20.Реакция антиген-антитело.

Взаимодействие Ат с Аг включает специфическую и неспецифическую фазы

Специфическая фаза протекает быстро и представляет специфическое взаимодействие активного центра с Аг.

Неспецифическая фаза протекает медленнее, зависит от присутствия электролитов и свойств Аг. Корпускулярные Аг агрегируются в крупнодисперсные конгломераты и выпадают в осадок (феномен агглютинации). Растворимые Аг образуют мелкодисперсные конгломераты (феномен преципитации), проявляющиеся помутнения раствора или образование колец преципитации либо зон преципитации в гелях.

Полные и неполные Ат:

Валентность – число активных (Аг-связывающих) центров Ат. Молекула полного Igкак минимум двухвалентна. Такие Ат известны как полные Ат; мономеры с меньшей валентностью – неполные Ат.

Полные Ат (IgM, IgG) вызывают агрегацию Аг, видимую невооруженным глазом (например реакция агглютинации бактерий)

Неполные Ат содержат один Аг-связывающий центр и поэтому одновалентны (напр., Ат, вырабатываемы при бруцеллезе). Второй Аг-связывающий центр у подобных Igэкранирован различными структурами либо обладает назкой авидностью. Неполные Ат функционально дефектны, т.к. не способны агрегировать Аг. Неполные Ат могут связывать эпитопы Аг, препятствуя контакту с ними полных Ат, поэтому их так же называют блокирующими.

21. Монорецепторные агглютинирующие сыворотки.

Диагностические сыворотки выпускают двух видов: неадсорбированные и адсорбированные агглютинирующие сыворотки.

Специфически адсорбированные сыворотки – это монорецепторные и поливалентные сыворотки. Их получают путем удаления неспецифических и групповых Ат из нативных сывороток иетодом адсорбции по Кастеллани (истощение по Кастеллани). В качестве адсорбента применяют живые или убитые микроорганизмы, имеющие близкое антигенное родство с культурой, примененной для иммунизации животного. Например, цельная иммунная сыворотка содержит Ат к антигенным рецепторам АВСД. Необходимо получить монорецепторную сыворотку, содержащую Ат только к одному рецептору А. Для этого в исходную иммунную сыворотку вносят биомассу бактерий, имеющих близкий набор антигенов, напр., ВСДЕ. Происходит адсорбция Ат ВСД соответствующими микробными антигенными рецепторами. Истощаемая сыворотка после каждой адсорбции проверяется в реакции агглютинации на стекле. Для освобождения сывороток от микробных тел с адсорбированными (ненужными) Ат проводится центрифугирование или фильтрация через бактериальный фильтр. Диагностическая адсорбированная сыворотка проверяется на стерильность, специфичность и активность. Применение такой сыворотки позволяет определить вид и тип выделенного микроба в реакции агглютинации на стекле без дополнительной постановки развернутой реакции агглютинации.

Стандартные Аг, специально полученные и используемые в серологических реакциях для выявления специфических Ат, называются диагностикумами.

В качестве диагностикумов используются стандартизированные взвеси убитых микробов, экстракты или компоненты клеток. В зависимости от использованных микроорганизмов различают бактериальные, риккетсиозные и вирусные диагностикумы.