
- •2. Анатомия, физиология и патология половой системы производителей
- •3. Методы получения спермы от производителей
- •4. Сперма с/х животных. Видовые особенности
- •5. Химический состав и физические свойства спермы. Строение спермиев
- •6. Энергетика спермиев. Гликолиз, дыхание, распад атф
- •7. Макроскопическая (санитарная) оценка спермы
- •8. Оценка густоты и активности спермы
- •9. Определение резистентности
- •10. Определение процента живых и мертвых спермиев и их патологических форм
- •11. Способы определения концентрации спермы
- •12. Биологические свойства спермы
- •13. Способы определения изотоничности растворов
- •14. Агглютинация спермиев
- •15. Определение дегидрогеназной активности спермиев
- •16. Состав и виды искусственных сред для разбавления спермы
- •17. Требования к качеству спермы, допускаемой к разбавлению и осеменению самок
- •18. Техника приготовления разбавителей, роль входящих в них компонентов. Методика и степень разбавления спермы
- •19. Разбавители спермы быка
- •20. 21. 22. Разбавители спермы жеребца, хряка, барана
- •23. Биоконтроль разбавителей. Определение абсолютного показателя переживаемости
- •24. Оценка спермы по микробной загрязнённости
- •25. Длительное хранение спермы при температуре -196 ºС в жидком азоте. Теоретические и практические основы замораживания спермы.
- •26. Режимы охлаждения и техника замораживания спермы быка, барана, хряка и жеребца
- •27. Оборудование для замораживания, хранения и транспортировки спермы
- •28. Техника безопасности при работе с сосудами Дьюара
- •29. Порядок оттаивания спермы
- •30. Трансплантация эмбрионов. Значение и основные этапы
- •31. Подбор доноров и реципиентов
- •32. Синхронизация половых циклов
- •33. Суперовуляция
- •34. Извлечение эмбрионов и их культивирование
- •35. Оценка качества эмбрионов
- •36. Пересадка эмбрионов
- •37. Замораживание эмбрионов
- •38. Способы определения оптимального времени для ио самок
- •39. Визо-цервикальное осеменение коров и тёлок
- •40. Мано-цервикальный способ осеменения коров
- •41. Цервикальное осеменение коров и тёлок с ректальной фиксацией шейки матки
- •42. Дозы спермы для осеменения самок разных видов животных
- •43. Организация осеменения овец. Циклический метод
- •44 Организация осеменения кобыл
- •45. Организация осеменения свиней
- •46. 48. Права и обязанности технологов по ио животных. Работа с календарём беременности и по ио животных. Организация работы племпредптиятия
- •47. Стимуляция половой функции у коров, овец, свиней и кобыл
- •49. Анатомия и физиология молочной железы
- •50. Классификация и патогенез мастита
- •51. Дифференциация клинических форм мастита
- •52. Диагностика раздражения вымени и субклинического мастита
- •53. 54. Профилактика мастита. Лечение мастита.
- •60. Акушерско-гинекологическая диспансеризация
- •55-59. Бесплодие и яловость
3. Методы получения спермы от производителей
Требования
Получение всего объема эякулята;
Не должно происходить снижение количества и жизнеспособности спермиев;
Гарантия здоровья производителей. Метод не должен затормаживать появление половых рефлексов, приводить к появлению травм, распространению инфекционных заболеваний;
Должен быть простым и доступным в условиях производства.
Существует 3 группы методов для получения спермы.
Влагалищные
Губочный метод
Разработан в 1892 году И.И. Ивановым для получения спермы от жеребцов при ИИ кобыл. При этом использовалась морская губка, обязательно с наличием пор. Сущность: предварительно к этой губке с порами привязывали прочную нить 20-30 см в длину, её смачивали теплым (38-40 ̊̊С) изотоничным физиологическим раствором, после чего с помощью стерильного корнцанга губку вводили в половые пути кобылы, у которой проявлялся феномен охоты. После акта спаривания за нить губку извлекали, помещали под пресс, собирали эякулят. Широко применялся до 1931 года.
Недостатки:
Удавалось собрать только 1/8 эякулята;
Когда посмотрели под микроскопом, в нескольких полях зрения спермии были повреждены - значительная травматизация спермиев;
Происходило смешивание эякулята с содержимым влагалища;
Метод способствовал распространению заразных заболеваний среди животных.
Влагалищный метод
1931-1932 гг, разработан для получения спермы от быков. Сущность: после акта спаривания из половых путей физиологически зрелых телок или коров эякулят собирали с помощью влагалищного зеркала, длинной пипетки со шприцом или с помощью ложки с длиной ручкой.
Недостатки:
Потеря значительной части эякулята;
Разбавление спермы влагалищным содержимым;
Распространение инфекционных заболеваний;
Снижение количества половых клеток.
Хирургические
Предусматривает хирургическое вмешательство, может быть использован в редких случаях в заповедниках, зоопарках, цирках, когда производитель (высокоценный или единственный) находится на грани жизни и смерти (переломы конечностей, серьезные отклонения в работе ССС, состоянии печени и других заболеваниях незаразной этиологии).
Перед убоем производят двустороннюю кастрацию, из хвостовой части придатка семенника получают высококонцентрированную небольшую каплю (под прессом).
При дефиците производителей и большом количестве самок животных возможно проведение односторонней кастрации с получением содержимого из хвостовой части придатка семенника.
Уретральные
Получение спермы от баранов, быков, жеребцов с помощью резиновых спермособирателей
Тупо заканчивающийся резиновый двустенный мешок, для каждого вида животных своя разновидность, с наличием 1 или 2 колец для фиксации. В некоторых конструкциях внутри имеется резиновый клапан для предупреждения смешивания спермы с содержимым влагалища и чтобы эякулят не изливался за пределы спермособирателя.
Порядок использования:
Стерилизация. 1) кипячение в течение 20 минут после закипания воды в стерилизаторе. Качество спермы снижается за счет избыточного количества воды. Избавляться: берется изотоничный (7%) раствор сахаров, стерильный, набирают в 20 граммовый шприц и орошают спермособиратель изнутри; 2) обработка внутренней и наружной поверхности ватным тампоном, смоченным 70% спиртом (корнцангом);
При наличии самки с феноменом охоты спермособиратель размещают внутри половых органов самки, происходит половой акт, после спермособиратель извлекают, содержимое помещают в стерильную градуированную стеклянную емкость.
Достоинства:
Удается получить весь эякулят;
Не происходит контакта с содержимым влагалища;
Не происходит снижения концентрации половых клеток;
снижается возожность распространения инфекционных заболеваний.
Получение спермы путем массажа ампул спермиопроводов, пузырьковидных желез и тазовой части мочеполового канала.
Только у крупных животных, ректальным способом.
В 1934 году разработан Миллером и Эвансом для получения спермы от жеребца.
Удается получить сперму от производителей с патологией репродуктивной системы. Выдерживают в загоне 5 минут, на рабочую руку надевают перчатку, смазывают, ректальным путем в течение 2-3 минут (не более) осуществляют массаж: ампулы – пузырьковидные железы – тазовые части мочеполового канала. В этом случае сперма выделяется даже без эрекции, сперма собирается в стеклянную посуду.
Фистульный метод
Используется только в научных целях. Позволяет получить сперму с низкой микробной загрязненностью. В области промежности, отступя от анального отверстия на 15-20 см вниз, выполняют уретростомию с искусственной (силиконовой) фистулой. Для получения спермы от быка и жеребца.
Послеоперационный период 3-4 недели, после чего от производителей можно получать сперму. Предварительно область корня хвоста бинтуют, края фистулы протирают ватными тампонами, смоченными или 50-60% этиловым спиртом, или раствором борной кислоты. Перед актом спаривания хвост у производителя отводят в сторону, к фистуле приставляют емкость для сбора спермы, в момент эякуляции сперма выделяется через фистулу.
Метод мастурбации
На 99,9% применяют для получения спермы от кобелей, в пушном звероводстве от самцов лис, енотовидных собак.
Сущность: с помощью пальцев руки осуществляют раздражение через препуций нервных рецепторов на головке полового члена, у кобелей ритмично сжимают и разжимают пальцы в области луковицы полового члена, возникает эрекция, сперму собирают в специальный сосуд (теплый).
Мануальный метод получения спермы от хряков
После проявления эрекции оператор по получению спермы захватывает половой член пальцами руки в стерильной перчатке, воспроизводит физиологический процесс нахождения полового члена в канале шейки матки у свиноматки, отводит половой член в сторону и собирают сперму в спермоприемники.
Электроэякуляция
Предусматривает использование прибора, используется в числе прочих у людей.
Строение: эбонитовый стержень с 2 бронзовыми кольцами, понижающий трансформатор, секундомер.
Животных фиксируют в станке, обрабатывают область промежности, эбонитовый стержень смачивают теплым физиологическим раствором для увеличения чувствительности, наконечник вводится в прямую кишку. Параметры: интервал для барана 4-5 секунд, быка 20-30 секунд, барану 3-6 импульсов, быку 5-10, напряжение быку 10-20 вольт, барану 2-10 вольт. Удается собрать несколько капель спермы.
После использования этого прибора другим путем сперму получить уже не удается.
Метод искусственной вагины
Представляет собой прибор с определенными конструктивными особенностями для разных видов животных. Удалось создать необходимые условия:
температура 40-42 ̊С;
давление 40-60 мм. рт. ст.
скольжение.
Основные части: корпус (цилиндр), резиновая камера, спермоприемник.
Бык: корпус 2х видов. 1) из толстой резины; либо укороченный, из толстой резины; 2) из сплава алюминия (дюралюминиевый) с расширением ближе к одному из концов.
Бараны и козлы: корпус из эбонита.
Хряк: корпус укороченный из толстой резины либо двойной корпус из оцинкованного железа.
Жеребец: корпус дюралюминиевый образца 1952 года.
Резиновая камера имеет 2 поверхности, различается только размером. Наружная шероховатая и гладкая внутренняя поверхности. Штамп стоит на шероховатой поверхности.
Спермоприемники: различие зависит от температуры помещения. Если температура ниже +20 градусов - двустенные водоналивные спермоприемники. Если температура +20 и выше: для быка – двустенный спермоприемник, одностенный, одноразовый. Баран: двустенный стеклянный, одностенный. Хряк: одноразовый, пластмассовый (20-250мл), банка из темного стекла (0,5 л). Жеребец: резиновый толстостенный стакан.
Дополнительные части: резиновые кольца, краник для накачивания воздуха в межстенное пространство (бык, баран). Резиновый держатель для спермоприемника (бык). Поролоновая накладка – чтобы предупредить попадания примесей к сперме (опил, волосы и т.д.).
План подготовки искусственной вагины:
Приготовление спермоприемника;
Дезинфекция вагины;
Наливание теплой воды (60-70 ̊С);
Смазывание искусственной средой или разбавителем («вазелин»);
Закрепление спермоприемника;
Нагнетание воздуха (40-60 мм.рт.ст.);
Измерение температуры (40-42 ̊С);
Обработка вагины после работы (2% раствор двууглекислой или 1% раствор кальцинированной соды, омывание горячей водой и просушивание).
Новые цилиндры и камеры с целью удаления заводских примесей моют с помощью горячего 3% раствора гидрокарбоната натрия, затем ополаскивают чистой водой и высушивают. Перед сборкой вагины острые края цилиндра стачивают. Резиновую камеру пропускают в цилиндр так, чтобы гладкая поверхность была направлена внутрь, после чего концы выравнивают, выворачивают, поочередно натягивают на края цилиндра без наличия складок. Концы камеры закрепляют на кормусе при помощи 4 резиновых колец. Стерилизацию вагины можно осуществлять в автоклаве ри температуре 105 градусов и давлении 0.3-0.4 атм в течение 20-30 минут, предврительно на концы вагины одевают пергаментную бумагу, фиксируют при помощи резиновых колец. Второй способ - кипячение в специальном стерилизаторе, в кипящей дистиллированной воде в течение 20-25 минут. Затем вагину извлекают из автоклава или стерилизатора, дают стечь воде. Для хранения помещают в термостат (+40-42 градуса). Дезинфекцию внутренней поверзности резиновой камеры осуществляют ватным тампоном, смоченным в 70% этаноле, с использованием корнцанга. Через отверстие в патрубке в корпуса резиновых камер наливают теплую воду: баранам – 150-180 мл воды, температура 50-55 ̊С, быкам (1942г) – 400-500 мл воды температурой 60-70 ̊С, в укороченный корпус 300 мл (60-65 ̊С), хрякам (оцинкованная) – 1200 мл 60-70 ̊С, жеребцам 1,5-2 литра (50-60 ̊С). В межстенное пространство спермоприемника для быка 100 мл воды температурой 30-35 ̊С, барану 50 мл температурой 25-30 ̊С
Техника получения спермы от производителей
В манеже, где получают сперму, предварительно пыль, микроорганизмы осаждают путем распыления воды в воздухе, увлажняют стены и пол, воздух в манеже подвергается дезинфекции с использованием бактерицидных ламп (БУФ-30, БРК-7) или озонаторов. За 30 минут дезинфекция должна быть закончена.
Наружную поверхность препуция у быка, хряка, обмывают теплой водой, мошонку тоже, вытирают насухо индивидуальными полотенцами. Дополнительно у животных препуций снаружи обрабатывают 2% раствором двууглекислой соды или раствором фурацилина 1: 5000, у жеребца водой с мылом. 1 раз в 10 дней внутреннюю поверхность препуция спринцуют 3% раствором перекиси водорода или раствором фурацилина 1:5000 или раствором перманганата калия 1:10000. Чередуют (например, через 3 месяца). Каждый эякулят получают в отдельно приготовленную искусственную вагину.
Получение спермы от быков
Сперму от быков начинают получать в зависимости от породы в 12-15 месяцев, получение спермы осуществляют через 2 часа после кормления и поения. Возможно использование подставных животных, или амортизационного чучела.
Вначале животных выдерживают в манеже в течение 5 минут, осуществляют проводку. По истечении этого срока в момент вспрыгивания необходимо искусственную вагину держать (стоя справа) под углом 45̊ к горизонтальной линии подставного животного или чучела, спермоприемником вверх. Её прижимают к крупу подставного животного. Левой рукой отводят препуций и подводят половой член к вагине (направляют). Эякуляция длится 3-5 секунд. Толчок. Вагину опускают, поворачивают спермоприемником вниз. Краник открывают, воздух выпускается. Спермоприемник снимают, если он стеклянный – закрывают крышкой, если одноразовый (полиэтиленовый) – запаивают, передают в лабораторию для оценки качества.
Получение спермы от барана
На овцу, у которой проявляется феномен охоты, редко на валуха или на подставного барана. Во время садки техник находится справа, в момент прыжка барана на овцу необходимо левой рукой отводить ПЧ за препуций в сторону, правой рукой подставляют к ПЧ искусственную вагину. Расположение её под углом 35 градусов. Эякуляция очень быстро (1,5 секунды), учитывают, что спермоприемник не имеет резинового держателя, в момент эякуляции его фиксируют указательным пальцем. Баран спрыгивает, спермоприемник снимают, отдают в лабораторию для оценки качества.
Получение спермы от хряков
На чучело, деревянное или металлическое, сверху шкура свиноматки, орошенная смазкой с феромоном. В чучеле есть гнездо для ИВ с подогревом (1-2 лампочки). ИВ устанавливают внутри чучела, запускают хряка в манеж, происходит садка, после эякуляции хряк медленно спускается. Вагину извлекают, собирают эякулят.
Получение спермы от жеребца
Удается только на кобылу в охоте. Травмоопасный метод. Кобылу фиксируют в станке или с помощью случной шлеи. На поводьях выводится жеребец, подводят его сначала к голове кобылы, если та не прижимает уши, клонится в его сторону – позволяют вспрыгивание жеребца на кобылу. ИВ удерживается под углом 45 градусов. Во время садки вагину прижимают к крупу кобылы примерно под углом 45 ̊С. Выравнивают давление путем поворота крышки на 1,5-2 оборота. После характерного сокращения основания хвоста и спрыгивания жеребца опускают спермоприемником вниз, снимают с ПЧ.