10. Визначення вмісту сахарози в коренеплодах цукрових

буряків

Принцип методу. Для прижиттєвого визначення вмісту сахарози в коренеплодах цукрових буряків використовують мікрометод, запропонований М. Дюбуа. Він ґрунтується на здатності моно- й дисахаридів давати жовто-оранжеве забарвлення з розчином фенолу в концентрованій сірчаній кислоті.

Обладнання та реактиви: Ніж, торзійні ваги, голка медичного шприца діаметром 1 мм із металічним штоком, штатив із пробірками, піпетки градуйовані, скляні палички, бюретки, льодяна баня, ФЕК, концентрована сірчана кислота (густина 1,84), 5 %-ий розчин свіжоперегнаного фенолу, сахароза кристалічна, дистильована вода.

Хід роботи

Ножем перерізати шийку коренеплоду. Уколом голки на глибину 5 мм під кутом 450 відібрати з нижньої частини шийки коренеплоду дві паралельні (з протилежних сторін) проби. На торзійних вагах відважити 1,5-2,0 мг досліджуваної проби, виштовхуючи її з голки металічним штоком. Кожну з проб помістити в пробірки, в які попередньо влити 2 мл дистильованої води. Потім у ці пробірки бюретками додати 1 мл розчину фенолу та 5 мл сірчаної кислоти. Вміст пробірок добре перемішати та охолодити на льодяній бані до кімнатної температури. При цьому проба під впливом сірчаної кислоти повністю розчиняється. Через 20-25 хв. Встановлюється (зберігається впродовж декількох годин) жовто-оранжеве забарвлення розчину.

Інтенсивність забарвлення розчину виміряти на ФЕКу в кюветі з робочою довжиною 1 см при довжині хвилі 480-490 нм відносно контрольного розчину, який готують зливанням 2 мл дистильованої

води, 1 мл розчину фенолу та 5 мл сірчаної кислоти.

Вміст сахарози в пробі визначити за калібрувальною кривою, а її

концентрацію в коренеплодах – за формулою

w(сахарози) =

де w(сахарози) – відносний вміст сахарози в коренеплоді, %;

а – вміст сахарози в пробі, що визначений за калібрувальною кривою, мкг;

m – маса наважки, мкг.

Для приготування стандартного розчину сахарози в 1 л дистильованої води розчинити 50 мг кристалічної сахарози. Для побудови калібрувальної кривої використовують розчини з вмістом сахарози від 10 до 70 мкг у 2 мл дистильованої води.

Контрольні питання

1. Вміст, поширення та біологічна роль вуглеводів у рослинних організмах.

2. Поняття про вуглеводи, їх класифікація.

3. Моносахариди, їх класифікація та загальні властивості.

4. Стереоізомери моносахаридів, їх циклічні форми.

5. Будова та поширення найважливіших рослинних моносахаридів.

6. Будова, загальні властивості та поширення найважливіших рослинних полісахаридів І і ІІ порядків.

7. Якісні реакції на окремі групи вуглеводів.

8. Принцип кількісного визначення вмісту глюкози.

9. Принцип кількісного визначення вмісту сахарози в коренеплодах методом М. Дюбуа.