01_MB_OOI

Грамотрицательны.

30. Культуральные свойства.

Не требовательны к питательным средам. Рост на бульоне сопровождается помутнением, на МПА образует нежные круглые, гладкие, полупрозрачные колонии диаметром 2-4 мм. Однако колонии S.typhi, имеющие Vi-антиген, мутные. Колонии S.paratyphi B более грубые, через несколько дней у них по периферии формируются своеобразные валики. На средах Эндо колонии сальмонелл бесцветны, на висмут- сульфит-агаре – чёрного цвета. В случае диссоциации на плотных средах вырастают колонии R-формы. Избирательной средой для возбудителей брюшного тифа и паратифов является желчь или желчный бульон.

31. Физиологические свойства.

Возбудители тифа и паратифов – факультативные анаэробы, температурный оптимум для роста 370, pH=6,8-7,2.

32. Биохимические свойства.

Дают положительную реакцию с MR, образуют при ферментации глюкозы (и ряда других углеводов) кислоту и газ (за исключением S.typhi), имеют лизин- и орнитиндекарбоксилазы, не имеют фенилаланиндезаминазы, образуют H2S (некоторые не образуют), растут на голодном агаре с цитратом (кроме S.typhi), не ферментируют лактозу (кроме S.arizone, S.diarizone), не образуют индола, не имеют уреазы и дают отрицательную реакцию Фогеса – Проскауэра.

33. Антигенные свойства.

Сальмонеллы имеют О- и Н- и К-антигены. Обнаружено 65 различных О-антигенов. Они обозначаются арабскими цифрами от 1 до 67. По О-антигену сальмонеллы разделены на 50 серологических групп. Антигены О1 и О12 – встречаются у представителей многих групп, но представители каждой серогруппы имеют один главный, общий для всех О-антиген, по которому они разделяются на серогруппы. Специфичность О-антигенов определяется ЛПС. У всех сальмонелл полисахариды обладают общим внутренним ядром, к которому прикрепляются О-специфические боковые цепи, состоящие из повторяющегося набора олигосахаров.

У сальмонелл различают два типа Н-антигенов: I фаза и II фаза. Обнаружено более 80 вариантов Н-антигенов I фазы. Они обозначаются строчными латинскими буквами и арабскими цифрами. Н-антигены I фазы встречаются только у определённых серотипов, поэтому по Н- антигену серогруппы разделяются на серотипы. Н-антигены II фазы имеют в своём составе общие компоненты, они обозначаются арабскими цифрами и встречаются у разных серовариантов. Обнаружено 9 Н-антигенов II фазы.

К-антигены сальмонелл представлены разными вариантами: Vi-( S.typhi, S.paratyphi С, S.dublin), М-,5-антигены.

Для серологической идентификации сальмонелл выпускают диагностические адсорбированные моно- и поливалентные О- и Н- сыворотки, содержащие агглютинины к О- и Н-антигенам тех серотипов сальмонелл, которые чаще всего вызывают заболевания людей и животных.

34.Факторы патогенности.

Усальмонелл имеются факторы адгезии и колонизации, факторы инвазии, они имеют эндотоксин и могут синтезировать два типа экзотоксинов (S.typhimurium и некоторые другие серотипы): 1) термостабильные и термолабильные энтеротоксины типа LT и ST; 2)

шигаподобные цитотоксины.

35. Эпидемиология инфекции.

Источником брюшного тифа и паратифа А является только человек, больной или бактерионоситель. Все остальные сальмонеллы патогенны также и для животных. Первичным их источником являются животные. Заболевания животных, вызываемые сальмонеллами, подразделяются на три основные группы: первичные сальмонеллёзы, вторичные сальмонеллезы и энтерит крупного рогатого скота. Заражение человека от больного или бактерионосителя возможно не только через пищу, в которой сальмонеллы находят хорошие условия для размножения, но и контактно-бытовым путём.

Нагревание при температуре 700 выдерживают в течение 30 минут. При варке в течении 2,5 часов мясо, зараженное сальмонеллами и заложенное в холодную воду, становится стерильным в кусках весом не более 400 грамм при толщине кусков 19 сантиметров. Обычные химические дезинфектанты убивают их в течение 15 минут.

36. Патогенез инфекции.

Сальмонеллёзы могут протекать с различной клинической картиной: в виде пищевой интоксикации, сальмонеллёзной диареи и генерализованной (тифозной) формы – всё зависит от величины заражающей дозы, степени вирулентности возбудителя и иммунного статуса организма. В основе сальмонеллёзной диареи лежит колонизация энтероцитов. После прикрепления к гликокаликсу тонкого кишечника сальмонеллы внедряются между ворсинками и, прикрепляясь к плазмолемме энтероцитов, колонизируют её, повреждают микроворсинки, вызывают слущивание энтероцитов и умеренное воспаление слизистой оболочки. Освобождающийся энтеротоксин вызывает диарею, а цитотоксин – гибель клеток. Происходит инвазия сальмонелл через эпителий в подлежащие ткани слизистой оболочки, они транспортируются через неё в макрофагах, поступают в лимфу и кровь, вызывая бактериемию и генерализацию инфекционного процесса.

37. Иммунитет.

Изучен недостаточно. По-видимому, является типоспецифическим.

38. Лабораторная диагностика.

Основным методом диагностики является бактериологический. Материалом для исследования служат испражнения, рвотные масс, кровь, промывные воды желудка, моча, послужившие причиной отравления продукты. Особенности бактериологической диагностики сальмонеллёзов:

1.Использование сред обогащения (селенитовой, магниевой);

2.Пробы следует брать из последней, более жидкой, части испражнений;

3.Соблюдать соотношение 1:5;

4.В связи с тем, что S.arizone, S.diarizone ферментируют лактозу, использовать не только среду Эндо, но и висмут-сульфит-агар;

5.Для посева крови использовать среду Рапопорт;

6.Использование для предварительной идентификации колоний О1-сальмонеллёзного фага, к которому чувствительны до 98% сальмонелл;

7.Для окончательной идентификации выделенных культур вначале используют поливалентные адсорбированные О- и Н-сыворотки, а затем соответствующие моновалентные О- и Н-сыворотки.

Для быстрого обнаружения сальмонелл могут быть использованы поливалентные иммунофлуоресцентные сыворотки. Для выявления антител в сыворотке крови больного и переболевших используют РПГА с применением поливалентных эритроцитарных диагностикумов.

39.Лечение и профилактика.

Вслучае пищевой токсикоинфекции – промывание желудка, применение антибактериальных препаратов, общеукрепляющих средств. При сальмонеллёзных диареях – восстановление нормального водно-солевого обмена, антибиотикотерапия.

Специфическая профилактика не применяется.

Микробиология Дизентерии

40. Видовое название возбудителя и его систематическое положение.

S.flexneri, S.manchester, S.newcastle, S.dysenteriae, S.boydii, S.sonnei. Род Shigella относится к семейству Enterobacteriaceae. 41. Морфологические свойства.

Короткие неподвижные палочки, не образующие спор и капсул.

42.Тинкториальные свойства. Грамотрицательны.

43.Культуральные свойства.

Хорошо растут на обычных питательных средах, не растут на голодной среде с цитратом или малонатом в качестве единственного источника углерода. Колонии на плотных средах – круглые, выпуклые, полупрозрачные, в случае диссоциации образуются шероховатые колонии R-формы. На МПБ в виде неравномерного помутнения, шероховатые формы образуют осадок. Свежевыделенные культуры шигелл Зонне обычно образуют колони и двух типов: мелкие круглые выпуклые (I фаза), крупные плоские (II фаза). Характер колонии зависит от наличия (I фаза) или отсутствия (II фаза) плазмины, которая определяет вирулентность шигелл Зонне.

44. Физиологические свойства.

Шигеллы – факультативные анаэробы, температурный оптимум для роста 370, pH=6,7-7,2.

45. Биохимические свойства.

Не образуют H2S, не имеют уреазы. Реакция Фогеса-Проскауэра отрицательна, глюкозу и некоторые другие углеводы ферментируют с образованием кислоты без газа (кроме S.flexneri, S.manchester, S.newcastle), как правило, не ферментируют лактозу (за исключением шигелл Зонне), адонит, салицин и инозит, не разжижают желатин, обычно образуют каталазу, не имеют лизиндекарбоксилазы и фенилаланиндезаминазы. Международная классификация шигелл построена с учётом их биохимических признаков (манитнеферментирующие, манит-ферментирующие, медленно ферментирующие лактозу шигеллы) и особенностей антигенной структуры.

46.Антигенные свойства.

Ушигелл обнаружены разные по специфичности О-антигены: общие для семейства Enterobacteriaceae, родовые, видовые, групповые и типоспецифические, а также К-антигены. Н-антигенов у них нет. В классификации учитываются только групповые и типоспецифические О- антигены. В соответствии с этими признаками род Shigella подразделяется на 4 подгруппы или 4 вида и включает 44 серотипа. В подгруппу

А(вид S.dysenteriae) включены шигеллы, не ферментирующие маннита. Вид включает в себя 12 серотипов. Каждый серотип имеет свой особый типовой антиген. К подгруппе В (вид S.flexneri) относятся шигеллы, обычно ферментирующие маннит. шигеллы этого вида

серологически родственны друг другу, они содержат типоспецифические антигены, по которым разделяются на 6 серотипов и групповые антигены, по которым серотипы подразделяются на подсеротипы. Липополисахаридный антиген О к всех шигелл Флекснера содержит групповой антиген 3, 4 как главную первичную структуру. К подгруппе С (вид S.boydii) относятся шигеллы, обычно ферментирующие маннит. Члены группы серологически отличаются друг от друга. Вид включает 18 серотипов, каждый из которых имеет свой главный типовой антиген. В подгруппу D (вид S.sonnei) включены шигеллы, обычно ферментирующие маннит и способные медленно ферментировать лактозу и сахарозу. Вид включает в себя один серотип. Для внутривидовой классификации шигелл Зонне предложено два метода: 1) деление их на 14 биохимических типов и подтипов по способности ферментировать мальтозу, рамнозу и ксилозу; 2) деление на фаготипы по чувствительности к набору соответствующих фагов.

47. Факторы патогенности.

Важнейшее биологическое свойство шигелл, обусловливающее их патогенность – способность внедряться в эпителиальные клетки, размножаться в них и вызывать их гибель. Основные факторы патогенности шигелл можно разбить на три группы:

1.Факторы, определяющие взаимодействие с эпителием слизистой оболочки. Эта группа включает в себя факторы адгезии и

колонизации: из роль выполняют пили, белки наружной мембраны и ЛПС. Способствуют адгезии и колонизации нейраминидаза, гиалуронидаза и муциназа.

2.Факторы, обеспечивающие устойчивость к гуморальным и клеточным механизмам защиты макроорганизма и способность шигелл

размножаться в их клетках. К ним относятся факторы инвазии, которые способствуют проникновению шигелл в энтероциты и их размножению в них и в макрофагах с одновременным проявлением цитотоксического и (или) энтеротоксического эффекта.

3.Способность продуцировать токсины и токсические продукты, которые обусловливают развитие собственно патологического процесса. К этой группе относятся эндотоксин и два типа экзотоксинов – экзотоксины Шига и шигаподобные.

48.Эпидемиология инфекции.

Источником инфекции является только человек. Никакие животные дизентерией не болеют. Способ заражения – фекально-оральный. Пути передачи – водный (преобладающий для шигелл Флекснера), пищевой, особенно выраженная роль принадлежит молоку и молочным продуктам (преобладающий путь для шигелл Зонне) и контактно-бытовой, особенно для вида S.dysenteriae.

Шигеллы обладают достаточно высокой устойчивостью к факторам внешней среды. Они выживают на хлопчатобумажной ткани и на бумаге до 30-36 дней, в высохших испражнениях до 4-5 месяцев, в почве до 3-4 месяцев, в воде от 0,5 до 3 месяцев, в молоке и молочных продуктах –

до нескольких недель. При температуре 600 погибают через 15-20 минут. Чувствительны к хлорамину, активному хлору и другим дезинфектантам.

49. Патогенез инфекции.

Инкубационный период 2-5 дней, иногда меньше суток. Формирование инфекционного очага в слизистой оболочке нисходящего отдела толстого кишечника носит циклический характер: адгезия, колонизация, внедрение шигелл в цитоплазму энтероцитов, их внутриклеточное размножение, разрушение и отторжение эпителиальных клеток, выход возбудителей в просвет кишечника. Вслед за этим начинается очередной цикл. В результате повторяющихся циклов воспалительный очаг разрастается, образующиеся язвы, соединяясь, увеличивают обнажённость кишечной стенки, вследствие чего в испражнениях появляются кровь, слизисто-гнойные комочки, полиморфно-ядерние лейкоциты. Цитотоксины обусловливают разрушение клеток, энтеротоксин – диарею, эндотоксины – общую интоксикацию. Наиболее типичными клиническими проявлениями дизентерии служат понос, частые позывы, тенезмы, и общая интоксикация.

50. Иммунитет.

Прочный и достаточно длительный. Он обусловлен антимикробными антителами, антитоксинами, повышением активности макрофагов и Т-лимфоцитов. Значительную роль играет местный иммунитет слизистой оболочки кишечника, опосредуемый IgAs. Носит типоспецифический характер, прочного перекрёстного иммунитета не возникает.

51. Лабораторная диагностика.

Основным методом диагностики является бактериологический. Материалом для исследования служат испражнения. Схема выделения возбудителя: посев на дифференциально-диагностические среды Эндо и Плоскирева (параллельно на среду обогащения с последующим посевом на среды Эндо и Плоскирева) для выделения изолированных колоний, получение чистой культуры, изучение её биохимических свойств и, с учётом последних, идентификация при помощи поливалентных и моновалентных диагностических агглютинирующих сывороток. Для быстрой идентификации используют следующий метод: подозрительную колонию пересевают на трёхсахарный агар (глюкоза, лактоза, сахароза) с железом для определения продукции H2S или на среду, содержащую глюкозу, лактозу, сахарозу, железо и мочевину. Для обнаружения антигенов в крови, моче и испражнениях могут быть использованы РПГА, РСК, реакция коагглютинации, ИФМ, РАГА. Для серологической диагностики могут быть использованы РПГА, иммунофлуоресцентный метод, метод Кумбса. Диагностическое значение имеет проба с дизентерином.

52. Лечение и профилактика.

Лечение: восстановление нормального водно-солевого обмена, рациональное питание, дезинтоксикация, рациональная антибиотикотерапия, применение поливалентного дизентерийного бактериофага.

Поливалентный дизентерийный бактериофаг сухой с кислотоустойчивым покрытием и в свечах. Состав: сухая смесь фильтратов, полученных из фаголизатов, активных в отношении частых встречающихся возбудителей дизентерии (Зонне, Флекснера). Назначение: для лечения и профилактики. Способ применения: таблетки – через рот.

Дизентерин. Состав: раствор белковых фракций шигелл Флекснера и Зонне, полученных после гидролиза бактерий в кислой среде при 1200. Назначение: для диагностики дизентерии. Способ применения: строго внутрикожно в область передней поверхности предплечья.

Микробиология Эшерихиозов

1.Видовое название возбудителя и его систематическое положение. E.coli. Род Escherichia относится к семейству Enterobacteriaceae.

2.Морфологические свойства.

Имеют перитрихи (или неподвижные).

3.Тинкториальные свойства.

Грамотрицательны.

4.Культуральные свойства.

Хорошо растёт на обычных питательных средах – колонии на агаре круглые, выпуклые, полупрозрачные. Рост на бульоне в виде

диффузного помутнения. На всех дифференциально-диагностических средах E.coli, разлагающие лактозу, окрашены в цвет индикатора

(на среде Эндо – тёмно-малиновые с металлическим блеском).

5.Физиологические свойства.

Эшерихии – факультативные анаэробы, температурный оптимум для роста 370, pH=7,2-7,5.

6.Биохимические свойства.

Кишечная палочка в большинстве случаев способна ферментировать следующие углеводы с образованием кислоты и газа: глюкозу, лактозу, маннит, арабинозу, галактозу, иногда сахарозу. Образует индол, как правило, не образует H2S, восстанавливает нитраты в нитриты, не разжижает желатин, не растёт на голодной среде с цитратом, даёт положительную реакцию с MR и отрицательную – Фогеса-Проскауэра. По этим признакам её легко отличить от возбудителей ряда заболеваний, однако, патогенные E.coli ни по культуральным, ни по

биохимическим свойствам очень часто не отличаются от непатогенных.

7.Антигенные свойства.

УE.coli обнаружен 171 вариант О-антигенов, 57 вариантов Н-антигенов и 90 вариантов поверхностных К-антигенов. О-антиген означает принадлежность к определённой серогруппе, а Н-антиген – её серовариант. При более глубоком изучении были выявлены факторные О- и Н- антигены, т.е. их антигенные субварианты (Н2а, Н2b, H2c)

8.Факторы патогенности.

a.Факторы адгезии и колонизации.

b.Факторы инвазии. Их роль выполняют белки наружной мембраны.

c. Экзотоксины: А) гемолизины – повреждают мембраны за счёт образования в них пор; Б) токсин Шига – угнетает синтез белка; В)

токсин L – термолабильный, связываясь с G-белком, вызывает диарею; Г) токсин ST – термостабильный, взаимодействуя с рецептором гуанилатциклазы, стимулирует её активность и вызывает диарею; Д) цитотоксический некротический фактор (CNF) – повреждает RhoG-белки, вызывает инфекции мочевыводящих путей; Е) CLTD-токсин – цитолетальный разрыхляющий токсин; Ж) токсин EAST – термостабильный токсин, подобен токсину ST.

d.Эндотоксины – липополисахариды.

9.Этиология и Патогенез инфекции.

Энтеротоксигенные E.coli включают 17 серогрупп. Факторы адгезии и колонизации фимбриальной структуры и энтеротоксины (LT или ST, или оба). Колонизируют ворсинки без их повреждения. Энтеротоксины вызывают нарушение водно-солевого обмена. Локализация процесса – область тонкой кишки. Заболевание протекает по типу холероподобной диареи. Тип эпидемий – водный, реже питьевой. Болеют дети от года до 3 лет и взрослые.

Энтероинвазивные E.coli включают 9 серогрупп, патогенность связана со способностью внедряться в эпителиальные клетки слизистой оболочки кишечника и размножаться внутри них, вызывая их разрушение. Локализация процесса – нижний отдел подвздошной и толстая кишка. Заболевание протекает по типу дизентерии: вначале водянистая диарея, затем колитический синдром. Болеют дети 1,5-2 лет, подростки и взрослые. Тип вспышек – пищевой, водный.

Энтеропатогенные E.coli включают 9 серогрупп класса 1 и 4 серогруппы класса 2. Синтезируют факторы адгезии и колонизации, за счет которых колонизируют плазмолемму энтероцитов, вызывают повреждение поверхности эпителия с образованием эрозий и умеренного воспаления. Процесс локализуется в области тонкой кишки. Для заболевания характерны водянистая диарея и выраженное обезвоживание. Болеют в основном дети первого года жизни. Способ заражения – контактно-бытовой, реже пищевой.

Энтерогеморрагические E.coli продуцируют токсины Шига (STX-1 и STX-2). Вызывают у людей геморрагический колит с тяжёлыми осложнениями в виде гемолитической уремии и тромботической тромбоцитопенический пурпуры. Токсины разрушают клетки эндотелия мелких кровеносных сосудов. Образование сгустков крови и выпадение фибрина приводят к нарушению кровотока, кровотечению, ишемии и некрозу клеточной стенки. Уремический гемолитический синдром может привести к летальному исходу. Полагают, что естественным резервуаром являются крупный рогатый скот и овцы. Наиболее частый путь заражения – пищевой (мясо, молоко). Возможно заражение контактно-бытовым путём. Начало болезни острое: возникают кишечные спазмы, затем понос, вначале водянистый, потом – с кровью. Болеют дети и взрослые. Больной человек заразен.

10. Лабораторная диагностика.

Основана на выделении чистой культуры возбудителя и его идентификации, а также на тестировании токсинов с помощью ПЦР. Идентификация производится с помощью набора поливалентных ОК-сывороток и набора адсорбированных сывороток, содержащих антитела только к определённым антигенам. При необходимости у выделенных возбудителей определяют чувствительность к антибиотикам.

11. Лечение и профилактика.

Используют различные антибиотики. Для восстановления водно-солевого обмена применяют оральные солевые растворы.

Колибактерин. Состав: высушенные живые бактерии антагонистически активного в отношении шигелл Зонне и Флекснера штамма кишечной палочки. Назначение: для лечения колитов, дисбактериоза кишечника различной этиологии, долечивания реконвалесцентов после дизентерии, профилактики дизентерии и других кишечных заболеваний. Способ применения: через рот, два раза в день, ежедневно.

Бифидумбактерин. Состав: высушенная взвесь живых бифидобактерий штамма № 1 в ампулах или флаконах по 1-50 доз. Назначение: для лечения детей и взрослых при длительных колитах, дисбактериозах кишечника и с целью санации реконвалесцентов после перенесённой дизентерии. Способ применения: через рот.

Лактобактерин. Состав: высушенная взвесь живых антагонистически активных штаммов лактобактерий в ампулах и флаконах по 1-20 доз. Назначение: для лечения детей и взрослых при хронических колитах, дисбактериозах кишечника и с целью санации реконвалесцентов после острых кишечных инфекций. Способ применения: через рот.

Бактисубтил. Состав: одна капсула содержит чистую сухую культуру штамма бациллюс с 1 миллиардом вегетативных спор, энзимоактивного и антибиологического. Назначение: дисбактериозы и диареи различной этиологии. Способ применения: через рот.

Бификол. Состав: высушенная взвесь живых антагонистически активных бифидобактерий штамма № 1 и кишечных палочек штамма М-17 во флаконах по 1-50 доз. Назначение: для лечения хронических колитов, дисбактериозов кишечника и с целью санации реконвалесцентов после кишечных инфекций. Способ применения: через рот.

Коли-бактериофаг жидкий. Состав: фильтрат фаголизатов энтеропатогенных кишечных палочек. Назначение: для лечения различных колиинфекций, вызванных чувствительными к коли-фагу кишечными бактериями. Способ применения: а) местно – в виде полоскания, орошения, примочек, тампонирования; б) подкожно или внутримышечно в области наружной поверхности бедра или ягодицы. С профилактической целью – орошение послеоперационных ран, полости влагалища и матки после родов.

Коли-протейный бактериофаг жидкий. Состав: фильтрат фаголизатов наиболее распространённых серологических групп энтеропатогенных кишечных палочек и протеев. Назначение: для лечения детей с коли-протейными инфекциями, а так же для профилактики этих инфекций. Способ применения: через рот или в виде клизмы.

Протейный бактериофаг жидкий. Состав: фильтрат фаголизатов наиболее часто встречающихся возбудителей протейных инфекций. Назначение: для лечения протейных инфекций, очаговых инфекций различных органов, хирургических инфекционных процессов. Способ применения: местно – в виде орошения, примочек, тампонирования, обкладывания, введения в очаги. С профилактической целью при операциях на органах ЖКТ.

Интести-бактериофаг жидкий. Состав: взвесь стерильных фильтратов фаголизатов шигеллёзных, сальмонеллезных, наиболее распространённых серогрупп диареегенных E.coli, протея, стафилококков, псевдомонас аэругиноза и энтерококковых бактерий. Назначение: для лечения кишечных инфекций, вызванных вышеперечисленными бактериями. Способ применения: перорально или в виде клизмы.

Микробиология Холеры

1.Видовое название возбудителя и его систематическое положение. V.cholerae. Род Vibrio относится к семейству Vibrionaceae.

2.Морфологические свойства.

Короткие, не образующие спор и капсул, изогнутые или прямые палочки, диаметром 0,5 мкм, длиной 1,5-3,0 мкм, подвижные (монотрих).

3.Тинкториальные свойства. Грамотрицательны.

4.Культуральные свойства.

Холерный вибрион очень неприхотлив к питательным средам. Он хорошо и быстро размножается на 1%-ной щелочной пептонной воде (ПВ), содержащей 0,5-1,0% NaCl, обгоняя рост других бактерий. Для подавления роста протея к ПВ рекомендуется добавлять теллурит калия. 1%-ная ПВ является наилучшей средой обогащения для холерного вибриона. При росте он образует через 6-8 часов на поверхности ПВ нежную рыхлую сероватого цвета плёнку, которая при встряхивании легко разрушается и падает на дно в виде хлопьев, ПВ умеренно мутнеет. Для выделения холерного вибриона предложены различные избирательные среды: щелочной агар, желточно-солевой агар, щелочной альбуминат, щелочной агар с кровью, лактозо-сахарозные с другие среды. Наилучшей является среда TCBS (тиосульфатцитратбромтимоловый сахарозный агар) и её модификации. Однако чаще всего используют щелочной МПА, на котором холерный вибрион образует

гладкие стекловидно-прозрачные с голубоватым оттенком дисковидные колонии вязкой консистенции. При посеве уколом в столбик желатина вибрион через 2 суток при температуре 22-230 вызывает разжижение с поверхности в виде пузырька, затем воронкообразное и, наконец, послойное. В молоке вибрион быстро размножается, вызывая через 24-48 часов свёртывание, а затем наступает пептонизация молока, и через 3-4 дня вибрион погибает из-за сдвига pH молока в кислую сторону.

5.Физиологические свойства.

Вибрионы – аэробы и факультативные анаэробы, температурный оптимум для роста 37-180, pH=8,6-9,0.

6.Биохимические свойства.

Ферментируют углеводы с образованием кислоты без газа. Оксидазоположительны, образуют индол, восстанавливают нитраты в нитриты, расщепляют желатин, часто дают положительную реакцию Фогеса – Проскауэра (т.е. образуют ацетилметилкарбинол), уреазы не имеют, не образуют H2S

7.Антигенные свойства.

Холерный вибрион относится к О1 группе. Он имеет общий А-антиген и два типоспецифических антигена – В и С, по которым различают три серотипа V.cholerae: 1) серотип Огава (АВ); 2) серотип Инаба (АС); 3) серотип Гикошима (АВС). Холерный вибрион в стадии диссоциации имеет OR-антиген. Вид V.cholerae подразделяют на 4 биотипа: V.cholerae Ol cholerae, V. cholerae eltor, V. cholerae O139 bengal, V. cholerae non O1.

8.Факторы патогенности.

a.Подвижность.

b.Хемотаксис. С помощью этих свойств вибрион вступает во взаимодействие с эпителиоцитами.

c.Факторы адгезии и колонизации, с помощью которых вибрион прилипает к микроворсинкам и колонизирует слизистую оболочку тонкого кишечника (муциназа, нейраминидаза).

d.Холерный токсин – холероген.

e.Новые токсины, способные вызывать диарею, но не имеют генетического и иммунологического родства с холерогеном.

f.Дермонейротические и геморрагические факторы.

g.Эндотоксин – ЛПС.

Главный фактор патогенности – экзотоксин холероген (СТХ АВ), который и обусловливает патогенез этой болезни. Молекула холерогена состоит из двух фрагментов – А и В. Фрагмент А состоит из двух пептидов – А1 и А2, он обладает специфическим свойством холерного токсина и наделяет его качествами суперантигена. Фрагмент В состоит из 5 одинаковых субъединиц. Он выполняет две функции: 1) распознаёт рецептор (моносиалоганглиозид) энтероцита и связывается с ним; 2) формирует внутримембранный гидрофобный канал для прохождения субъединицы А. Пептид А2 служит для связывания фрагментов А и В. Собственно токсическую функцию выполняет пептид А1 (АДФ-рибозилтрансфераза). Для обнаружения способности V.cholerae продуцировать холероген можно использовать различные методы: 1) биологическая проба на кроликах; 2) непосредственное обнаружение холерогена с помощью ПЦР, ИФМ или реакции пассивного иммунного гемолиза.

9.Эпидемиология инфекции.

Основным источником инфекции является только человек – больной холерой или вибрионоситель, а также загрязнённая ими вода. Никакие животные холерой не болеют. Способ заражения – фекально-оральный. Пути заражения: а) основной – через воду, используемую для питья, купания и хозяйственно-бытовых нужд; б) контактно-бытовой; в) через пищу. Продолжительность выделения холерного вибриона у здоровых носителей составляет от 7 до 42 дней и 7-10 дней у переболевших. Особенностью холеры является то, что после неё, как правило, не остаётся длительного носительства и не формируется стойких эпидемических очагов. При возникновении заболеваний холерой осуществляют комплекс противоэпидемических мероприятий, среди которых ведущим и решающим является активное своевременное выявление и изоляция больных в острой и атипической форме и здоровых вибрионосителей.

Холерные вибрионы хорошо выживают при низкой температуре – во льду сохраняют жизнеспособность до 1 месяца. В морской воде до 47 суток, в речной – от 3-5 дней до нескольких недель, в кипячёной минеральной воде – более 1 года, в почве – от 8 дней до 3 месяцев, на сырых овощах – 2-4 дня, в молоке и молочных продуктах – 5 дней. При температуре 800 погибают через 5 минут, при 1000 – моментально.

Высокочувствительны к кислотам, под влиянием дезинфектантов погибают через 5-15 минут. Чувствительны к высушиванию и действию прямых солнечных лучей. Высокочувствительны к хлору.

10. Патогенез инфекции.

Инкубационный период при холере от нескольких часов до 6 суток, чаще всего 2-3 дня. Попав в просвет тонкого кишечника, холерные вибрионы за счёт подвижности и хемотаксиса к слизистой оболочке направляются к слизи. Чтобы проникнуть через неё, вибрионы выбрасывают ряд ферментов. Путём адгезии вибрионы прикрепляются к гликокалексу эпителия и, теряя подвижность, начинают интенсивно размножаться, колонизируя микроворсинки тонкого кишечника, и одновременно вырабатывать большое количество экзотоксина – холерогена. Молекулы холерогена связываются с моносиалганглиозидом и проникают в мембрану клетки, где активируют аденилатциклазную систему, а

накапливающийся цАМФ вызывает гиперсекрецию жидкости, катионов и анионов из энтероцитов, что и приводит к холерной диарее, обезвоживанию и обессоливанию организма. Различают три типа течения болезни:

a.Бурное, тяжёлое обезвоживающее диарейное заболевание, приводящее к смерти больного через несколько часов.

b.Менее тяжёлое течение или понос без обезвоживания.

c.Бессимптомное течение заболевания (вибрионосительство).

При тяжёлой форме холеры у больных появляется понос, стул учащается, испражнения становятся всё более обильными, принимают водянистый характер, утрачивают фекальный запах, и имеют вид рисового отвара. Затем присоединяется изнурительная рвота, сначала содержимым кишечника, а затем рвотные массы приобретают вид рисового отвара. Температура падает ниже нормы, кожа становится синюшной, морщинистой и холодной – холерный Алги. В результате обезвоживания происходит сгущение крови, развивается цианоз, кислородное голодание, резко страдает функция почек, появляются судороги, больной теряет сознание и наступает смерть.

11. Иммунитет.

Прочный, длительный, повторные заболевания наблюдаются редко. Иммунитет антитоксический и антимикробный, обусловлен антителами, клетками иммунной памяти и фагоцитами.

12. Лабораторная диагностика.

Основным и решающим методом диагностики является бактериологический. Материалом для исследования служат испражнения и рвотные массы. На вибрионосительство исследуют испражнения. У лиц, погибших от холеры, для исследования берут лигированный отрезок тонкого кишечника и желчный пузырь. Из объектов внешней среды чаще всего исследуют воду открытых водоёмов и сточные воды. При поведении бактериологического исследования необходимо соблюдать следующие три условия: 1) как можно быстрее произвести посев материала от больного; 2) посуда, в которую берут материал, не должна обеззараживаться химическими веществами и не должна содержать их следа, т.к. холерный вибрион к ним очень чувствителен; 3) исключить возможность загрязнения и заражения окружающих. Выделение культуры производят по схеме: посев на ПВ, одновременно на щелочной МПА или какую-либо избирательную среду (лучше всего TCBS). Через 6 часов исследуют плёнку, образующуюся на ПВ, и в случае необходимости делают посев на вторую ПВ. С ПВ делают пересев на щелочной МПА. Подозрительные колонии пересевают для получения чистой культуры, которую идентифицируют по морфологическим, культуральным, биохимическим свойствам, подвижности и окончательно типируют с помощью диагностических агглютинирующих сывороток О-, OR-, Инаба, Огава и фагов (ХДФ). Методом ускоренной диагностики является люминесцентносерологический. Он позволяет обнаружить холерный вибрион непосредственно в исследуемом материале в течении 1,5-2 часов. Для быстрого обнаружения холерного вибриона в испражнениях и объектах внешней среды может быть использована РПГА с антительным диагностикумом.

13. Лечение и профилактика.

Лечение больных холерой должно заключаться прежде всего в регидратации и восстановлении нормального водно-солевого обмена. С этой целью рекомендуется использовать солевые растворы.

Холерная вакцина. Состав: клетки штаммов холерных вибрионов серологических типов Инаба и Огава, убитых нагреванием или формальном, суспендированные в физиологическом растворе или в сухом виде. Назначение: для профилактики. Способ применения: подкожно в подлопаточную область.

Холероген-анатоксин. Состав: очищенный и концентрированный препарат, полученный из центрифугата бульонной культуры холерного вибриона штамма 569В, обезвреженного формалином. Назначение: для профилактики. Способ применения: с помощью шприца подкожно в подлопаточную область или с помощью безыгольного инъектора в верхнюю треть плеча.

Микробиология Газовой Гангрены

14. Видовое название возбудителя и его систематическое положение.

C.perfringens, C.novyi, C.septicum, C.histolyticum, C.sordellii, C.difficile, C.sporogenes. Род Clostridium относится к классу Clostridia. 15. Морфологические свойства.

C.perfringens: толстая неподвижная палочка со слегка закруглёнными концами длинной 3,0-9,0 мкм и диаметром 0,9-1,3 мкм. Споры овальные, располагаются субтерминально или, чаще, центрально, образуются лучше в щелочной среде. В материале из ран и на среде с сывороткой образуют капсулу.

C.novyi: полиморфная толстая палочка с закругленными концами диаметром 0,8 – 1,4 мкм и длиной 1,6 – 2,5 мкм, нередко располагается в

виде цепочек из 2—5 клеток. Капсулы не образует, подвижный перитрих (серотип С неподвижен). Споры овальные или круглые, располагаются субтерминально, редко — центрально.

16.Тинкториальные свойства. Грамположительны.

17.Культуральные свойства.

C.perfringens: на жидких средах быстро растёт, вызывая помутнение. Молоко створаживает через 3—5 ч с образованием рыхлого сгустка и с отделением прозрачной сыворотки. На кровяном агаре образует колонии диаметром 2—5 мм с зоной гемолиза и приподнятым центром. В столбике агара образуются дисковидные колонии.

C.novyi: на жидких средах растет в виде легкого помутнения, дает большой осадок. На кровяном агаре она образует серые бугристые колонии с приподнятым центром, отходящими отростками и зоной гемолиза. В столбике с агаром дает хлопьевидные колонии.

18. Физиологические свойства.

C.perfringens – анаэробы, температурный оптимум для роста 45 °С. C.novyi – анаэробы, Оптимальная температура для роста 40 – 45 °С.

19. Биохимические свойства.

C.perfringens: ферментирует глюкозу, лактозу, мальтозу и сахарозу с образованием кислоты и газа, но не ферментирует маннит. Разжижает желатин.

C.novyi: ферментирует глюкозу, мальтозу с образованием газа, не ферментирует лактозу. Желатин разжижает.

20. Факторы патогенности.

C.perfringens: обладает высокой инвазивностью и сильной токсигенностью. Первая связана со способностью возбудителя вырабатывать гиалуронидазу и другие ферменты, которые оказывают также и разрушающее действие на клетки соединительной ткани и мышцы. Главным фактором патогенности является вырабатываемый им сложного состава экзотоксин. Гемотоксическое, некротоксическое, нейротоксическое, лейкотоксическое и летальное действия связаны с различными компонентами экзотоксина. Отдельные штаммы С.perfringens синтезируют экзотоксины разного состава и разной антигенной специфичности, в соответствии с которой различают 6 серологических типов этого возбудителя: А, В, С, D, Е, F.

Серотип А – один из главных возбудителей газовой гангрены у людей. Его токсин содержит не менее 6 компонентов: альфа, эта, тэта, каппа, мю, ню, главным из которых является альфа-лецитиназа С.

C.novyi: Патогенность обусловлена его способностью продуцировать очень сильный экзотоксин сложного состава, вызывающий при заражении животных характерный бесцветный или розового цвета отек желеобразной консистенции. Токсин обладает также гемолитическим и летальным свойствами. Различают 3 основных типа С. Novyi – А, В и С. Тип А продуцирует альфа-, гамма-, дельта-, эпсилон-экзотоксины, с которыми связана его способность вызывать заболевание у людей.

21. Эпидемиология инфекции.

Заражение происходит при проникновении возбудителей газовой гангрены в рану. Клостридии чрезвычайно широко распространены в природе. Естественной средой их обитания служит кишечник травоядных животных и человека, а также почва, куда они поступают с испражнениями.

22. Патогенез инфекции.

Инкубационный период длится от нескольких часов до 5 дней, иногда дольше. Анаэробная инфекция продолжается 5—6 дней. Различают следующие формы газовой гангрены:

a.Анаэробная инфекция мягких тканей конечностей и туловища.

b.Анаэробная инфекция мозга.

c.Послеродовая или послеабортная анаэробная инфекция.

d.Анаэробная инфекция органов брюшной полости и брюшины.

e.Анаэробная инфекция органов грудной полости.

f.Анаэробный остеомиелит.

Для газовой гангрены характерны: прогрессирующий некроз тканей, отек, газообразование в тканях и отравление организма токсинами возбудителя и продуктами распада тканей. Клостридии — некропаразиты, благоприятной средой для их размножения служат мертвые или поврежденные ткани. Поэтому наиболее опасны тяжелые повреждения с обширной раневой поверхностью, нарушением кровообращения, гематомами, размозжением мышц, раздроблением костей, образованием слепых ходов и т. п.

Попадая в такие раны, клостридии начинают быстро размножаться в глубине поврежденной ткани (анаэробные условия) и выделять экзотоксины. Обладая высокой инвазивностью, они проникают и в здоровую ткань, вначале повреждая ее, а затем и некротизируя своими токсинами и ферментами. Особенно бурно процесс протекает в мышечной ткани, содержащей гликоген и являющейся хорошей питательной средой для клостридий.

Впатогенном действии клостридий и их токсинов различают две стадии:

1.Образование отека. Вследствие действия токсина повышается проницаемость кровеносных сосудов для плазмы и клеток крови.

Развитие отека приводит к сдавливанию ткани; кроме того, с отечной жидкостью поступает токсин. Все это приводит к повреждению тканей и делает их доступными для размножения клостридий.

2. Развитие газовой гангрены, т. е. некроз мышечной и соединительной тканей. Газообразование является результатом ферментативной активности клостридий, а некроз — следствием некротоксического действия токсинов и ферментов. Токсины не только действуют местно, но и вызывают сильнейшую общую интоксикацию (нейротоксическое действие). К специфической бактериальной интоксикации присоединяется отравление продуктами тканевого разложения. Чем больше зона поражения, тем сильнее и разнообразнее интоксикация организма.

23.Иммунитет.

Восновном опосредуется антитоксинами. Роль антимикробных антител второстепенна.

24.Лабораторная диагностика.

Материалом для исследования служат кусочки пораженных тканей (некротизированная и пограничные с ней участки) и отечная жидкость. Кроме того, исследованию в случае необходимости подвергают перевязочный и шовный материал (шелк, кетгут), одежду, образцы почвы; при пищевых интоксикациях, вызванных клостридиями – испражнения и продукты.

Микробиологическая диагностика заключается в выделении из исследуемого материала возбудителя и его идентификации, основанной на изучении морфологических, культуральных, биохимических свойств и определении токсигенности. Исследование состоит из нескольких

этапов:

1.Бактериоскопия отделяемого раны или экссудата.

2.Выделение возбудителя и его идентификация.

3.Заражение белых мышей исследуемым материалом, фильтратом бульонной культуры или кровью больных для обнаружения токсина.

4.Идентификация токсина клостридий с помощью реакций нейтрализации специфическими антитоксическими сыворотками в биологических пробах на белых мышах или культурах клеток.

Для выделения клостридий используют следующие среды:

1.Жидкие накопительные (казеиновые или мясные, содержащие 1 % глюкозы и кусочки печени, перед посевом кипятят и заливают вазелиновым маслом для создания анаэробных условий), молоко.

2.Плотные — кровяной агар Цейсслера (15 % дефибринированной крови + 2 % глюкозы); кровяной агар с бензидином (колонии С. novyi на такой среде чернеют на воздухе); среда Вильсона—Блера в длинных стеклянных трубочках (С. perfringens в такой среде уже через 3—

4 ч вызывает почернение в месте своего размножения за счет образования сернистого железа из Na2S.H FeCl3 и бурное газообразование за счет ферментации глюкозы); среда Виллиса—Хоббса (содержит, кроме питательного агара, лактозу, индикатор, яичный желток и обезжиренное молоко). На этой среде колонии С.perfringens окрашены в цвет индикатора (ферментируют лактозу), имеют ореол опалесценции (наличие лецитиназы); колонии С.novyi бесцветные (не ферментируют лактозу), окружены зоной опалесценции (лецитиназа); колонии С.septicum окрашены в красный цвет (ферментируют лактозу), но не имеют зоны опалесценции; колонии С. histolyticum — бесцветны, окружены зоной просветления; колонии С.sordellii, С.sporogenes и С.difficile — бесцветные (не ферментируют лактозу), но колонии С.sordellii имеют ореол опалесценции (имеют лецитиназу).

Для ускоренной диагностики газовой гангрены предложен следующий метод: посев производится в столбик полужидкого агара, к которому добавляется антитоксическая сыворотка. В такой среде с гомологичной антитоксической сывороткой клостридии вместо диффузного помутнения образуют изолированные колонии, а в препаратах-мазках из них имеют вид стрептобацилл (располагаются цепочками).

3.Лечение и профилактика.

Главный метод предупреждения газовой гангрены – своевременная и правильная хирургическая обработка ран. В случае особо тяжелых ранений, которые могут повлечь развитие газовой гангрены, больному с профилактической целью вводят антитоксические сыворотки против наиболее частых возбудителей – С.perfringens, С.novyi и С.septicum. При отсутствии эффекта сыворотки вводят повторно. Серотерапия должна обязательно сочетаться с эффективной антибиотикотерапией и соответствующим общеукрепляющим лечением.

Противогангренозные моно- и поливалентные сыворотки. Состав: очищенные и концентрированные методом ферментативного гидролиза сыворотки лошадей, иммунизированных анатоксинами или токсинами возбудителей газовой гангрены. Назначение: для лечения и профилактики. Способ применения: внутримышечно, в тяжёлых случаях – внутривенно капельным способом.

Микробиология Столбняка

25.Видовое название возбудителя и его систематическое положение.

C.tetani. Род Clostridium относится к классу Clostridia.

26.Морфологические свойства.

С.tetani – прямая палочка длиной 2,4—5,0 мкм, диаметром 0,5—1,1 мкм, иногда образующая длинные нити. Большинство штаммов подвижно (перитрихи). Споры круглые, располагаются терминально, придавая возбудителю вид булавки или барабанной палочки. Капсулы не образует.

27. Тинкториальные свойства.

Грамположительны, но в старых культурах становится грамотрицательными. 28. Культуральные свойства.

На питательном бульоне (среде Китта—Тароцци) рост медленный с равномерным помутнением и редким газообразованием. Культура издает своеобразный неприятный запах выгребной ямы. На кровяном агаре колонии размером 4—6 мм, круглые, плоские, с неровными краями, полупрозрачные, серые, нередко в виде переплетающихся нитей, напоминающих паучков. Вокруг колоний – зона гемолиза. В столбике агара колонии в виде комочков ваты. Молоко свертывает к 4 – 7-му дню в виде мелких хлопьев, затем наступает его пептонизация.

29. Физиологические свойства.

С.tetani – анаэробы, температурный оптимум для роста 370.

30. Биохимические свойства.

Сахаролитическими свойствами не обладает, лишь редкие штаммы ферментируют глюкозу. Обладает слабыми протеолитическими свойствами, медленно гидролизует желатин, не образует индола, восстанавливает нитраты в нитриты.

31. Антигенные свойства.

Возбудитель столбняка имеет О- и Н-антигены. По Н-антигену различают более 10 серотипов, однако все они образуют одинаковый

экзотоксин.

32. Факторы патогенности.

Главным фактором патогенности, определяющим патогенез и клинику столбняка, является вырабатываемый им сильнейший экзотоксин. Он состоит из двух фракций – тетаноспазмина (нейротоксина) и тетанолизина (разрушает эритроциты). Тетанолизин выделяется из клеток с первых дней развития культуры с помощью механизма активного транспорта. Тетаноспазмин через клеточную стенку клостридий не проходит, а выделяется в культуральную жидкость лишь при распаде микробных клеток. Тетаноспазмин синтезируется внутриклеточно в виде неактивного протоксина. Его активация осуществляется бактериальной протеазой, которая разрезает полипептид на две части. Активный внеклеточный нейротоксин состоит из двух связанных между собой дисульфидными связями цепей: легкой – L и тяжелой – Н

. Н-цепь выполняет акцепторную роль. L-цепь обладает какими-то ферментативными свойствами, опосредующими биологическую активность нейротоксина. Взятые сами по себе L- и Н-цепи не токсичны, но после реассоциации молекулы токсина его токсичность восстанавливается. Мишенью токсина служит везикулоассоциированный мембранный белок синаптобревин.

Его взаимодействие с нервной клеткой происходит через четыре стадии:

1)связывание с рецептором;

2)связывание с мембранами нервных клеток,

3)энергозависимый процесс проникновения токсина в цитозоль клетки, осуществляемый опосредованным рецептором эндоцитозом

4) продвижение по аксону со скоростью 1 см/ч. Продвижение токсина вверх по спинному или продолговатому мозгу может происходить от нейрона к нейрону только в области синапсов, так как оболочка нейронов практически непроницаема для молекул токсина.

Конечный результат действия столбнячного токсина заключается в том, что он блокирует синаптическую передачу: тормозит освобождение таких медиаторов, как глицин, ацетилхолин, норадреналин, ГАМК, и вызывает нервно-мышечную патологию. Возможно также, что повреждаются и иные, а не только синаптические структуры.

Тетанолизин – мембранотропный токсин, он разрушает эритроциты и, возможно, другие клетки.

33. Эпидемиология инфекции.

Возбудитель столбняка распространен повсеместно в почве и других объектах внешней среды на различных территориях Земного шара. Больной столбняком человек неконтагиозен - передачи возбудителя столбняка от больного не происходит. Основным путем заражения столбняком является проникновение возбудителя через поврежденные кожные покровы и слизистые оболочки. Местом входных ворот служат различные раны: огнестрельные, колотые, резаные, занозы, потертости, ожоги, обморожения, травмированные родовые пути (послеродовый или послеабортный столбняк), операционные раны при инфицировании их руками, инструментами или перевязочным материалом.

Вегетативные формы не отличаются особой устойчивостью. При кипячении они разрушаются в течение 5 мин. Напротив, споры обладают исключительно высокой резистентностью к различным физическим и химическим воздействиям. Для их разрушения требуется кипячение в течение 1 – 3 часов, автоклавирование при температуре 120 °С они переносят до 40 мин. Споры не чувствительны к низким температурам, к рассеянному солнечному свету. 1 % раствор сулемы, формалина, 5 % раствор фенола уничтожают их через 12—14 ч, они практически не чувствительны к химиотерапевтическим препаратам. В высушенном состоянии споры сохраняют жизнеспособность несколько десятков лет, в почве сохраняется длительное время, а при благоприятных условиях могут в ней прорастать и размножаться. Поэтому почва, особенно загрязненная испражнениями животных и человека, является неиссякаемым резервуаром С.tetani и постоянным потенциальным источником заражения людей и животных столбняком.

34. Патогенез инфекции.

Инкубационный период при столбняке у человека составляет в среднем 6— 14 дней, но может варьировать от 1—3 дней до месяца и более,

ичем короче инкубационный период, тем тяжелее протекает болезнь.

В клинической картине столбняка ведущими симптомами являются: 1) Тоническое сокращение поперечнополосатой мускулатуры.

2) Повышенная рефлекторная возбудимость от внешних раздражений.

Раньше всего наступает спазм жевательной мускулатуры (тризм) и затылочных мышц. Затем поражаются мышцы лица – у больного появляется вынужденная («сардоническая») улыбка. Далее наступает спазм мускулатуры туловища и конечностей. Вследствие того что спастическое сокращение разгибательной мускулатуры спины выражено сильнее, чем сгибательных мышц живота, больной лежит, опираясь только на затылок и таз. В связи с повышенной рефлекторной возбудимостью пораженных токсином двигательных центров малейшее раздражение вызывает тетанические (клонические) судороги поперечно-полосатой мускулатуры, в результате чего тело приобретает «столбообразное состояние» с выгибанием позвоночника дугой (опистотонус). Больной находится в ясном сознании. Смерть наступает от паралича сердца либо от асфиксии вследствие поражения мышц гортани, межреберных мышц и диафрагмы.

35. Иммунитет.

Стойкий и длительный, опосредуется главным образом антитоксинами, клетками иммунной памяти и повышением фагоцитарной активности.

36. Лабораторная диагностика.

Бактериологическая диагностика столбняка заключается в выделении и идентификации возбудителя и в обнаружении его токсина в исследуемом материале. Для исследования берут от больных кусочки ткани из мест проникновения возбудителя в организм, экссудат, инородное тело, тампоны из раны. При послеродовом или послеабортном столбняке исследуют выделения и ткани из влагалища и матки, при столбняке новорожденных – выделения из пупочного канатика. При исследовании умерших берут материал из раны, воспалительных очагов, старых рубцов, а также кровь, печень, селезенку и легкие, куда возбудитель может быть занесен кровью.

Микробиологическая диагностика включает в себя следующие этапы:

3.Бактериоскопия исходного материала.

4.Посев для выделения возбудителя и его идентификации.

5.Обнаружение столбнячного токсина.

Наиболее простым и эффективным методом микробиологической диагностики столбняка является биологическая проба на белых мышах. С этой целью исследуемый материал (растертые в физиологическом растворе кусочки некротизированной ткани, гной и иной материал) или фильтрат изучаемой культуры делят на две фракции. Одну из них смешивают с антитоксической сывороткой и оставляют смесь при комнатной температуре на 40 мин (для нейтрализации токсина). После этого заражают белых мышей нативным материалом и смесью его с антитоксической сывороткой. При наличии в нативном материале столбнячного токсина опытные мыши погибают. Контрольные мыши, которым вводят смесь нативного материала с антитоксином, остаются живыми. Для обнаружения столбнячного токсина может быть использована РПГА с антительным эритроцитарным диагностикумом.

37. Лечение и профилактика.

Для специфического лечения столбняка применяют противостолбнячную антитоксическую сыворотку. Состав: очищенная и концентрированная методом ферментативного гидролиза сыворотка лошадей, гипериммунизированных столбнячным анатоксином или токсином. Назначение: для профилактики и лечения. Способ применения: для профилактики – подкожно, для лечения – внутримышечно и внутривенно.

Адсорбированный столбнячный анатоксин. Состав: очищенный от балластных белков столбнячный токсин, обезвреженный формалином и теплом, сорбированный на гидроокиси алюминия. Назначение: для профилактики. Способ применения: подкожно в подлопаточную область.