Дифференциально-диагностические среды

Дифференциально-диагностические среды Гисса (Цветной ряд)

Среда Кода для дифференциации энтеробактерий Среда Кесслера для Е.coli

Комбинированные дифференциально-диагностические среды (варианты 3-х сахарного агара)

Плотные элективные, дифференциально-диагностические среды для энтеробактерий

А. среда Эндо (малиновые колонии, часто с металлическим блеском, образуют лактозопозитивные E.coli; Б. Среда Плоскирева (желтые колонии образуют лактозонегативные Salmonella, тёмно-розовые колонии образуют E.coli).

В. Среда Левина Г. Висмут-сульфит агар

Д. Цитратный агар Симмонса Е. Хромогенный агар для дифференциации энтеробактерий

Обогатительные (накопительные) среды

Назначение – накопление искомых микроорганизмов перед высевом на плотную среду для выделения чистой культуры. Могут содержать элективный фактор для подавления роста сопутствующей микрофлоры или факторы роста, для поддержания роста требовательных микроорганизмов. Состав: Питательная основа; Элективный фактор (не всегда); Факторы роста (не всегда). Примеры:

Солевой бульон – обогатительная среда для стафилококков. Рост посторонней микрофлоры подавляется.

Селенитовый бульон – обогатительная среда для сальмонелл. Прочая кишечная микрофлора подавляется. Питательная основа - мясо-пептонный бульон, элективный фактор - селенит натрия.

Транспортные среды

Исследование объектов внешней среды

Золотистый стафилококк - Staphylococcus aureus

A.Мазок из чистой культуры S.aureus; B.Рост культуры S.aureus на МПА; С.Д.

C.Лецитиназная активность S.aureus на желточно-солевом агаре Чистовича;

Д.Нуклеазная активность S.aureus на ДНК-агаре

Е.Элективная среда для S. aureus – желточно-солевой агар с хлоридом

лития – среда Байрда-Паркера. Лецитиназная активность S. aureus – в виде зон помутнения вокруг колоний

Стрептококки - Streptococcus

А.

А.Str. agalactiae в мазке из молока (окр.по Граму)

Б. Str. pyogenes в мазке из гноя (окраска по Граму)

В. Str. equi – возбудитель мыта лошадей - в мазке из чистой культуры (окраска генцианвиолетом)

Г. Str.pneumoniae – возбудитель диплококковой септицемии – в мазке из крови (окраска по Граму)

Культурально-биохимические свойства стрептококков

Гемолиз культуры стрептококков на кровяном агаре (видны зоны просветления агара вокруг колоний).

СAMP-тест: проявление скрытой гемолитической активности культуры Str.agalactiae в виде эффекта «крыла бабочки» в зоне влияния культуры S. aureus

Синегнойная палочка - Pseudomonas aeruginosae

Мазок из культуры P.aeruginosae, окраска по Граму.

Образование сине-зеленого пигмента при росте P.aeruginosae на жидкой и плотной среде

ОФ-тест на среде Хью-Лейфсона Рост P.aeruginosae на кровяном агаре («радужный лизис»)

Возбудитель гнилостных процессов протей - Proteus vulgaris

Proteus vulgaris - полиморфные палочки, перитрихи, по Граму красятся отрицательно;

1. «Ползучий» рост Proteus vulgaris на пластинчатом агаре при «точечном» посеве в центр чашки;

2. Ферментация мочевины на среде Кристенсена.

С D

3. Образование сероводорода на среде «3-х сахарный агар Олькеницкого (3-я пробирка слева);

4. Рост Proteus vulgaris на кровяном агаре (вуалеобразная плёнка);

Возбудитель сибирской язвы - Bacillus anthracis

Сибирская язва у животных и человека

AБ

ВГ

1. B.anthracis в крови (окраска по на капсулу по Романовскому-Гимза);

Б. Культура B.anthracis (окраска по Граму);

2. Культура B.anthracis (окраска на спору по Трухильо);

Г. Культура B.anthracis (окраска на спору по Мюллеру).

Рост Bacillus anhtracis на кровяном агаре. Колонии в R-форме

Рост Bacillus anhtracis на мясо-пептонной желатине.

Выявление и идентификация Bacillus anhtracis МФА

ЛИСТЕРИОЗ

Возбудитель листериоза – Listeria monocitogenes

А Б

А. L. monocytogenes в пат. материале; Б. Культура L.monocytogenes, окраска по Граму.

ВГ Д

Рост культуры Listeria monocitogenes на плотных питательных средах: В.МПА; Г.PALCAM-агаре; Д.кровяном агаре.

В. Г.

В.CAMP-тест (проявление скрытой гемолитической активности Listeria monocitogenes в виде феномена «крыла бабочки» (3). Г. Тест на выявление лецитиназой активности листерий на лецитиново-угольном агаре.

ПАСТЕРЕЛЛЁЗ

А. Б.

А.Пастереллёз -холера кур Б.Поражение лёгких при пастереллёзе

Возбудитель пастереллёза – Pasteurella multocida

В. Г.

В. Биполярно окрашенные пастереллы в крови (окраска по Михину); Г. Пастереллы в крови (окраска по Романовскому-Гимзе).

Д.Е.

Д. Pasteurella multocida, окраска по Граму (рисунок); E. Рост культуры Pasteurella multocida на кровяном агаре.

РОЖА СВИНЕЙ (Эризипелоид)

Возбудитель рожи свиней – Erysipelothrix rusyopathiae

БРУЦЕЛЛЁЗ

А.Б.

В.Г.

Д.

А.Brucella abortus в патологическом материале, окраска по Козловскому. Б.Культура Brucella melitensis, окраска по Козловскому. В. Рост Brucella sp. на плотной питательной среде. Д. Колонии Brucella sp. на плотной питательной среде.

Е. Выявление бруцелл в мазке методом флюоресцирующих антител.

СЕРОЛОГИЧЕСКАЯ ДИАГНОСТИКА БРУЦЕЛЛЁЗА

А. ПОСТАНОВКА РАЗВЕРНУТОЙ РА; Б. Постановка РБП в лунках;

СХЕМА ПОСТАНОВКИ РСК

ТУЛЯРЕМИЯ (чума зайцев)

Туляремия – антропозоонозная болезнь. Переносчиками могут быть членистоногие.

Возбудитель туляремии – Francisella tularensis

А.Б.

А. Francisella tularensis, чистая культура, окраска по Романовскому-Гимза

Б. Идентификация Francisella tularensis в мазке из патологического материала или культуры при помощи МФА.

Культуральные свойства Francisella tularensis. Рост на среде Френсиса

ТУБЕРКУЛЁЗ

Положительная туберкулиновая проба у коровы; туберкулёзное поражение лёгких;

Возбудитель туберкулёза в мазке из пат. материала. Окраска по Цилю-Нильсену.

А. Б.В.

А. Рост Micobacterium bovis на среде Петраньяни; Б. Рост микобактерий на среде Гельберга; В. Определение «Корд-фактора» патогенных микобактерий.

Колонии микобактерий на плотных питательных средах;

ПАРАТУБЕРКУЛЁЗНЫЙ ЭНТЕРИТ

Паратуберкулёз у крупного рогатого скота (истощение, хроническая диарея).

Изменения в тонком кишечнике К.Р.С. при паратуберкулёзе (складчатость)

Micobacterium paratuberculosis в мазке из патологического материала. Окраска по Цилю-Нильсену.

АНАЭРОБНЫЕ ИНФЕКЦИИ

А.Б.

В. Г.

Д.Е.

А. Cl.perfringens в патологическом материале, окраска по Граму

Б. Cl.perfringens, культура, окраска по Граму

В. Cl.chauvoei в патологическом материале, окраска по Романовскому-Гимза

Г. Cl.septicum в патологическом материале, окраска по Мюллеру

Д. Cl.nonyi в патологическом материале, окраска по Граму.

Е. Cl.tetani в патологическом материале, окраска по Мюллеру.