БХ - 3 семестр / ()Зачеты / Практические навыки

ПЛОТНОСТЬ Клинико-диагностическое значение: Плотность мочи в норме колеблется в широких пределах (1,002–1,035 г/л). Она зависит от количества растворенных в ней веществ и количества выделяемой мочи, с одной стороны, и от соотношения количества жидкости, поступившей в организм и выведенной из организма внепочечными путями (потоотделение, диарея и т. п.) – с другой.

Плотность мочи дает представление о приблизительном количестве о растворенных в ней веществ. Ориентировочно расчет плотного остатка (в г/л) получают, умножив 2 последние цифры (сотые и тысячные доли единицы) относительной плотности на коэффициент 2,6. В норме с мочой выделяется 50–75 г/сут плотных веществ. (В норме чем больше объем выделяемой мочи, тем меньше ее плотность и наоборот).

Изостенурия – выделение мочи с постоянной плотностью, равной плотности первичной мочи (1,010 г/л) – свидетельствует о почечной недостаточности. Постоянно низкое значение плотности мочи – гипоизостенурия – указывает на нарушения концентрационной функции почек (хронический нефрит, первично или вторично сморщенная почка). При несахарном диабете резко снижается плотность мочи, что связано с нарушением обратной реабсорбции воды.

При лихорадочных состояниях, общем венозном застое отмечается увеличение плотности и уменьшение объема выделяемой мочи. Сахарный диабет приводит к несоответствию между количеством мочи (наблюдается полиурия) и ее плотностью, повышенной из-за присутствия больших концен­траций глюкозы и кетоновых тел.

►12) Определение активности АСТ в сыворотке крови по Райтману и Френкелю.

ПРИНЦИП МЕТОДА: В результате переаминирования, происходящего под действием АСТ, образуется щавелевоуксусная кислота. Щавелевоуксусная кислота спонтанно декарбоксилируется в пировиноградную. При добавлении 2.4-динитрофенилгидразина в щелочной среде образуется гидразон пировиноградной кислоты красно-коричневого цвета, интенсивность окраски которого определяется колориметрически.

ХОД РАБОТЫ. Пробирку с 0,25 мл субстратно-буферной смеси нагревают в термостате при 37C в течение 5 минут, добавляют 0,05 мл сыворотки крови и инкубируют 60 минут в термостате при этой же температуре.

Добавляют 0,25 мл раствора 2.4-динитрофенилгидразина и выдерживают в течение 20 минут при комнатной температуре. Затем добавляют еще 2,5 мл NaOH, перемешивают и оставляют еще на 10 минут при комнатной

температуре.

Пвк+2,4-динитрофенилгидразин=2,4днфгидразонпировин.

Измеряют на фотометре экстинкцию опытной пробы при длине волны 500-560 нм (зеленый светофильтр) в кювете с толщиной слоя 10 мм против дистиллированной воды.

РАСЧЕТ: производят по калибровочному графику.

НОРМА: АСТ - 0,1-0,45 ммоль/ч.л (пирувата на 1 л сыворотки крови за 1 час инкубации при 37°С)АЛТ-0,1-0,68ммоль\чл

КЛИНИКО-ДИАГНОСТ. ЗНАЧЕНИЕ используется в ранней диференц.диагностики разл заболеваний. Оба фермента высокоактивны в разл тканях. Но наибольшая активность АЛТ приходится на печень, АСТ на миокард.активность АЛТ используется для диагн.б.Боткина(до появления желтухи и первых симптомов болезни-недомагания,слабость),а также ее безжелтучных форм. Высокая активность ферм к крови поддерживается первые 10-15 дней, а затем постепенно снижается. Степень увеличения активности АЛТ коррелирует с тяжестью болезни АСТ более специфична для миокарда, для ранней диагн. Инфаркта миокарда. Причем увеличение активн отмечается ч\з 24-36 часов и снижается на 3-7е сутки

►13)Титрометрический метод определения "щелочного" запаса крови

Принцип метода. Количество всех оснований цельной крови составляет ее щелочной запас. К цельной крови добавляют для нейтрализации всех оснований заведомо большее количество соляной кислоты. Избыток кислоты оттитровывают щелочью до значения pH (pH = 5,0), равного изоэлектрической точке основных белков крови, которые выпадают в осадок, при этом появляется легкое белесоватое помутнение. Щелочной запас выражается в МЭКВ щелочи, соответствующих количеству связанной основаниями крови соляной кислоты, в перерасчете на 1 л крови.

Ход работы. В стаканчик вносят 10 мл 0,01н раствора соляной кислоты, добавляют 0,2 мл крови, тщательно перемешивают. Прозрачный бурый раствор титруют из пипетки 0,1н раствором NaOH до появления легкого белесоватого помутнения.

Расчет производят по формуле

(1 – а)  0,1  1000

мэкв/л NaOH = ,

0 ,2

или

. Титрометрический метод определения "щелочного" запаса крови

Принцип метода. Количество всех оснований цельной крови составляет ее щелочной запас. К цельной крови добавляют для нейтрализации всех оснований заведомо большее количество соляной кислоты. Избыток кислоты оттитровывают щелочью до значения pH (pH = 5,0), равного изоэлектрической точке основных белков крови, которые выпадают в осадок, при этом появляется легкое белесоватое помутнение. Щелочной запас выражается в МЭКВ щелочи, соответствующих количеству связанной основаниями крови соляной кислоты, в перерасчете на 1 л крови.

Ход работы. В стаканчик вносят 10 мл 0,01н раствора соляной кислоты, добавляют 0,2 мл крови, тщательно перемешивают. Прозрачный бурый раствор титруют из пипетки 0,1н раствором NaOH до появления легкого белесоватого помутнения.

Расчет производят по формуле

(1 – а)  0,1  1000

мэкв/л NaOH = ,

0,2

или

(1 – а)  4  100

мг% NaOH = ,

0,2

где 1	–	1 мл 0,1н раствора HCl, взятой для нейтрализации;
а	–	количество щелочи, пошедшей на титрование, мл;
0,1	–	количество мэкв в 1 мл щелочи;
0,2	–	количество крови, мл;
1000	–	коэффициент пересчета на 1 л крови;
4	–	количество NaOH в 1 мл 0,1н раствора, мг.

В норме щелочной запас составляет 100–115 мэкв/л, или 400–460 мг% NaOH.

(1 – а)  4  100

мг% NaOH = ,

0,2

где 1	–	1 мл 0,1н раствора HCl, взятой для нейтрализации;
а	–	количество щелочи, пошедшей на титрование, мл;
0,1	–	количество мэкв в 1 мл щелочи;
0,2	–	количество крови, мл;
1000	–	коэффициент пересчета на 1 л крови;
4	–	количество NaOH в 1 мл 0,1н раствора, мг.

В норме щелочной запас составляет 100–115 мэкв/л, или 400–460 мг% NaOH.