1. Основные принципы выделения чистых культур микробов, культивируемых на искусственных питательных средах. Этапы выделения чистых культур этих микроорганизмов.

Чистой культурой называется популяция микроорганизмов одного вида, выращенная на питательной среде.

Методы получения чистых культур:

1.из колонии (изолированное скопление микроорганизмов одного вида, выросших на питательной среде в результате размножения одной или нескольких клеток) – механическое разобщение бактериальных клеток

• посев петлёй, штрихом по Коху; посев шпателем, газоном по Дригалю; посев осаждением по Коху; посев разбрызгиванием; посев перемешиванием в расплавленном и остуженном студне

2.путём подавления роста «лишних» микробов

• на избирательных средах; после прогревания; после обработки кислотой; после антибиотиков; использование фагов; после проведения через живой организм

Этапы:

1.Исследование материала

забор, регистрация

ориентировочная микроскопия с окраской мазка.

посев смеси бактерий на пластинчатый агар

2.Изучение колоний

изучение культуральных свойств (величина, форма, консистенция, поверхность, край, наличие пигмента, цвет, прозрачность)

микроскопия с окраской .

посев колонии на скошенный агар.

3.Изучение чистой культуры

микроскопия с окраской – морфологически и тинкториально однородные клетки

идентификация

биохимическая – посев в «пёстрый» ряд

фагоидентификация

сероидентификация

Микробиологический метод включает в себя выделение чистой культуры и её идентификацию.

2. Механизмы развития гнт как проявления иммунопатологии. Комплемент-зависимый (цитотоксический) механизм аллергии.

Аллергическая реакция II типа – цитотоксический тип. Реализуется с участием антител IgG.

Антигены:

-компоненты клеточной мембраны

-неклеточные антигены,вторично фиксированные на поверхности клеток организма

-неклеточные стуктуры тканей

Образующиеся при контакте с АГ АТ фиксируются на цитолемме,вызывая ее повреждение и разрушение.(гемолитическая анемия).

В случае фиксации на неповрежденных клетках такней организма чужеродных АГ и гаптенов к последним вырабатываются антитела, образующие комплекс с АГ. При этом нейтрализуется не только чужеродный агент, но повреждается,а нередко и лизируется нормальная клетка организма.(миокардит, эндокарлит, энцефалит).

При появлении АГ на неклеточных структурах, например на базальных мембранах клубочков почек, их канальцев, сосудов, образующиеся при этом АТ взаимодействуют с АГ, повреждая,как саму мембрану, так и расположенные на ней клетки(инфекционно-аллергические нефриты и гепатиты)

Билет №39

1. Принципы классификации вирусов. Типы и фазы взаимодействия вируса с клеткой - хозяином.

лишенные автономного генетического аппарата, неклеточные микроорганизмы, не растут на искусственных питательных средах, т.к. не имеют собственных метаболических систем, для размножения используют рибосомы клетки хозяина, содержат только один тип нуклеиновой к-ты , упакованной в белковую оболочку – капсид (некоторые могут иметь внешнюю оболочку – суперкапсид). Абсолютные внутриклеточные паразиты. Внеклеточная форма существования называется вирионом. Могут иметь палочковидную, цилиндрическую, нитевидную, сферическую, кубовидную форму и величину: самые мелкие ви­русы близки к размерам крупных белковых молекул, самые крупные — мельчайшим бактериям

Капсид – специальный симметричный футляр, в который «упакован» генетический материал вирусов; состоит из структурных белковых субъединиц— капсомеров, уложенных в виде спирали вокруг осей симметрии (палочко- и нитевидые) либо по осям симметрии икосаэдра (сферические). Основные ф-ии капсида - обеспечивают защиту нуклеиновой кислоты, а также адсорбцию вириона на поверхности клетки хозяина, проникновение его в клетку путем взаимодействия с клеточными рецепторами.

Суперкапсид – особая оболочка поверх капсида, организованная двойным слоем липидов и специфичными вирусными белками, наиболее часто образующими выросты-шипы, пронизывающие липидный бислой. Образование суперкапсида происходит на поздних этапах репродуктивного цикла, обычно при отпочковывании дочерних популяций.

ДНК содержащие (20% всех инфекций):

Двухцепочные двухнитевая: Poxviridae (натуральная оспа), Herpetoviridae (ветрянка, цитомегаловирус, герпес инфекция), Adenoviridae (орви, диарея, коньюктивиты, опухолевые заболевания), Papovaviridae (возб. Бородавок, папиллом).

Одноцепочные однонитевая: Parvoviridae (инфекционная эритема, хронич. Гемолитическая анемия),

Двухцепочные одна нить укорочена: Hepadnaviridae (возб. Гепатита В).

РНК содержащие (80% всех инфекций):

РНК однонитевая геном образован РНК+или РНК-:, Paramyxoviridae (РНК- корь, паротит, ОРВИ), Picornaviridae (РНК+ полиомиелит, гепатит А, ЕСНО), Togaviridae (РНК+ клещевые энцефалиты, краснуха, гепатит Д) Rhabdoviridae (РНК- бешенство), Arenaviridae (РНК- лимфоцитарный хориоменингит), Coronaviridae (РНК+ ОРВИ, атипичная пневмония), Bunyaviridae (РНК- геморрагическая лихорадка с поченым синдромом),

Caliciviridae (РНК+ гастроэнтерит, гепатит Е),

РНК двухнитевая двухцепочная сегментированная: Reoviridae (РНК- ОРВИ, гастроэнтериты)

РНК однонитевая сегментированная: Orthomyxoviridae (РНК- грипп), Retroviridae (РНК+ иммунодефицит, ВИЧ).

Фазы:

1.Адсорбция. Взаимодействие рецепторов вириона и клетки. У клеток это липо- и мукопротеиды оболочек.

2.Проникновение вириона в клетку хозяина. 2 ВАРИАНТА: 1- ЗА СЧЕТ ФЕРМЕНТОВ, ВХОДЯЩИХ В СОСТАВ капсида (нейраминидаза), 2- клетка сама фагоцитирует вирус. В клетке хозяина высвобождается нуклеиновая кислота и происходит реализация генетической информации.

3. репродукция вируса. РНК-вирусы репродуцируются в цитоплазме клеток на матричной РНК, ДНК-вирусы репродуцируются в ядре клетки. вирусные белки синтезируются на матричной РНК в цитоплазме клетки хозяина. Затем происходит сборка вируснх частиц.

4. выход вируса из клетки. 2 варианта: 1- с разрушением клетки; 2- путем отпочковывания от клетки хозяина. При этом наблюдают 2 феномена: цпд+ и ЦПД-, кот. Заключаются в разрушении клеток или их сохранении. Регистрируется ЦПД при микроскопическом исследовании культуры клеток.

Типы:

1.Продуктивная инфекция – образование новых вирионов.

2.Абортивная инфекция.

3.Вирогения – встраивание вирусной НК в ДНК клетки, которая обеспечивает синхронность репликации вирусной и клеточной ДНК.