Цветовой показатель

1. Расчёт цветового показателя

Вычисление проводят по определенным ранее показателям эритроцитов и гемоглобина. Вычисление проводят путем деления утроенного числа гемоглобина в граммах на 1л на первые 3 цифры числа эритроцитов.

Цветовой показатель - это величина относительная и выражается в отвлеченных цифрах. В норме цветовой показатель колеблется от 0.86 до 1.2

3.Определение количества гемоглобина по методу Сали

1. Подготовить гемометр, заполнив

градуированную пробирку 0.1 н. р-ром НС1 до

метки 0.2 мл (первое кольцо).

2.Набрать кровь 0.02 мл. и выдуть в пробирку с

кислотой.

3.Оставить гемометр на 5 мин., приливать по

каплям дист. воду. Разведение проводят до

полного совпадения цвета пробирки с цветом

стандарта. Показания гемометра считают по

нижнему мениску.

Определение гемоглобина проводят колориметрическим методом, т.е. путём сравнения цвета исследуемого и стандартного растворов. Для выражения концентрации в единицах международной системы (СИ), нужно количество гемоглобина в г/% умножить на 10.

4. Подсчет

количества

эритроцитов в крови

человека

1. Подготовить камеру.

2. Набрать кровь в капилляр до метки 0,5, затем 3% NaCl до метки 101 (разв. в 200 раз). 3. Заполнить камеру, считать под малым увеличением микроскопа. 4.3ная объем камеры и разведение крови, высчитывают кол-во эритроцитов по формуле: (А*4000*200)/80 = в 1 мкл и 1л крови.

Правильное заполнение счетной камеры разведённой кровью обеспечивает точность подсчета форменных элементов. Подсчёт эритроцитов проводят в 5 больших квадратах, разграфленных на 16 маленьких и расположенных по диагонали, учитывая правило Егорова. Для того чтобы определить содержание эритроцитов в 1 л крови, нужно число эритроцитов, выраженное в миллионах, умножить на 10

5.Определение

концентрации

лейкоцитов

1. Подготовить камеру Горяева.

2. Набрать кровь в капилляр, развести 3% р-ром уксусной кислоты.

3. Заполнить камеру разведённой кровью, считать под малым увеличением (об. 8, ок. 10 или 15).

4. Зная объем камеры и разведение крови, высчитывают кол-во форменных элементом в 1 л крови

Ах4000х20

Х= = Ах50

1600 (400)

Подсчет проводят в 100 больших неразграфленных квадратах сетки Горячева, расположенных по четыре, учитывая, правило Егорова. Для определения кол-ва лейкоцитов в 1мкл крови необходимо число, полученное при подсчёте, умножить на 50. Для пересчёта на 1 л крови число лейкоцитов, выраженное в тысячах, умножить на 10⁶.

6.Определение

СОЭ

методом

Панченкова

1.Подготовить капилляр, промыть цитратом

2.На часовое стекло нанести р-р цитрата, отмеренного капилляром (половина метки «Р»).

З.Набрать кровь до метки «К».

4.Перемешать кровь с цитратом, набрать до отметки «О» и поставить на час в штатив.

Величина СОЭ зависит от содержания глобулинов и особенно фибриногена. Взять точное соотношение крови и реактива. Определить СОЭ после часа стояния по высоте верхнего прозрачного слоя. Определяйте СОЭ при температуре 18-20 градусов.

Определение

объёмного

соотношения

плазмы

и

форменных

элементов крови

Промыть капилляр центрифуги. Шкляра цитратом, набрать кровь в капилляр и центрифугировать в течении 1 мин.

Вычисление объёмного соотношения проводится по шкале капилляра: по краям форменные элементы, в центре - плазма. Найденные величины выражают в %.

8. Определение

времени

свертывания

крови (метод

Сухарева,

Бюркера и

Дьюка).

Метод Сухарева: 1. Кровь в кол-ве 25-30 мл набирают в капилляр от аппарата Панченкова и переводят в середину капиллярной трубки. 2.Включают секундомер и через каждые 20 сек. наклоняют капилляр вправо, влево, под углом 30-40 градусов. 3. Определяют начало и конец свёртывания, с замедления движения и до полной остановки в капилляре.

Метод Бюркера: Каплю крови берут на предметное стекло и углом другого предметного стекла приподнимают каплю крови. Определяют время свёртывания от начала появления нитей до конца образования сгустка.

По Дьюку: Проколоть палец, ватным тампоном вытирают каплю крови через каждые 30 сек. До прекращения кровотечения. Определить время свёртывания.

Время свёртывания даёт общие представления о внутреннем механизме мерной фазы процесса свёртывания, выражается в мин. В норме начало - от 30 сек. до 2 мин., конец свёртывания - от 3 мин. до 5мин.

Удлинение времени свёртывания крови до 15мин. и более наблюдается при тяжёлой недостаточности факторов, участвующих во внутреннем пути образования протромбиназы, дефиците протромбина и фибриногена, а также при наличии в крови ингибиторов свёртывания, в частности гепарина.

Метод Дьюка позволяет судить о сосудисто-тромбоцитарном гемостазе (первичном), т.к. протекает в сосудах микроциркуляторного русла(капиллярах).

9. Определение группы крови по системе АВ0 при помощи цоликлонов анти-А и анти-В

В две ячейки белой пластины вносят по капле исследуемой крови, затем в одну вносят цоликлон анти-А, в другую – анти-В (соотношение 1: 10), планшет покачивают и наблюдают за агглютинацией.

Цоликлоны анти-А и анти-В содержат антитела к агглютиногенам А и В соответственно, значит, если агглютинация произошла с цоликлоном анти-А то это II(А) группа, если с анти-В, это III(В), если агглютинация не произошла – это I(0) группа, если произошла в обоих случаях – это IV (АВ) группа крови.

10. Определение резус-фактора

В ячейку белой пластины внести каплю крови и цоликлон

анти-D.

Если агглютинация произошла, то резус положительный, если нет – отрицательный.

Определение осмотической

резистентности эритроцитов.

1. Приготовить в 8-ми пробирках 5 мл р-ра NaCl различной концентрации (0.9 - 0.2%).

2. В каждую пробирку пипеткой ввести по 3 капли дефибринированной крови.

3. Оставить на 1 час. 4. По цвету р-ра и его прозрачности определяют осмотическую стойкость.

Осмотическая резистентность - это устойчивость эритроцитов по отношению к гипотоническим р-рам солей. При помещении эритроцитов в р-р с концентрацией ниже 0.85 - 0.9% они набухают, в большей - сморщиваются. На этих свойствах основано определение осмотической резистентности. Степень гемолиза определяется в гипотонических растворах.

12.Подсчёт

лейкоцитарной

формулы

1. Окрашенный мазок микроскопируют с иммерсионной системой. Используют окуляр 7 или 10 и об. 90 (конденсор поднят, диафрагма открыта).

2. На мазок наносят каплю иммерсионного масла.

3. Считают все встречающиеся лейкоциты, дифференцируя их по видам.

Всего считают 200 клеток, подсчитывают каждый вид и делят на 2, чтобы получить процентное соотношение

Лейкоциты располагаются о мазке неравномерно: более тяжёлые (эозинофилы, моноциты) встречаются чаше по краю мазка, а более лёгкие (лимфоциты) в середине, поэтому счёт ведут по всему мазку в тонкой его части по методу зигзага, где хорошо просматривается структура клеток.