповіді
- •Теоретичні питання
- •Практична робота
- •Пояснення до самостійної роботи з теми «адаптивна клітинна імунна відповідь. Імунологічна толерантність. Регуляція імунної відповіді»
- •Механізм цитотоксичної дії т-кілера на клітину-мішень
- •17. Оцінка імунного статусу людини. Принципи функціонування імунної системи
- •Теоретичні питання
- •Практична робота
- •Пояснення до самостійної роботи з теми «оцінка імунного статусу людини. Принципи функціонування імунної системи»
- •18. Протиінфекційний імунітет
- •Теоретичне питання
- •Практична робота
- •Пояснення до самостійної роботи з теми «протиінфекційний імунітет»
- •Антигенспецифічна імунна відповідь
- •Зв’зок типу імунної відповіді з локалізацією інфекційних агентів
- •19. Патологія імунної системи
- •Теоретичні питання
- •Практична робота
- •Пояснення до самостійної роботи з теми «патологія імунної системи»
- •Типи алергічних реакцій
- •20. Специфічна профілактика та терапія інфекційних захворювань. Лікувальні, профілактичні та діагностичні імунологічні препарати
- •Теоретичні питання
- •Практична робота
- •Діагностичні препарати
- •Пояснення до самостійної роботи з теми «специфічна профілактика і терапія інфекційних захворювань. Лікувальні, профілактичні та діагностичні імунологічні препарати»
- •Список рекомендованої літератури
- •Практикум з мікробіології, вірусології та імунології
- •Частина 1 Загальна бактеріологія та імунологія
4. Виявлення лецитовітелазної активності
Для
виявлення лецитовітелазної активності
використовують спеціальне середовище,
до скаду якого входить лецитин яєчного
жовтка (ЖСА). Досліджувану культуру або
ж матеріал від пацієнта засівають на
дане середовище та інкубують при 37 °С.
Через добу спостерігають появу навколо
колоній, що виросли, зони помутніння,
яка свідчить про продукування такими
бактеріями лецитовітелази.
Рисунок 68 – Визначення лецитовітелазної активності на ЖСА
Робота 2. Вивчіть та запишіть у протокол демонстраційні препарати
Демонстрація
Бактеріальні культури, що синтезують екзо- і мають ендотоксини
Таблиця 3 – Токсиноутворення у мікроорганізмів
Виділяють екзотоксин |
Мають ендотоксин |
Corynebacterium diphtheria Clostridium perfringens Clostridium botulinum Clostridium tetani |
Escherichia coli Salmonella typhi Shigella flexsneri Neisseria meningitidis |
Пояснення до самостійної роботи з теми «нормальна мікрофлора тіла людини. Дисбактеріоз. Вчення про інфекцію»
Інфекційний процес (визначення) |
Динамічна взаємодія сприйнятливого (чутливого) макроорганізму і патогенного чи умовно-патогенного мікроорганізму в конкретних умовах зовнішнього середовища |
Компоненти, які зумовлюють розвиток інфекційного процесу |
1. Патогенний або умовно-патогенний збудник. 2. Сприйнятливий макроорганізм. 3. Умови зовнішнього середовища |
Джерела інфекції |
Людина (антропонозні інфекції). Тварина (зоонозні інфекції). Предмети зовнішнього середовища (сапронозні інфекції) |
Механізм передачі (визначення) |
Еволюційно сформована здатність мікроорганізмів переміщатись із організма одного хазяїна в інший. Механізм передачі вкючає в себе процес виведення мікроорганізма із тіла людини, його перебування в зовнішньому середовищі та проникнення збудника в інший сприйнятливий організм. Локалізація збудника в організмі визначає механізм передачі та тип інфекції |
Види механізмів передачі |
Контактний. Аерогенний. Фекально-оральний. Кров’яний. Вертикальний |
Фактори передачі інфекції |
Об’єкти зовнішнього середовища, на яких можуть зберігатися збудники інфекційнх хвороб та за допомогою яких реалізується проникнення мікроорганізмів у тіло людини |
Шлях передачі інфекції (визначення) |
Реалізація механізму передачі із залученням одного із факторів. Наприклад: дизентерією можна заразитися через воду та харчові продукти. У цьому випадку говорять про водний або харчовий шлях передачі збудника |
Патогенність (визначення) |
Властивість (здатність) певних видів мікроорганізмів зумовлювати (збуджувати) інфекційний процес у чутливих людей та тварин |
Патогенність мікроорганізму зумовлюють |
Токсини (екзо- і ендо-). Ферменти патогенності. Капсула. Специфічні білки клітинної стінки. Адгезини; корд-фактор та ін; кількість (доза) збудника, який проникає в організм |
Етапи реалізації патогенності в динаміці інфекційного процесу |
1. Колонізація. 2. Інвазія. 3. Паразитування. 4. Інтоксикація |
Класифікація мікроорганізмів за патогенністю |
1. Непатогенні (сапрофіти). 2. Умовно-патогенні. 3. Облігатно–патогенні |
Умовно-патогенні мікроорганізми |
Мікроорганізми, які входять до складу нормальної мікрофлори тіла людини і здатні викликати захворювання при дефектах або пригніченнях імунної системи (імунодефіцитах) |
Вірулентність (визначення) |
Ступінь патогенності даного штаму мікроорганізму |
Інвазивність (визначення) |
Здатність мікроорганізму проникати та поширюватися в організмі завдяки наявності особливих ферментів, які змінюють проникність клітин, тканин. Наприклад, наявність гіалуронідази у стафілококів |
Токсигенність (визначення) |
Здатність (властивість) мікроорганізму продукувати токсин, який має велику молекулярну масу, антигенні властивості і уражує основні клітини і тканини організму |
Характеристика екзотоксинів |
1. Білки. 2. Секретуються живими клітинами мікроорганізмами. 3. Високотоксичні. 4. Мають специфічну дію (органотропну, цитотропну). 5. Термолабільні. 6. Імуногени (зумовлюють імунну відповідь). 7. При обробці формаліном втрачають токсигенність, зберігають антигенність, перетворюються в анатоксин |
Характеристика ендотоксинів |
1. Глюцидоліпідопротеїнові комплекси. 2. Вивільнюються при руйнуванні бактеріальної клітини. 3. Термостабільні. 4.Мають загальну дію на організм, відсутня специфічність |
Чутливість до інфекції |
Індивідуальна чутливість макроорганізму до патогенних мікроорганізмів, яка може змінюватися залежно від віку, статі, вхідних воріт, стану імунної системи, спадковості та ін. |
Патогенез інфекційної хвороби |
Механізм виникнення і розвитку інфекційного процесу. Залежить від маси мікроорганізмів, їх патогенності та фізіологічного стану макроорганізму |
Періоди розвитку інфекційного захворювання |
1. Інкубаційний. 2. Продромальний. 3. Максимальних клінічних проявів (розпалу). 4.Завершення, реконвалесценції (відновлення, бактеріоносійство, рецидив, смерть) |
Персистенція |
Тривале перебування збудника в організмі без виникнення інфекційного процесу |
Причини персистенції |
1. Специфічна інактивація факторів імунітету. 2. Екранування клітинної стінки (капсула, оболонкові антигени). 3. Антигенна мімікрія. 4. Втрата клітинної стінки (L-форми) |
Бактеріоносійство (визначення) |
Особлива форма взаємодії макроорганізму і мікроорганізму, яка відбувається безсимптомно і супроводжується виділенням збудника в навколишнє середовище. Це явище часто пов'язане з наявністю специфічного імунітету |
Класифікація інфекцій залежно від типу збудника |
Бактеріальні. Вірусні. Грибкові. Рикетсіозні. Гельмінтози |
Класифікація інфекцій залежно від способу зараження |
Кишкові. Інфекції дихальних шляхів. Кров’яні. Інфекції шкіри. Інфекції з різними механізмами передачі |
Класифікація інфекцій залежно від клінічних проявів |
Маніфестна інфекція. Латентна інфекція. Стерта інфекція. Бактеріоносійство. Локальна інфекція. Генералізована інфекція. Первинна, вторинна інфекція, змішана інфекція |
Компоненти, що зумовлюють інфекційний процес |
Мікроорганізм. Макроорганізм. Зовнішнє середовище |
Роль макроорганізму |
Вік, наявність імунодефіциту, спадкова схильність, соціальні умови |