Лабораторная работа №1. Количественное определение общей кислотности, общей, свободной и связанной соляной кислоты в одной пробе желудочного сока.

ПРИНЦИП МЕТОДА: основан на титровании желудочного содержимого раствором 0.1н NaOH в присутствии индикаторов с различными зонами перехода. Кислотность желудочного сока выражают количеством ммоль едкого натра, нейтрализующего 1 л желудочного сока.

Основные фракции кислот желудочного сока.

“общая кислотность” желудочного сока это сумма всех кислот желудочного содержимого,

“свободная соляная кислота” - свободная минеральная HCl,

“связанная соляная кислота” - кисло реагирующие соли (хлориды) белков и других слабых оснований,

“общая соляная кислота” - сумма свободной и связанной HCl.

Количественное определение свободной соляной кислоты.

Свободная соляная кислота оттитровывается раствором 0.1н NaOH в присутствии индикатора диметиламиноазобензола, имеющего зону перехода окраски от красной до оранжевой при pH 3.0. Слабые же кислоты (молочная, уксусная кислота, кислые фосфаты и связанная соляная кислота) при pH 2.9 - 4.0 находятся в растворе в недиссоциированном состоянии и в реакцию со щелочью не вступают.

ХОД РАБОТЫ: К 10 мл желудочного сока добавить 1-2 капли спиртового раствора диметиламиноазобензола и титровать раствором 0.1н NaOH до появления оранжевой окраски.

Произвести расчет на 1000 мл желудочного сока. Так как затраченное на титрование количество едкого натра эквивалентно количеству соляной кислоты в пробе желудочного сока, то количество соляной кислоты в 1 л желудочного сока будет равно:

a  0.1  1000

X =  ммоль/л, (1)

b

где: а - количество (мл) 0.1н раствора NaOH, затраченное на титрование,

0.1 - количество (ммоль) NaOH в 1 мл 0.1 N раствора,

b - количество (мл) желудочного сока, взятого для титрования,

1000 - объем (мл) желудочного сока.

Количественное определение общей кислотности желудочного сока.

Титрование общей кислотности желудочного сока проводится раствором 0.1н NaOH в присутствии индикатора фенолфталеина с зоной перехода окраски в пределах pH 8.2 - 10.0, при pH ниже 8.2 он бесцветный, а при pH выше 10.0 - красный.

ХОД РАБОТЫ: К 10 мл профильтрованного желудочного сока добавить 1-2 капли раствора фенолфталеина и титровать 0.1н раствора NaOH до появления слабо розового окрашивания, не исчезающего в течение 1 мин. Произвести расчет на 1000 мл желудочного сока.

Количественное определение общей кислотности, общей, свободной и связанной соляной кислоты в одной порции желудочного сока.

ХОД РАБОТЫ: Отмерить в колбочки по 10 мл желудочного сока и добавить по 1-2 капли диметиламиноазобензола и фенолфталеина. Титровать 0.1н раствором NaOH до появления оранжевого окрашивания (первая отметка количества израсходованного 0.1н раствора NaOH). Затем продолжить титрования до лимонно-желтого цвета (вторая отметка) и, наконец, до розового окрашивания, не исчезающего в течение 1 мин (третья отметка).

В процессе титрования отсчет ведется от начальной точки!

Первая отметка соответствует количеству свободной соляной кислоты, третья - общей кислотности. Вторая отметка используется для расчета количества общей соляной кислоты. Среднее арифметическое между вторым и третьим пунктом соответствует общей соляной кислоте. Количество связанной соляной кислоты вычисляется как разница между общей и свободной соляной кислотой.

Например, при титровании 0,1н раствором едкого натра затрачено титрованного раствора (с начала титрования): до первой отметки (оранжевый цвет) 3,3 мл, до второй (лимонно-желтый цвет) - 4,6, до третьей (розовый цвет) - 5,6 мл. Среднее между второй и третьей отметкой:

4.6 + 5.6

 = 5.1 мл

2

Произвести расчет содержания свободной соляной кислоты, общей соляной кислоты, общей кислотности на 1000 мл желудочного сока по формуле (1).

Этот способ расчета неприменим при наличии молочной кислоты в желудке. Поэтому в пробах желудочного сока, содержащего молочную кислоту ограничиться вычислением свободной соляной кислоты и общей кислотности.

Полученные данные вносятся в таблицу:

Задача	Цвет	V 0,1н NaOH, мл	Содержание HCl, ммоль/л			Общая кислотность	Выводы
			Своб.	Связ.	Общ.
1	Ор.
	Жел.
	Роз.
2	Ор.
	Жел.
	Роз.
3	Ор.
	Жел.
	Роз.

НОРМА: Показатели кислотности профильтрованного желудочного содержимого взрослого человека после стандартного пробного завтрака составляют:

• общая кислотность 40 - 60 ммоль/л

• (новорожденные 2.8 ммоль/л; дети до года 4-20 ммоль/л)

• свободная HCl 20 - 40 ммоль/л (новорожденные 0.5 ммоль/л)

• связанная HCl 10 - 20 ммоль/л

• общая HCl 30 - 60 ммоль/л

КЛИНИКО - ДИАГНОСТИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ:

При различных заболеваниях желудка кислотность может быть повышенной, пониженной и нулевой. При язвенной болезни желудка или гиперацидном гастрите наблюдается гиперхлоргидрия - увеличение содержания свободной соляной кислоты и общей кислотности. При гипоацидном гастрите или раке желудка отмечается гипохлоргидрия - уменьшение количества свободной соляной кислоты и общей кислотности. При раке желудка, хроническом атрофическом гастрите отмечается полное отсутствие соляной кислоты и значительное снижение общей кислотности - ахлоргидрия. При злокачественном малокровии, при раке желудка наблюдается полное отсутствие соляной кислоты и пепсина - ахилия.