бх

Оглавление

ЗАНЯТИЕ № 11

ТЕМА: БИОХИМИЯ КОСТИ.

Цель: Изучить минеральный и органический состав костной ткани.

Составить современные представления об особенностях минерализации и ремоделирования костной ткани.

Костная ткань — это прочная ткань, составляющая основу скелета животного организма. Врачам-стоматологам необходимы знания состава, строения и особенностей метаболизма костной ткани в связи с тем, что зубы являются разновидностью костной ткани.

ВОПРОСЫ ДЛЯ РАССМОТРЕНИЯ НА ЗАНЯТИИ:

1.Минерализованная соединительная ткань. Основные клетки костной ткани.

2.Минеральный состав и строение апатитов в твердых тканях. Изоморфные замещения.

3.Органические соединения кости, особенности строения и функции:

коллагеновых белков

остеонектина,

остеокальцина и Gla-протеина матрикса,

сиалопротеинов кости и остеопонтина,

тромбоспондина,

4.Внеклеточные ферменты костной ткани – щелочная фосфатаза, кислая фосфатаза,

пирофосфатаза.

5.Протеогликаны и органические небелковые соединения костного матрикса.

6.Ремоделирование костной ткани. Основные стадии костного ремоделирования.

7.Костеобразование. Этапы процесса минерализации костной ткани. Образование центров кристаллизации.

8.Регуляция ремоделирования, роста и развития костной ткани. Роль гормонов и витаминов.

САМОСТОЯТЕЛЬНАЯ РАБОТА

Заполните таблицу «Неколлагеновые белки костной ткани».

You created this PDF from an application that is not licensed to print to novaPDF printer (http://www.novapdf.com)

Оглавление

Биохимия полости рта. – Волгоград, 1996.

Боровский Е.В., Леонтьев В.К. Биология полости рта. – М.: Медицина, 1991.

Касавина Б.С., Торбенка В.П. Жизнь костной ткани. – М.: Наука, 1972.

21

You created this PDF from an application that is not licensed to print to novaPDF printer (http://www.novapdf.com)

Оглавление

ЗАНЯТИЕ№ 12

ТЕМА: БИОХИМИЯ ТКАНИ ЗУБА.

Цель: Изучить минеральный и органический состав тканей зуба.

Составить современные представления об особенностях

формирования и минерализации эмали и дентина.

1.Минерализованные ткани зуба. Химический состав различных тканей зуба,

соотношение минеральных и органических веществ.

2.Кристаллы гкдроксиапатита и фторапатита. формирующие ткани зуба.

Химический состав, обмен ионов в гидроксиапатитах. Микроэлементы: фтор,

стронций и др. Их биологическое значение для тканей зуба.

3.Формирование органической основы эмали зуба, ее роль в минерализации.

Молекулярно-функциональная модель структуры эмали.

4.Формирование и развитие эмали. Роль питания. Пути поступления веществ в эмаль зуба.

5.Особенности химического состава цемента и дентина зуба. Неколлагеновые белки дентина: особенности углеводного состава, их роль в функционировании зуба.

6.Химический состав пульпы и ее роль в обмене зуба.

7.Качественное определение неорганических соединений костной ткани.

ПРАКТИЧЕСКАЯ РАБОТА

Опыт № 1: Качественное определение неорганических соединений

костной ткани.

В колбу помещают примерно 5 г костной ткани приливают 25 мл 0,5% раствора серной кислоты и оставляют на сутки. Через сутки полученный минерализат костной ткани необходимо отфильтровать.

Опыт № 2: Открытие ионов кальция.

Отфильтровывают 3-4 мл вытяжки в пробирку и добавляют 10-15 капель насыщенного раствора щавелевокислого аммония. При отсутствии осадка количество оксалата аммония увеличить.

CaHPO4 + (NH4)2C2O4 → CaC2O4↓ + (NH4)2HPO4

Опыт № 3: Открытие ионов магния.

Щавелевокислый кальций, полученный в предыдущем опыте отделяют фильтрованием. К фильтрату добавляют по каплям 7-10 капель концентрированного раствора аммиака. Выпадает осадок фосфата магний-аммония. При необходимости количество аммиака увеличить.

MgHPO4 + NH4OH MgNH4PO4↓ + H2O

22

You created this PDF from an application that is not licensed to print to novaPDF printer (http://www.novapdf.com)

Оглавление

Опыт № 4: Открытие фосфорной кислоты.

К нескольким миллилитрам профильтрованной вытяжки из костной ткани (2-3

мл) прибавляют 5-6 капель, при необходимости больше, молибденового реактива и нагревают до кипения. Медленно образуется желтый осадок фосфорномолибденовокислого аммония.

12(NH4)2MoO4 + H3PO4 + 21 HNO3 → (NH4)3PO4∙12MoO3 + 21NH4NO3 + 12 H2O

САМОСТОЯТЕЛЬНАЯ РАБОТА

Заполните таблицу «Химический состав тканей зуба (в % отношении)».

ЛИТЕРАТУРА

Биохимия полости рта. – Волгоград, 1996.

Боровский Е.В., Леонтьев В.К. Биология полости рта. – М.: Медицина, 1991.

Касавина Б.С., Торбенка В.П. Жизнь костной ткани. – М.: Наука, 1972.

23

You created this PDF from an application that is not licensed to print to novaPDF printer (http://www.novapdf.com)

Оглавление

ЗАНЯТИЕ № 13

ТЕМА: БИОХИМИЯ РОТОВОЙ ЖИДКОСТИ.

Цель: Изучить химический состав слюны и ротовой жидкости.

Составить представление о роли слюны и ротовой жидкости в поддержании гомеостаза полости рта и о влиянии химического состава слюны на различные ткани зуба в норме и при патологии. Зубной налет и его роль в развитии пародонтоза.

Слюна - сложная биологическая жидкость, оказывающая огромное влияние на состояние различных тканей зуба, в особенности эмали, и участвующая в поддержании гомеостаза полости рта. Без знаний биологической характеристики слюны и зуба врач-стоматолог не может грамотно оценить причины ряда заболеваний слизистой оболочки полости рта, зубов, пародонта и челюстно-лицевой области.

В полости рта находится не чистый секрет слюнных желез, а так называемая смешанная слюна, или ротовая жидкость. Она представляет собой суммарный секрет всех слюнных желез, включает также детрит полости рта, микрофлору,

содержимое десневых карманов, десневую жидкость, лейкоциты, остатки пищевых продуктов.

Вопросы для рассмотрения на занятии:

1.Основные функции слюны. Физико-химические свойства слюны. Суточное количество выделяемой слюны. Виды слюнных желез и их участие в секреции слюны.

2.Механизм формирования слюны. Метаболизм ацинарных клеток

3.Регуляция секреции слюны. Механизм секреторной активности ацинарных клеток

4.Неорганические компоненты ротовой жидкости:

–ионы калия и натрия

–бикарбонаты

–тиоционаты

–кальций и фосфаты

–строение мицеллы фосфата кальция,

–роль минеральных элементов (макро и микроэлементов) слюны в минерализации эмали зуба,

5. Белки и ферменты ротовой жидкости:

–Муцины слюны. Особенности строения и биосинтез

–Специфические слюнные белки – белки,богатые пролином, статхерины,

гистатины, цистатины, катионные и анионные гликопротеины. Особенности строения и биологическая роль.

–Ферменты слюны

–Антигенспецифические вещества слюны

6.Низкомолекулярные органические компоненты слюны. Биологически активные вещества слюны

24

You created this PDF from an application that is not licensed to print to novaPDF printer (http://www.novapdf.com)

Оглавление

7.Защитная и очищающая функция слюны, бактерицидная роль иммуноглобулинов и других белков слюны. Защитные системы полости рта:

–лизоцим

–пероксидаза

–иммуноглобулины слюны

–лактоферрин

САМОСТОЯТЕЛЬНАЯ РАБОТА

Заполнить таблицу «Специфические слюнные белки».

ЛИТЕРАТУРА

Боровский Е.В., Леонтьев В.К. Биология полости рта. - М.: Медицина, 1991.

Боровский Е.В., Леус П.А., Кузьмина Э.М. Состав и свойства слюны в норме и при кариесе зубов.-М.: Медицина, 1991.

Биохимия полости рта.- Волгоград, 1996.

25

You created this PDF from an application that is not licensed to print to novaPDF printer (http://www.novapdf.com)

Оглавление

ЗАНЯТИЕ № 14

ТЕМА: СЛЮНА КАК ПРЕДМЕТ ЛАБОЛАТОРНОЙ ДИАГНОСТИКИ.

Цель: Составить представление о роли слюны и ротовой жидкости в поддержании гомеостаза полости рта и о влиянии химического состава слюны на различные ткани зуба в норме и при патологии. Зубной налет и его роль в развитии пародонтоза.

Слюна содержит белки: муцин, амилазу, лизоцим, альбумины и глобулины.

Муцин - это гликопротеид, мукопротеид (от «мукос»-слизь), предохраняет полость рта от повреждения, способствует формированию пищевого комка. Углеводная часть муцина содержит гиалуроновую кислоту, хондраитинсульфаты, нейраминовую кислоту.

В норме рН слюны колеблется в пределах 6,8-7,4. При преобладании в пище рафинированных углеводов и недостаточной санации полости рта под влиянием ферментов микрофлоры происходит сдвиг рН слюны в кислую сторону (до рН 5,0), что является одной из причин развития кариеса зубов.

Забор секрета непосредственно конкретной слюнной железы сопряжен с существенными техническими трудностями и имеет ограниченное клиническое значение (исследование патологии самих слюнных желез). Объектом биохимических исследований, как правило, является смешанная слюна или ротовая жидкость.

Последняя может быть получена после стимуляции (жевание воска, тефлона или кусочка другого эластичного инертного материала). Не стимулированная ротовая жидкость может быть получена путем элементарного сплевывания в пробирку, как правило, натощак, либо через 1-2 часа после приема пищи. Таким образом, ротовая жидкость наряду с кровью (сывороткой) и мочой может служить материалом для клинического и биохимического исследования. Преимущества ротовой жидкости

(смешанной слюны) как объекта анализа состоят в доступности, возможности получения больших объемов, неинвазивности - не требует условий стерильности как в случае забора крови.

Вопросы для рассмотрения на занятии:

1.Десневая жидкость. Клетки, белки, ферменты, низкомолекулярные органические вещества. Биологическая роль.

2.Зубной налет, его образование и состав.

3.Зубной налет и кариес зубов.

4.Зубные камни, формирование и роль в развитии пародонтоза.

5.Лабораторная диагностика слюны.

6.Выделение муцина из слюны и обнаружение в нем углеводного компонента.

7.Определение низкомолекулярных органических компонентов ротовой жидкости.

26

You created this PDF from an application that is not licensed to print to novaPDF printer (http://www.novapdf.com)

Оглавление

ПРАКТИЧЕСКАЯ РАБОТА

Опыт № 1: Выделение муцина слюны и обнаружение в нем

углеводного компонента.

Принцип метода. После осаждения муцина концентрированной уксусной кислотой обнаруживают углеводный компонент с помощью реакции Молиша.

Техника выполнения. В пробирку собирают около 2 мл слюны и по каплям (15-20

капель) приливают концентрированную уксусную кислоту. Выпадает осадок муцина,

трудно растворимый в избытке уксусной кислоты. Жидкость из пробирки осторожно сливают. Со сгустком муцина проводят реакцию Молиша,

доказывающую присутствие углевода в сложном белке муцина.

Техника выполнения. К осадку муцина добавляют 5-10 капель α-нафтола и по стенке осторожно подслаивают 1-2 мл концентрированной серной кислоты. На границе слоев возникает фиолетовое кольцо. В основе реакции лежит способность углеводов образовывать с концентрированной серной кислотой оксиметилфурфурол, дающий с

α-нафтолом фиолетовое окрашивание.

Опыт № 2: Открытие мочевины в ротовой жидкости.

Мочевина, диамид угольной кислоты мочевина является основным конечным продуктом белкового обмена у млекопитающих. Содержание мочевины в ротовой,

жидкости по данным различных авторов составляет от 20 до 70% от уровня ее в крови.

Столь значительный разброс данных связан с действием фермента бактерий ротовой жидкости уреазы, которая гидролизует мочевину, согласно реакции:

NH2CONH2 + Н2O = СO2 + 2 NH3

Таким образом, для определения мочевины необходимо брать только что собранную слюну. При хранении образцов слюны уровень мочевины в них снижается. Есть данные, что при хронической почечной недостаточности содержание мочевины в ротовой жидкости повышается.

Техника выполнения.

Пользуясь таблицей приготовить 3 пробирки.

пробы хорошоперемешивается и ставится в кипящую водяную баню на 10 мин

При наличии мочевины развивается пурпурное окрашивание, пробы

колориметрируются при 540 нм. Количество мочевины рассчитывают по формуле:

Cмочевины Аоп 1мМ Аст

27

You created this PDF from an application that is not licensed to print to novaPDF printer (http://www.novapdf.com)

Оглавление

Опыт № 3: Определение суммарного значения азота аминокислот.

Суммарное содержание в ротовой жидкости аминосоединеиий, дающим цветную реакцию с нингидрииом, находится на уровне 2-3 ммоль/л.

Техника выполнения.

Пользуясь таблицей приготовить 3 пробирки.

Развивающееся сине-фиолетовое окрашивание после охлаждения пробы колори-

метрируют при 400 нм. Количество суммарного значения азота аминокислот рассчитывают по формуле:

Cазота Аоп 2мМ Аст

Повышение аминоазота в ротовой жидкости следует ожидать при усилении протеолитических процессов в ротовой полости, что является следствием воспалительных и деструктивных процессов в полости рта.

Опыт № 4: Обнаружение пролина в ротовой жидкости (цветная

реакция Чинарда).

Техника выполнения.

Пользуясь таблицей приготовить 2 пробирки.

Пробы перемешивается и нагревается в водяной бане в течение 15 мин. При наличии в образцах пролина и орнитина развивается красно-коричневое окрашивание.

Поскольку в смешанной слюне содержатся, так называемые, белки богатые пролином (PRP), можно ожидать, что усиленный гидролиз этих слюнных белков в следствие воспалительных и деструктивных процессов в полости рта приведет к заметному увеличению уровня пролина в ротовой жидкости.

САМОСТОЯТЕЛЬНАЯ РАБОТА

Заполнить таблицу «Основные показатели слюны».

28

You created this PDF from an application that is not licensed to print to novaPDF printer (http://www.novapdf.com)

ЛИТЕРАТУРА

Боровский Е.В., Леонтьев В.К. Биология полости рта. - М.: Медицина, 1991.

Боровский Е.В., Леус П.А., Кузьмина Э.М. Состав и свойства слюны в норме и при кариесе зубов.-М.: Медицина, 1991.

Биохимия полости рта.- Волгоград, 1996.

29

You created this PDF from an application that is not licensed to print to novaPDF printer (http://www.novapdf.com)