farm12_2012Print

зиновых и иных материалов, ко-

ЛАЛ-тест – способ лабораторного определе-

торые применяют в медицинских

ния пирогенности лекарственных средств, пре-

целях по отдельности или в соче-

жде всего воды для инъекций, инъекционных

тании между собой. Они предна-

и инфузионных растворов. Он может быть ис-

значены для профилактики, диа-

гностики, лечения заболеваний,

пользован и в некоторых других областях, где

реабилитации, проведения ме-

необходимо быстрое обнаружение грамотри-

дицинских процедур, исследова-

цательных бактерий или их эндотоксинов.

ний медицинского характера, за-

мены или модификации частей

жен выпуск первых коммерче-

тканей, органов и организма че-

мических соединений для борь-

ловека, восстановления или ком-

бы с инфекционными заболева-

ских препаратов. Поскольку пер-

пенсации нарушенных или утра-

ниями, что оказало революцион-

вые исследования были проведе-

ченных физиологических функ-

ное влияние на медицину и зало-

ны на мечехвостах вида Limulus

ций, контроля над зачатием. Воз-

жило фундамент фармацевтиче-

polyphemus, препарат, получен-

действие ИМН на организм че-

ской промышленности, терапев-

ный из их крови, был назван Ли-

ловека реализуется не путем хи-

тической науки и клинической

зат амебоцитов Limulus (Limulus

мического, фармакологического,

практики.

amebocyte lysate), сокращенно

иммунологического или метабо-

Одновременно встал вопрос и

ЛАЛ-реактив, соответственно –

лического взаимодействия с ор-

о контроле безопасности новых

ЛАЛ-тест.

ганизмом человека, а только че-

лекарственных средств.

Испытание на токсичность в

рез восстановление физиологи-

ЛС должны иметь оптималь-

настоящее время трактуется как

ческих функций.

ную лекарственную форму, со-

тест на аномальную токсичность.

МТ и ИМН должны обеспе-

держать

совместимые компо-

ЛС или проба из изделия меди-

чивать:

ненты,

безопасные

активные

цинского назначения вводится,

• защиту пациента и пользо-

и вспомогательные

вещества,

как правило, внутривенно, если

вателя от механических повреж-

безвредную тароукупорочную

иной путь не прописан в частном

дений, повышенного уровня ви-

систему, обеспечивающую ста-

нормативном документе. Значе-

брации, шума, теплового и иони-

бильность препарата в течение

ние данного испытания состоит

зирующего излучения;

установленного срока хранения

в том, что испытуемый образец

• электромагнитную совме-

при регламентируемых условиях,

не должен обладать более высо-

стимость, электрическую, хими-

снабжаться необходимым объе-

кой токсичностью, чем та, кото-

ческую

безопасность

примене-

мом информации по безопасно-

рая обусловлена природой ос-

ния;

сти, указанной в инструкции по

новного действующего вещества

• изготавливаться из безо-

медицинскому применению и на

данного образца.

пасных материалов;

маркировке упаковки.

Тест на бактериальные эндо-

• снабжаться необходимым

К современным требованиям

токсины (ЛАЛ-тест) является со-

объемом информации по безо-

безопасности ЛС относятся, в част-

временной альтернативой испы-

пасности эксплуатации, примене-

ности, такие параметры, как пиро-

танию на пирогенность. Его осо-

ния (в том числе безопасно при-

генность, аномальная токсичность,

бенность: сведение к минимуму

меняться вместе с материалами,

бактериальные эндотоксины, тест

субъективизма получаемых ре-

веществами и газами, с которыми

на содержание гистамина, депрес-

зультатов. В этом тесте исполь-

они вступают в контакт), хране-

сорных субстанций. Методы испы-

зуют лизат клеток крови рачков-

ния, безопасным условиям транс-

таний регулируются Государствен-

мечехвостов Limulus polyphemus.

портировки.

ной фармакопеей Республики Ка-

В результате реакции между бак-

Если МТ и ИМН предназна-

захстан (ГФ РК).

териальными эндотоксинами и

чены для применения с ЛС, они

Испытание на пирогенность

лизатом формируется сгусток в

разрабатываются и производят-

предназначено для ограничения

виде геля.

ся с учетом совместимости с со-

риска возникновения лихора-

ЛАЛ-тест характеризуется вы-

ответствующими лекарственны-

дочного состояния и тромбооб-

сокой специфической чувстви-

ми средствами согласно норма-

разования после парентерально-

тельностью и позволяет выявлять

тивным документам по качеству

го введения ЛС. Однако этот тест

эндотоксины (в количестве, в 100

и безопасности.

в значительной мере зависит от

раз ниже их минимальной пиро-

Требования к безопасности

влияющих факторов, таких, на-

генной дозы) на кроликах. Дан-

ИМН изложены в серии меж-

пример,

как физиологическое

ный тест распространяется на

государственных

стандар-

состояние животных, поэтому в

большую часть ассортимента па-

тов ИСО10993–2002. Они ос-

настоящее время он заменяется

рентеральных препаратов и суб-

нованы на серии ISO10993, по-

значительно более объективным

станций для них.[3]

священной оценке

биологи-

и чувствительным ЛАЛ-тестом.

Изделия медицинского назна-

ческого

действия

медицин-

Реакция лизата

амебоцитов

чения и медицинская техника

ских изделий. В настоящее вре-

с эндотоксином была открыта в

(ИМН и МТ) – это приспособле-

мя разработано 20 стандартов

США в 1964 году, где и был нала-

ния, изделия из полимерных, ре-

этой серии, которые охватыва-

ская лаборатория, функции кото-

раздражающее действие, 100 ге-

рой заключаются в контроле ка-

молитических тестов.

чества на показатели безопасно-

Анализ проведенных работ

сти ЛС и ИМН, реализуемых в

свидетельствует, что лучшие фар-

стране.

мацевтические

производители

Лаборатория

располагает

мира предъявляют гораздо более

оборудованием, которое позво-

строгие требования к методикам

ляет работать на уровне между-

испытаний.

народных стандартов.

Одновременно в токсикологи-

Анализ нашей

деятельности

ческой лаборатории ведутся ис-

свидетельствует

о тенденции

следования по анализу требова-

предъявления все более жестких

ний к тест-дозам в лекарственных

требований к продукции, произ-

средствах. Результаты этой рабо-

водимой фармацевтической и ме-

ты передаются в Фармакопей-

дицинской промышленностью.

ный центр в виде аналитических

Для каждого ЛС, имеющего в

записок по группам препаратов

своей спецификации такие пара-

и писем по отдельным препара-

метры, как пирогенность и ток-

там. Обратная связь организуется

сичность, изготовителем разра-

Фармакопейным центром в виде

ботана тест-доза для проведения

запросов на экспертные оценки

испытаний. Как правило, она соз-

тест-доз, заявляемых в проектах

дается, исходя из максимальной

нормативных документов на ЛС.

концентрации препарата, кото-

Таким образом, в контроле ка-

рую может перенести животное.

чества ЛС и ИМН вопросы оцен-

Достигается это опытным пу-

ки их безопасности занимают пер-

тем. Следует отметить, что тест-

востепенное место. В Республике

ют широкий спектр методик –

дозы на один препарат, произ-

Казахстан они регламентированы

от испытаний на острую токсич-

водимый различными заводами-

требованиями

Государственной

ность до изучения генотоксично-

изготовителями, иногда разнят-

фармакопеи, технических регла-

сти и других вредных эффектов,

ся между собой. В качестве при-

ментов, действующими стандар-

возможных при длительном кон-

мера можно привести данные по

тами РК и межгосударственными

такте с медицинским изделием [4,

цефтриаксону: тест-доза для ис-

стандартами.

5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16,].

пытания на токсичность ЛС, со-

В рамках обеспечения населе-

Часть вопросов контроля ка-

держащих цефтриаксон, может

ния Республики безопасными ле-

чества ИМН освещена в Госу-

у разных производителей коле-

карственными средствами и изде-

дарственной фармакопее РК, Ев-

баться от 10мг/0,5мл/мышь до 50

лиями медицинского назначения

ропейской фармакопее, Фарма-

мг/0,5 мл/мышь.

в составе Испытательного цен-

копее США и других в разделах,

В соответствии с этим следует

тра РГП на ПХВ «Национальный

посвященных контролю качества

отметить необходимость монито-

центр экспертизы лекарственных

контейнеров и материалов их из-

ринга тест-доз, направленного на

средств, изделий медицинского

готовления.

максимально возможное их уже-

назначения и медицинской тех-

Испытательный центр РГП на

сточение.

ники» МЗ РК более 10 лет функ-

ПХВ «Национальный центр экс-

За 2011 год Испытательным

ционирует токсикологическая ла-

пертизы лекарственных средств,

центром РГП «Национальный

боратория. Опыт её работы свиде-

изделий медицинского назначе-

центр экспертизы лекарствен-

тельствует о необходимости регу-

ния и медицинской техники» МЗ

ных средств, изделий медицин-

лярного анализа тест-доз для ток-

РК является самым оснащенным

ского назначения и медицин-

сикологических испытаний, вво-

и квалифицированным учреж-

ской техники» РК было проведе-

димых в аналитические норматив-

дением Республики Казахстан в

но более 2000 испытаний на пи-

ные документы.

сфере тестирования безопасно-

рогенность, 3000 – на токсич-

сти ЛС и ИМН. Здесь есть спе-

ность, 300 имплантационных те-

Список литературы можно запро-

циализированная токсикологиче-

стов, 500 испытаний на местно-

сить в редакции

Побочные

Безопасность лекарств

действия

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

мин., должно быть не менее 75%

дигидрофосфа-та Р растворяют в

Содержание

аторвастатина

(Q) от заявленного.

900 мл воды для хроматографии Р,

(C66H68F2N4O10) должно быть

Родственные примеси. Опре-

корректируют рН раствора кисло-

не менее 90.0% и не более 110.0%

деление проводят методом жид-

той фосфорной, разбавленной Р

от заявленного.

костной хроматографии (2.2.29)

до значения 3.8 ± 0.1; доводят объ-

Таблетки должны соответ-

в соответствии с требованиями

ем раствора водой для хромато-

ствовать требованиям общей

стандарта организации.

графии Р до 1 л и перемешивают.

статьи «Таблетки» и следую-

Содержание

любой единич-

Раствор А. Фосфатный бу-

щим требованиям.

ной примеси в препарате должно

ферный раствор с рН 3.8 – аце-

При наличии консервантов

быть не более 0.5%, суммы при-

тонитрил для хроматографии Р1

в препарате проводят их иден-

месей – не более 2.0%.

– тетрагидрофуран Р (60:35:5).

тификацию и

количественное

Остаточные

растворители

Раствор В. Ацетонитрил для

определение.

(5.4). При необходимости в соот-

хроматографии Р1 – тетрагид-

ИДЕНТИФИКАЦИЯ

ветствии с требованиями.

рофуран Р (95:5).

Микробиологическая чисто-

Испытуемый раствор. К точ-

На хроматограмме испытуемого

та (5.1.4). В соответствии с требо-

ной навеске порошка растертых

раствора, полученной при коли-

ваниями.

таблеток, эквивалентной 30 мг

чественном определении, время

Однородность дозированных

аторвастатина, прибавляют 5 мл

удерживания

основного пика

единиц (2.9.40). В соответствии с

метанола Р, перемешивают на

должно совпадать со временем

требованиями.

ультразвуковой бане в течение 2

удерживания пика аторвастати-

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ

мин.,прибавляют20млраствори-

на на хроматограмме раствора

теля, перемешивают на ультра-

сравнения.

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

звуковой бане в течение 10 мин,

ИСПЫТАНИЯ

Определение проводят

мето-

охлаждают до комнатной темпе-

дом жидкостной хроматографии

ратуры, доводят объем раство-

Растворение (2.9.3). Опреде-

(2.2.29).

ра растворителем до 50.0 мл и

ление проводят в соответствии с

Растворитель. Ацетонитрил

центрифугируют со скоростью

требованиями стандарта органи-

для хроматографии Р1 – вода

10000 об/мин в течение 10 мин.

зации.

для хроматографии Р (40:60).

Раствор сравнения. К 31.0 мг

Количество

аторвастатина,

Фосфатный

буферный

рас-

СО ГФ РК (EP CRS) аторваста-

перешедшее в раствор через 45

твор с рН 3.8.

5.75 г аммония

тина кальция прибавляют 5 мл

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

бованиями стандарта организа-

с размером частиц 3.5 мкм, на-

Содержание

бетагистина

ги-

ции.

пример, Prodigy ODS (PHENO-

дрохлорида (C8H14ClN2) долж-

Микробиологическая чисто-

MENEX);

но быть не менее 90.0% и не бо-

та (5.1.4). В соответствии с требо-

– температура колонки 40°С;

лее 110.0 % от заявленного.

ваниями.

– подвижная фаза: смесь во-

Таблетки

должны соответ-

Однородность дозированных

да Р – ацетонитрил Р – кислота

ствовать требованиям общей

единиц (2.9.40). В соответствии с

уксусная ледяная Р (85:15:0.45),

статьи «Таблетки» и следую-

требованиями.

рН которой доводят триэтила-

щим требованиям.

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ

мином Р до значения 10.5;

– скорость подвижной фазы

ИДЕНТИФИКАЦИЯ

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

1.5 мл/мин;

На хроматограмме испытуемого

Определение проводят методом

– детектирование при длине

раствора, полученной при коли-

жидкостной

хроматографии

волны 261 нм;

чественном определении бетаги-

(2.2.29).

–

время детектирования –

стина гидрохлорида, время удер-

Растворы готовят непосред-

12 мин.

живания основного пика должно

ственно перед использованием.

Хроматографируют

15 мкл

совпадать со временем удержи-

Испытуемый

раствор. Точ-

раствора сравнения.

вания пика бетагистина на хро-

ную навеску порошка растертых

Хроматографическая система

матограмме раствора сравнения.

таблеток, эквивалентную 24 мг

считается пригодной, если вы-

ИСПЫТАНИЯ

бетагистина гидрохлорида, рас-

полняются следующие условия:

творяют в воде Р, перемешивают

–

эффективность

хромато-

Растворение (2.9.3). В соответ-

на ультразвуковой бане, доводят

графической колонки, рассчи-

ствии с требованиями.

тем же растворителем до объема

танная по пику бетагистина, со-

Родственные примеси. Опре-

50 мл, перемешивают

и филь-

ставляет не менее 1500 теорети-

деление проводят в соответствии

труют.

ческих тарелок;

с требованиями стандарта орга-

Раствор сравнения.

24.0 мг

–

относительное

стандарт-

низации.

СО ГФ РК (EP CRS) бетагисти-

ное

отклонение, рассчитанное

Содержание примеси

А в

на гидрохлорида растворяют в

для площади пика бетагистина,

препарате должно быть не бо-

воде Р и доводят тем же раство-

составляет не более 1.5%.

лее 0.5%, примеси С – не более

рителем до объема 50 мл.

Хроматографируют по 15 мкл

1.5 %, любой единичной неиден-

Хроматографирование про-

испытуемого раствора и раство-

тифицированной примеси – не

водят на жидкостном хромато-

ра сравнения.

более 0.2%, сумма примесей в

графе с УФ-детектором в следу-

Содержание C8H14ClN2 рас-

препарате – не более 2.0%.

ющих условиях:

считывают с учетом содержания

Вода (2.5.12). При необходи-

– колонка размером 150 мм х

C8H14ClN2 в СО ГФ РК (EP CRS)

мости – в соответствии с тре-

4.6 мм, заполненная сорбентом

бетагистина гидрохлорида.

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

107.5 % от заявленного при дози-

ИДЕНТИФИКАЦИЯ

Содержание ламотриджина

ровке до 100 мг.

На хроматограмме испытуемо-

(С9Н7Cl2N5) должно быть не ме-

Таблетки должны соответ-

го раствора, полученной при ко-

нее 95.0% и не более 105.0% от за-

ствовать требованиям общей

личественном определении, вре-

явленного при дозировке 100 мг и

статьи «Таблетки» и следующим

мя удерживания основного пика

более, не менее 92.5% и не более

требованиям.

должно совпадать со временем

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

совпадать со временем удержи-

Вода (2.5.12). При необходимо-

Содержание

левофлоксацина

вания пика левофлоксацина на

сти в соответствии с требования-

(C18H20FN3O4) должно быть не

хроматограмме раствора срав-

ми стандарта организации

менее 95.0% и не более 105.0% от

нения.

Остаточные

растворители

заявленного.

ИСПЫТАНИЯ

(5.4). При необходимости в соот-

Таблетки

должны соответ-

ветствии с требованиями.

ствовать требованиям ГФ РК I,

Растворение (2.9.3). В соответ-

Микробиологическая чисто-

т. 1, общая статья «Таблетки»,

ствии с требованиями стандарта

та (5.1.4). В соответствии с требо-

и следующим требованиям.

организации.

ваниями.

ИДЕНТИФИКАЦИЯ

Родственные примеси. Опре-

Однородность дозированных

деление проводят методом жид-

единиц (2.9.40). В соответствии с

На хроматограмме испытуемо-

костной хроматографии (2.2.29).

требованиями.

го раствора, полученной при ко-

Содержание любой единич-

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ

личественном определении ле-

ной примеси в препарате долж-

вофлоксацина, время удержи-

но быть более 0.5%, суммы при-

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

вания основного пика должно

месей – не более 1.0%.

Определение

проводят мето-

Побочные

Безопасность лекарств

действия

А.К.: После прохождения ак-

Их основные задачи:

нащенная лабораторным обору-

кредитации,

которая намечает-

• аналитическая

экспертиза

дованием от ведущих мировых

ся на следующий год, мы станем

при государственной регистрации

производителей. В 2006 году на

полноправными членами Евро-

и перерегистрации

лекарствен-

базе ИЦ организована лаборато-

пейской сети официальных ла-

ных средств, медицинских имму-

рия фармакологических испыта-

бораторий по контролю качества

нобиологических препаратов, из-

ний. Впервые в Казахстане она

лекарственных средств Европей-

делий медицинского назначения;

была аккредитована на соответ-

ской фармакопеи. И тогда наша

• испытания при подтверж-

ствие требованиям СТ РК ИСО/

лаборатория войдет в состав ла-

дении соответствия лекарствен-

МЭК 17025-2007. Ее открытие по-

бораторий сети OMCL. То есть, те

ных средств, медицинских имму-

зволило приступить к исследова-

требования, которые предъявля-

нобиологических препаратов, из-

ниям биоэквивалентности вос-

ются к лекарственным препара-

делий медицинского назначения;

произведенных лекарственных

там в Казахстане, будут идентич-

• исследования

биоэквива-

средств, которые раньше у нас

ны тем, которые предъявляются

лентности и относительной био-

не проводились. Одновременно

в европейскийх странах.

доступности воспроизведенных

эта лаборатория выполняет не-

Н.Т.: Акмарал Талаповна, на-

препаратов;

клинические испытания лекар-

• проведение неклинических

ственных средств и изделий ме-

до полагать, что это работа не

исследований по безопасности и

дицинского назначения.

одного дня?

фармакологической активности

В соответствии с отраслевой

А.К.: Даже не одного года… За

лекарственных средств для оте-

программой МЗ РК «Оснащение

минувшие полтора десятка лет

чественных и зарубежных про-

межрегиональных испытатель-

осуществлено полное переосна-

изводителей.

ных лабораторий» осуществле-

щение нашего Испытательного

Так вот, практически ни одна

на поставка в ИЦ и проведены ра-

центра. Он в буквальном смыс-

государственная программа, при-

боты по инсталляции и метроло-

ле получил «вторую жизнь». На-

нятая за эти годы в области здра-

гическому обеспечению испыта-

помню, что в состав ИЦ входит

воохранения, не обошла внима-

тельного оборудования и средств

пять лабораторий: республикан-

нием наш Испытательный центр!

измерений 97 наименований (255

ская иммунобиологическая, фи-

Благодаря Государственной прог-

единиц).

зико-химическая, микробиоло-

рамме по реформированию и раз-

В испытательную лабораторию

гическая, токсикологическая, ла-

витию здравоохранения Респуб-

Караганды было поставлено обо-

боратория

фармакологических

лики Казахстан на 2005-2010 го-

рудование 81 наименования (179

испытаний и группа по обслужи-

ды, в ИЦ в 2005 году была откры-

единиц), в лаборатории Павлода-

ванию лабораторного оборудова-

лась Республиканская иммуно-

ра и Усть-Каменогорска – по 74

ния.

биологическая лаборатория, ос-

наименованиям (172 единицы).