Лабораторная работа № 2.Обнаружение патологических компонентов желудочного сока.

а) обнаружение молочной кислоты по реакции Уффельмана.

ПРИНЦИП МЕТОДА: При взаимодействии фенолята железа имеющего фиолетовый цвет с лактатом образуется лактат железа желто-зеленого цвета.

ХОД РАБОТЫ: К 20 каплям раствора фенола добавить 1-2 капли раствора хлорного железа. Получается раствор фенолята железа, фиолетового цвета. В пробирку с фенолятом железа прилить по каплям желудочный сок (нормальный и сок, содержащий молочную кислоту).

В присутствии молочной кислоты фиолетовая окраска переходит в желто-зеленую, вследствие образования лактата железа. При одновременном присутствии соляной кислоты жидкость обесцвечивается. Это объясняется тем, что сильная соляная кислота полностью разрушает комплекс железа с фенолом, а также вытесняет более слабую молочную кислоту из ее соли; вследствие этого реакция на присутствие молочной кислоты отрицательная.

КЛИНИКО-ДИАГНОСТИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ:

Органические кислоты (молочная, уксусная, масляная и др.) имеют обычно микробное происхождение и появляются в желудочном содержимом в результате ахлоргидрии и последующего сбраживания компонентов пищи. Наличие органических кислот в желудочном содержимом натощак часто встречается при атрофических гастритах и раке желудка.

б) бензидиновая проба на кровь

ПРИНЦИП МЕТОДА: Гемоглобин обладает каталазной активностью и разлагает пероксид водорода с образованием молекулярного кислорода, который окисляет бензидин или другой краситель. При этом происходит изменение окраски с бесцветной на темно-синюю.

ХОД РАБОТЫ: В пробирку с 1 мл желудочного сока, добавляют 4-5 капель 0.2 % спиртового раствора бензидина и 5 капель 1 % раствора пероксида водорода. При наличии в желудочном соке крови в результате окисления бензидина развивается синее окрашивание.

Полученные данные вносятся в таблицу:

Примечание: Если результаты какой-либо работы являются отрицательными, то в соответствующей графе ставится прочерк.

Определяемый компонент	Используемые реактивы	Пробы желудочного сока
		В норме	При патологии
Общая кислотность	Фенолфталеин
Свободная HCl	Диметиламиноазобензол
Лактат (молочная к-та)	Фенолят железа
Кровь	Бензидин

КЛИНИКО-ДИАГНОСТИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ:

Кровь появляется в желудочном содержимом при изъязвлении стенок желудка при язвенной болезни, эрозивном, язвенном гастрите, ожогах слизистой желудка и раке желудка.

6. ВОПРОСЫ ДЛЯ САМОКОНТРОЛЯ ЗНАНИЙ

1. Какие соединения являются незаменимыми факторами питания:

а) тре; б) гомоцистеин; в) фолиевая кислота; г) цис; д) креатин; е) холин?

2. Какие аминокислоты являются заменимыми в питании человека:

а) лиз; б) фен; в) тир; г) тре; д) про; е) вал?

3. Глутатион не содержит:

а) тре; б) сер; в) глу; г) гли; д) мет; е) цис?

4. Животные белки являются более полноценными по сравнению с растительными, потому что:

а) в животных гликопротеидах содержатся редкие углеводы;

б) в них больше содержится сер и гли;

в) животные белки больше адсорбируют микроэлементов;

г) среднее содержание три и лиз в животных белках выше;

д) отличаются более высокой усвояемостью;

е) животные белки больше адсорбируют витаминов группы B?

5. Какие аминокислоты способны поддерживать у здорового человека азотистый баланс:

а) тре; б) тир; в) фен; г) ала; д) сер; е) глу; ж) лиз; з) цис; и) вал?

6. Какие ферменты являются более важными для переваривания белков:

а) энтерокиназа; б) карбоксипептидаза; в) гистидин аммиак-лиаза; г) пепсин; д) химотрипсин; е) трипсин; ж) эластаза ; з) амилаза; к) карбангидраза?

7. Какие соединения будут инициировать выделение кишечником гастрина:

а) этанол; б) пищевые жиры; в) глюкоза; г) белок; д) секретин; е) NaCl?

8. В чем причина снижения продукции HCl при гиповитаминозе B₁:

а) повышенное образование ацетилхолина;

б) пониженное образование и ускоренный гидролиз ацетилхолина;

в) торможение декарбоксилазных реакций;

г) снижение активности ферментов -окисления;

д) нарушение транспорта O₂;

е) усиленная секреция электролитов?

9. Механизм активации протеаз ЖКТ включает:

а) фосфорилирование проферментов;

б) ограниченный протеолиз;

в) гидроксилирование;

г) оптимум pH;

д) формирование оптимальной среды электролитов;

е) активацию кофакторами?

10. Каков азотистый баланс у человека, если с пищей поступило 80 г белка за час, а с мочой за это время выделилось 16 г азота?

7. ЛИТЕРАТУРА

Основная

1. Материал лекций.

2. Биологическая химия: учебник/ В.К Кухта., Т.С.Морозкина, и др ; под ред. А.Д.Тагановича.- Минск: Асар, М.: Издательство БИНОМ, 2008. С. 261-276

3. Березов Т. Т., Коровкин Б. Ф. Биологическая химия. М.: Медицина, 1990. С. 319–336; 1998. С. 409–429.

4. Николаев А. Я. Биологическая химия. М.: Высшая школа, 1989. С. 303–308.

Дополнительная

5. Марри Р. и др. Биохимия человека. М.: Мир, 1993. Т. 2. С. 267–298.

6. Филиппович Ю. Б. Основы биохимии. М.: Высшая школа, 1993. С. 255–258.

7. Элементы патологической физиологии и биохимии / Под ред. Ашмарина И. П. М.: Изд-во МГУ, 1992. С. 57–69.

Методическая разработка составлена асс. каф. Биохимии Громыко М.В.