- •Количественный анализ
- •III.3.1. Хроматограмма как источник сведений о количественном составе анализируемой смеси
- •III.3.2. Выбор и измерение основных количественных параметров хроматографических пиков
- •III.3.2.2. Возможные погрешности при измерении вручную параметров хроматографических пиков
- •III.3.3. Основные методы количественного анализа
- •111.3.3.1. Метод абсолютной градуировки
- •III.3.3.2. Метод внутренней нормализации
- •III.3.3,3. Метод внутреннего стандарта
- •III.3.4. Развитие методов количественной интерпретации хроматограмм сложных смесей
- •III.3.5.1. Анализ систем с известными коэффициентами распределения
III.3.3. Основные методы количественного анализа
Первостепенной задачей количественного анализа является градуировка прибора, т. е. установление строгой числовой взаимосвязи между сигналом детектора и количеством интересующего вещества. Три основных метода количественного хроматографического анализа предусматривают градуировку прибора либо в прямой форме (так называемый метод абсолютной градуировки), либо в косвенной (методы внутренней нормализации, внутреннего стандарта и их модификации).
Выполнение анализов по любому из названных методов включает в качестве начальной и одной из очень важных процедур приготовление и хроматографирование нескольких искусственных смесей, содержащих различные количества каждого из определяемых компонентов, и в некоторых случаях дополнительно эталонных (стандартных) веществ.
Смеси твердых веществ обычно растворяют в подходящем растворителе *. Рекомендуется разбавлять подходящим растворителем и смеси жидкостей, особенно содержащие небольшое число компонентов в сопоставимых концентрациях. При этом становится возможным дозирование достаточно больших количеств образца (1—5 мкл) без риска выйти за границы линейного динамического диапазона детектора. Одновременно улучшается воспроизводимость дозирования и снижается погрешность результатов анализа из-за возможных потерь легколетучих компонентов пробы при дозировании (см. раздел III.3.5).
Необходимая степень разбавления зависит от чувствительности используемого детектора к определяемым компонентам. Известно, например, что для большинства современных моделей ионизационно-пламенного детектора верхний предел линейного отклика ограничивается концентрацией анализируемого вещества в потоке газа-носителя не более 5 % {по объему) **. Если принять, что размывание пробы при дозировании и разделении в колонке в принятых условиях анализа уменьшит ее первоначальную концентрацию в 10 раз, то углеводородные компоненты, содержание которых в исходном образце более 50 %, будут регистрироваться уже за пределами линейного диапазона ДИП.
Опасность выхода за пределы диапазона линейности особенно велика при использовании детектора электронного захвата для анализа веществ с высоким сродством к электрону. В этом случае необходимые для градуировки прибора искусственные смеси определяемых соединений и подлежащие анализу образцы неизвестного состава разбавляют углеводородным растворителем в 103—10е раз. Напротив, при работе с концентрационными детекторами невысокой чувствительности (катарометр, плотномер) предварительно разбавлять пробу не приходится.
В окончательных расчетах введение растворителя учитывается или не учитывается в зависимости от выбранного метода количественного хроматографического анализа (см. ниже). Тем не менее при анализе однотипных образцов всегда следует разбавлять пробу примерно одинаковым количеством растворителя, чтобы не вносить заметных изменений в условия работы хроматографической колонки и детектора.
* Условия анализа должны обеспечивать полное разделение растворителя и компонентов смеси. Растворитель не должен содержать примесей, накладывающихся на пики определяемых соединений.
** По пропану, этилену и другим легкий углеводородным газам.