2. Сущность и компоненты серологических реакций. Специфическая и неспецифическая фазы серологических реакций.

Реакции антиген—антитело

Особенности взаимодействия антитела с антигеном являются основой диагностических реакции в лабораториях. Реакция in vitro междy антигеном и антителом состоит из специ­фической и неспецифической фазы.

В специ­фическую фазу происходит быстрое специфи­ческое связывание активного центра антитела с детерминантой антигена. Затем наступает неспецифическая фаза — более медленная, ко­торая проявляется видимыми физическими явлениями, например образованием хлопьев (феномен агглютинации) или преципитата в виде помутнения. Эта фаза требует наличия определенных условий (электролитов, оптимального рН среды).

Иммунные реакции используют при диа­логических и иммунологических исследоиниях у больных и здоровых людей. С этой целью применяют серологические методы (от т. mm — сыворотка и logos — учение), т. е. методы изучения антител и антигенов с помо­щью реакций антиген—антитело, определяе­мых в сыворотке крови и других жидкостях, а ше тканях организма.

Обнаружение в сыворотке крови больного антител против антигенов возбудите­ля позволяет поставить диагноз болезни. Серологические исследования применяют также для идентификации антигенов микробов, различных биологически активных ве­ществ, групп крови, тканевых и опухолевых антигенов, иммунных комплексов, рецепторов клеток и др.

При выделении микроба от больного про­водят идентификацию возбудителя путем изучения его антигенных свойств с помощью иммунных диагностических сывороток, т. е. сывороток крови гипериммунизированных животных, содержащих специфические ан­титела. Это так называемая серологическая идентификация микроорганизмов.

В микробиологии и иммунологии широко применяются реакции агглютинации, преци­питации, нейтрализации, реакции с участи­ем комплемента, с использованием меченых антител и антигенов (радиоиммунологичес­кий, иммуноферментный, иммунофлюоресцентный методы). Перечисленные реакции различаются по регистрируемому эффекту и технике постановки, однако, все они основаны на реакции взаимодействия антигена с антителом и применяются для выявления как антител, так и антигенов. Реакции иммуните­та характеризуются высокой чувствительнос­тью и специфичностью.

Билет №34

1. Микрофлора почвы. Источники и пути попадания патогенных микробов в почву. Санитарно- показательные микробы почвы. Методы санитарно-бактериологической оценки почвы.

Содержание микробов в почве широко колеблется в зависимости от её химического состава, влажности, температуры, pH и других свойств. В бедных влагой и питательными веществами песчаных почвах находится до 10 в 5степени, в обрабатываемых образцах – до 10 в 8– 10 в 9 микробов в 1 г. «Живая» масса разных микроорганизмов на 1 га почвы в среднем составляет 1 т. Наибольшее количество отмечается в верхнем слое почвы на глубине 5 – 15 см, затем их число снижается. Почва населена разнообразными микроорганизмами. Среди них имеются свободноживущие азотфиксирующие бактерии рода Azotobacter, некоторые виды родов Nocardia и Clostridium, клубеньковые бактерии рода и грибы, аммонифицирующие бактерии, а также разнообразные серо- и железобактерии и др. В почве, богатой органическими остатками, большое количество гнилостных анаэробных и аэробных бактерий, актиномицетов, грибов и простейших. Патогенные и условно-патогенные микроорганизмы могут попадать в почву с отбросами и трупами животных и человека, погибших от инфекционных и других заболеваний, а также с их испражнениями, мочой и прочими выделениями. Санитарно-гигиеническое состояние почвы оценивается на основании показателей, указывающих на количественное содержание термофильных бактерий (спорообразующие грамположительные бактерии и актиномицеты) и степень её фекального загрязнения. В качестве показателей фекального загрязнения используют санитарно-показательные бактерии (представители нормальной микрофлоры кишечника). Разные сроки выживаемости этих бактерий в окружающей среде позволяют определить давность её загрязнения фекалиями. Наличие в почве E. coli и Str. faecalis свидетельствует о свежем фекальном загрязнении, а Clostridium perfringens – как давнее загрязнение. Резкое увеличение количества термофильных бактерий может свидетельствовать о загрязнении почвы разлагающихся отбросах.

Для санитарно-бактериологической оценки почвы определяют микробное число (общее количество микроорганизмов, содержащихся в 1 г почвы), коли-титр (титр –наименьшее колличество почвы в гр в котором. содержится ), перфингенс-титр и титр термофильных бактерий почвы. Санитарно-показательные микробы: кишечная палочка, палочка перфрингенс, протей, энтерококк.

2.Сероидентификация.Сеоиндикация. Серодиагностика.

Одним из проявлений реакции иммунной системы на АГ,попавший в орг-м ,служит синтез Ig или АТ.

Серологические р-ии – взаимодействие АГ+АТ. Серологические р-и применяют в 2-х направлениях:

Серодиагностика. Обнаружение АТ в сыворотке крови больного. Неизвестный компонент –АТ. Реакция ставится с известным АГ. Серодиагностика используется в серологическом методе лаб. диагностики. В качестве АГ используют диагностикум (стабильная взвесь убитых микробов). Положительный результат свидетельствует о наличие в крови больного специфических АТ.

Более достоверные результаты получают при определении титра АТ в « парных сыворотках» больных, т.е. определ-т АТ в первые дни болезни и ч/з 7-10 дней. Динамика нарастания титра АТ указывает на развитие заболевания.( при вирусных заб-ях 4-хкратное и более увеличение титра АТ имеет диагностическое значение).

Сероидентификация. Определение родовой ,видовой ,типовой принадлежности микроба( вируса). Используется в биологическом методе лаб. диагностики. Неизвестный компонент –АГ. Постановка реакции с заведомо известными иммунными сыворотками, которые получают путем длительногоиммунизирования животных соответствующим АГ. Иммун. сыворотки содержат высокий ур-нь АТ- диагностические сыворотки. Их титруют. Титр сыворотки – max ее разведение, дающее положительный результат.Реакция считается положительной, если она прошла в титре или в половине титра.

Для серолог. идетификации микробов(вирусов) выпускают нативные(неадсорбир.) и адсорбированные сыворотки. Неадсорбированные:*высокий титр,*не свободны от АТ к микробам,им-их общие АГ в пределах группы ,рода ,сем-ва. В результ-те чего они дают групповые р-ии.* подлежат к разведению. Адсорбированные: * строгая специфичность, *низкий титр,* применюят в р-ии агглютинации на стекле. *не разводят.*получают из неадсорбир-ых сывороток методом истощения по Кастеллани.

Диагностика вирус инфекций. В кач-ве АГ использ. аллантоисную,амниотич. жид-ть,суспензии хорион-аллантоис. оболочек и желточных мешочков куриных эмбрионов,гомогенаты из орг-овжив.,зараженных определенными вирусами. «+» результат р-ии – взаимодействик возбудителя сооьветствующ. инфекц. заб-я в виде чистой культуры со специфич. сывороткой.

Сероиндикация. В кач-ве АГ использ-ся не чистая культура микроба,а исследуемый материал от больного , в котором определяют АГ.

Основные фазы серологических реакций.

Специфическая ф.-хар-ся соединением детерминированных групп АГ с активным центром АТ. В резуль-те такого соединения образуется компоекс,не р-римый в изотонич. р-ре NaCl.

Неспецифическая фаза- образование макроконгломератов, выпадающих в осадок.

Билет №35