46

Мазепа А.В., Ляхов С.А.,Цымбалюк К.?.

Физико-химические методы исследования лекарственных препаратов.

Краткий конспект лекций

1. Хроматография

Хроматография (гр. сhrömatos − цвет + graphö – пишу) – метод разделения, анализа и физико-химических исследований веществ, основанный на перемещении зоны вещества вдоль слоя сорбента в потоке подвижной фазы с многократным повторением сорбционных и десорбционных актов. При этом разделяемые вещества распределяются между двумя несмешивающимися фазами (в зависимости от их относительного сродства к каждой из фаз) ­– подвижной и неподвижной.

Хроматографические методы широко используются в химии и биохимии, находят применение в химической, нефтехимической, металлургической, фармацевтической, пищевой и других отраслях промышленности.

Круг решаемых задач и практическое использование хроматографии непрерывно расширяется.

В зависимости от агрегатного состояния подвижной и неподвижной фаз различают следующие виды хроматографии:

Подвижная фаза	Неподвижная фаза
	Жидкость	Твердое
Газ	Газо-жидкостная хроматография (ГЖХ)	Газовая хроматография (ГХ)
Жидкость	Жидкость-жидкостная хроматография	Жидкостная хроматография (ЖХ)

В зависимости от аппаратного исполнения различают колоночную (неподвижная фаза помещена в трубку, длина которой намного больше диаметра, подвижная фаза подается под давлением от 0.01 – 50 атм), тонкослойную (неподвижная фаза нанесена слоем в 0.1 – 5 мм на твердую инертную подложку прямоугольной формы; как правило, неподвижная фаза “открыта” со всех сторон, кроме той, которая касается подложки, подвижная фаза подается или под действием капиллярных сил, или под действием силы тяжести, в редких случаях – под давлением) и бумажную хроматографию (лист специальной хроматографической бумаги пропитан неподвижной фазой или – в редких случаях – сам является таковой, подвижная фаза подается под действием силы тяжести или под действием капиллярных сил).

В зависимости от задач, которые решает тот или иной хроматографический эксперимент различают аналитическую (определение качественного и/или количественного состава анализируемой смеси) и препаративную хроматографию (выделение одного или нескольких компонентов из смеси).

В зависимости от природы сил, участвующих в процессе, различают адсорбционную, распределительную, ионнообменную, гель-проникающую хроматографию и гель-электрофорез.

В адсорбционной хроматографии основную роль в удержании компонентов анализируемой смеси играет обратимое связывание их на поверхности сорбента за счет избыточной энергии поверхности, дополнительно могут наблюдаться образование водородных связей, ионные взаимодействия, донорно-акцепторные.

В распределительной хроматографии основную роль играют различия в распределении веществ между подвижной и неподвижной фазами.

В гель проникающей хроматографии разделение происходит за счет различной способности молекул разного размера проникать в поры сорбента (хорошие сорбенты имеют поры близкого размера).

В гель-электрофорезе разделение происходит за счет различий в размере молекул, их формы и заряда одновременно. Под действием электрического поля заряженные молекулы начинают перемещаться к соответствующему электроду, при этом, чем больше молекула, тем большее сопротивление ее перемещению оказывает гель. При одинаковом размере (молекулярной массе) глобулярные молекулы перемещаются быстрее вытянутых вдоль одной оси.

В ионнообменной хроматографии разделение происходит за счет различного удержания разных ионов противоионами, находящимися на поверхности неподвижной фазы.