3.4.2. Влияние длительного приёма SkQ1 на поведение крыс oxys и Вистар
Целью этого эксперимента явилось исследование возможности предупреждать возрастные изменения поведения у крыс Вистар и OXYS с помощью митохондриального антиоксиданта SkQ1. Животные получали с кормом различных доз SkQ1 с возраста 1.5 мес. в дозах 10. 50 или 250 нмоль на кг массы тела. Поведение исследовали в возрасте 12 мес. на фоне продолжающегося приёма SkQ1.
Тест «открытое поле». Как и следовало ожидать, годовалые контрольные крысы OXYS проявили все характерные для них особенности поведения в этом возрасте – сниженную моторно-исследовательскую активность и более высокий, чем у крыс Вистар, уровень тревожности (рис. 11а, б). Латентный период выхода в центр «открытого поля» был у них больше, чем у крыс Вистар (p=0,047), горизонтальная и вертикальная активность на 66% и 64% меньше (p<0,00).
Длительный прием SkQ1 не влиял на поведение крыс OXYS в тесте «открытое поле», тогда как у крыс Вистар предупредил возрастное снижение двигательной активности. У крыс Вистар, принимавших SkQ1 в дозах 10, 50 и 250 нмоль/кг, горизонтальная активность (рис. 11а) была выше, чем у животных контрольной группы (p<0,03, p<0,02 и p<0,01, соответственно). Количество вертикальных стоек (рис. 11б) SkQ1 достоверно увеличил только в дозах 50 и 250 нмоль/кг (p<0,01 и p<0,02, соответственно).
Рис. 11. Влияние длительного приема SkQ1 (10, 50 или 250 нмоль/кг) с возраста 1,5 мес. на количество пересеченных квадратов (а) и вертикальных стоек (б) крыс Вистар и OXYS в приподнятом крестообразном лабиринте. Исследование поведения в возрасте 12 мес. # - p<0,05 по сравнению с крысами Вистар, * - эффект препарата (p<0,05).
Тест приподнятый крестообразный лабиринт. Годовалые крысы OXYS совершали меньше выходов в открытые рукава (p<0,04), но проводили в них больше времени (p<0,03), чем крысы Вистар этого возраста (рис. 12а). Данные результаты, на первый взгляд, указывают на сниженный уровень тревожности крыс OXYS. Однако детальный анализ характера их поведения в открытых рукавах лабиринта показал, что у 20% животных наблюдалась реакция фризинга - замирания в ответ на стрессовую ситуацию. Это обстоятельство и привело к тому, что крысы OXYS проводили больше времени в открытых рукавах. Следует отметить, что у крыс OXYS фризинг впервые регистрируется уже в возрасте 3 мес., а процент животных, у которых наблюдается это проявление неспецифического поведения, увеличивается с возрастом и имеет место как в приподнятом крестообразном лабиринте, так и в тесте «открытое поле». В конечном счете, это поведение животных может влиять на поведенческие показатели при тестировании и осложнять статистический анализ результатов.
Длительный прием SkQ1 повысил тревожность крыс OXYS: у животных, получавших препарат в дозе 10 нмоль/кг время, проведенное в открытых рукавах, снизилось (p<0,01), и ни одна из крыс OXYS, получавших его в дозе 50 нмоль/кг, не выходила в открытые рукава (p<0,007). Однако количество вертикальных стоек, которое у крыс OXYS было меньше, чем у крыс Вистар (p<0,00), под влиянием SkQ1 в дозе 50 нмоль/кг выросло (p<0,04). Вероятно, причиной явилось не увеличение исследовательской активности, а, скорее, повышение тревожности. SkQ1 не повлиял на активность животных в закрытых рукавах, но вследствие роста тревожности мотивация к исследовательской активности в открытых рукавах снизилась. Количество дефекаций увеличилось на 70% только у крыс Вистар, принимавших SkQ1 в дозе 250 нмоль (p<0,04) (рис. 12б).
Рис. 12. Влияние длительного приема SkQ1 (10, 50 или 250 нмоль/кг) с возраста 1,5 мес. на время, проведенное в открытых рукавах (а) и число дефекаций (б) крыс Вистар и OXYS в приподнятом крестообразном лабиринте. Исследование поведения в возрасте 12 мес. # - p<0,05 по сравнению с крысами Вистар, * - эффект препарата (p<0,05).
Обучение в водном лабиринте Морриса. Латентный период нахождения невидимой платформы зависел только от генотипа животных, и был больше у крыс OXYS (рис. 13а, б). Различия по этому показателю были достоверными в 1-й (p<0,002), 2-й (p<0,001) и 3-й день тестирования (p<0,02). На 4-й и 5-й день они нивелировались, что подтверждает представленные выше результаты (см. раздел 3.1.) нарушения кратковременной памяти крыс OXYS в возрасте 16 мес. Под влиянием SkQ1 значимые межлинейные различия между крысами Вистар и OXYS исчезали – антиоксидант улучшал способность крыс OXYS к обучению, предупредил возрастные изменения показателя (рис. 13б). Крысы Вистар, получавшие SkQ1, изменили стратегию поведения в водном лабиринте Морриса, в результате чего достоверно увеличилось время пребывания животных в районе расположения платформы (р<0,01).
Рис. 13. Влияние длительного приема SkQ1 (250 нмоль/кг) с возраста 1,5 мес. на латентный период нахождения невидимой платформы крыс Вистар (а) и OXYS (б) в водном лабиринте Морриса. Исследование поведения в возрасте 16 мес. * - p<0,05 по сравнению с крысами Вистар.