5 Список используемых источников

1. Биохимия: Практикум.–К.:Выща шк.Изд–во при Киев. ун–те,1988. – 128с.

2. Бышевский А.Ш., Терсенов О.А. Биохимия для врача.–Екатеринбург: Издательско–полиграфическое предприятие "Уральский рабочий",1994.–384с.

3. Добрынина В.Н., Свешникова Е.Я.Руководство к практическим занятиям по биологической химии.– М.: Медицина,1967.–343с.

4. Кретович В.Л.Биохимия растений.–М.:Высш.шк.,1986.–503с.

5. Лебедева П.Т.,Усович А.Т. Методы исследования кормов, органов и тканей животных.– М.: Россельхозиздат,1965.–711 с.

6. Лабораторные методы исследования в клинике: Справочник.–М.: Медицина,1987.– 368 с.

7. Марри Р.,Греннер Д.,Мейес П., Родуэлл В. Биохимия человека; В 2–х т.–М.: Мир,1993.

8. Мелентьева Г.А.Фармацевтическая химия.т.II.–М.:Медицина,1976.–827 с.

9. Методы анализа пищевых, сельскохозяйственных продуктов и медицинских препаратов.– М.:Пищевая промышленность,1974.–743 с.

10. Петров К.П. Практикум по биохимии пищевого сырья растительного происхождения.– М.: Пищевая промышленность,1965.–300 с.

11. Плешков Б.П. Практикум по биохимии растений.–М.:Агропромиздат,1985.–255 с.

12. Практикум по биохимии сельскохозяйственных животных.– М: Высш. школа,1980.–303 с.

13. Пустовалова Л.М. Практикум по биохимии – Ростов на Дону:Изд–во"Феникс", 1999.–544 с.

14. Руководство к лабораторным занятиям по биологической химии. М.: Медицина,1976.–294 с.

15. Справочник биохимика.– М.: Мир,1991.–554 с.

16. Филлипович Ю.Б., Основы биохимии: Учеб. для хим. и биолог. спец. пед. ун–тов и ин–тов.– 4–е изд., перераб. и доп.– М.: изд–во "Агар", 1999.–512с.

17. Шапиро Д.К. Практикум по биологической химии.– Мн.: Вышэйш. школа,1976.–288 с

18.Березов Т.Т., Коровкин Б.Ф. Биологическая химия: Учебник.– 3-е изд., перераб. и доп. – М.: Медицина, 1998.– 704 с. ил

Приложение а

(справочное)

Значение стандартных окислительно- - восстановительных потенциалов

Таблица А1- Значение стандартных окислительно-восстановитель-ных потенциалов (в вольтах, концентрации компонентов 1 М, рН=7, t 25⁰С )

Восстановленная форма	Окислен-ная форма	Полуреакция	Е0, В
НАДН + Н+	НАД+	НАД++2Н++ 2е-НАДН+Н+	-0,32
НАДФН+ Н+	НАДФ+	НАДФ++2Н++2е-НАДФН+Н+	- 0,325
ФАДН 2	ФАД+	ФАД++2Н++ 2е-ФАДН2	- 0,05
С6Н8О6 (аскорби- новая к-та	С6Н8О6	С6Н8О6+ 2Н+ + 2е -С6Н8О6	+0,17(1)
Сuo	Сu+2	Сu+2 + 2å- Сuo	+0,34(2)
Сuo	Сu+1	Сu+1 + 1å- Сuo	+0,52(3)
Н2О	Ѕ О2	Ѕ О2+2Н++ 2е-Н2О	+0,82(4)

Приложение в

(справочное)

Методика приготовления реактивов

0. Фосфорнокислые соли, раствор. 6 г Na₂НРО₄2Н₂О смешивают с 2 г КН₂РО₄Н₂О в 1 л воды.

1. Фосфатный буфер, рН 7,5. Готовят растворы А и Б. Приготовление раствора А: 1/15 М КН₂РО₄(9,078 г/л). Приготовление раствора Б: Nа₂НРО₄2 Н₂О (11,876 г/л). Для приготовления фосфатного буфера рН 7,5 смешивают 130 мл раствора А и 870 мл раствора Б.

2. Экстракт мышечной ткани. 300 мг мышечной ткани экстрагируют в фарфоровой ступке с 20 - кратным объемом дистиллированной воды. Смеси фильтруют через марлю и экстракцию повторяют еще 2 раза. Отмытая от редуцирующих веществ мышечная кашица содержит сукцинатдегидрогеназу, и некоторые другие ферменты ( цитохром, цитохромоксидазу прочно связанные с клеточной структурой.

3. Фосфатный буфер, рН 7,4. Готовят растворы А и Б. Приготовление раствора А: 1/15 М КН₂РО₄(9,078 г/л). Приготовление раствора Б: Nа₂НРО₄2 Н₂О (11,876 г/л). Для приготовления фосфатного буфера рН 7,4 смешивают 192 мл раствора А и 808 мл раствора Б.

4. Раствор фермента. 250 мкг глюкозооксидазы из плесневого гриба и 41,7 мкг пероксидазы из корней хрена растворяют в 10 мл 0,1 М Nа-фосфатного буфера, рН 7,0.

5. Раствор 3. Один объем раствора 2 осторожно прибавляют по капле при интенсивном перемешивании к 100 объемам раствора 1.

6. Кровь дифибринированная или вытяжка из моркови (картофеля). Морковь натирают на терке, берут 4 г, растирают с битым стеклом в ступке, добавляя 4-6 мл 0,05 % - ного раствора углекислого натрия. Растертую массу переносят в мерную колбу на 100 мл и доводят до метки раствором Nа₂СО₃. Смесь настаивают 30 - 60 мин. и фильтруют.

7. Вытяжка из муки или другого растительного материала. На аналитических весах отвешивают по разности в мерную колбу (вместимостью 50 мл) 2 г муки или хорошо измельченного растительного продукта. В колбу приливают дистиллированную воду, содержимое ее хорошо перемешивают, добавляют 2-3 капли толуола, доводят водой до метки и смесь настаивают 2 ч при комнатной температуре. Затем жидкость отфильтровывают через сухой складчатый фильтр или центрифугируют. В фильтрате или центрифугате тот час же определяют каталазу.

8. Экстракт из хрена или вытяжка из мяса; 100 г свежих корней хрена натирают на терке, заливают 100 мл 0,05 % - ного раствора Nа₂СО₃и через 2 -3 часа фильтруют. Вытяжка из мяса. 10 г фарша свежего мяса заливают 40 мл дистиллированной воды, настаивают 10 мин. и фильтруют.

9. Ферментный раствор. 100 г свежих корней хрена натирают на терке, заливают 100 мл 0,05 % - ного раствора Nа₂СО₃и через 2 -3 часа фильтруют. Фильтрат является источником пероксидазы.

10. Фосфатный буфер с рН 7,3 - 7,4. Готовят растворы А и Б. Приготовление раствора А: 1/15 М КН₂РО₄(9,078 г/л). Приготовление раствора Б: Nа₂НРО₄2 Н₂О (11,876 г/л). Для приготовления фосфатного буфера рН 7,3 - 7,4 смешивают 192 мл раствора А и 808 мл раствора Б.

11. Ацетатный буфер, 0,3 М раствор, рН 4,7. Состоит из двух растворов в соотношении 1:1: 0,3 М раствор уксусной кислоты и 0,3 М раствор уксуснокислого натрия.

12. Крахмал, индикаторный раствор. 1 г. растворимого крахмала размешивают с 10 мл холодной воды и постепенно вливают в 90 мл кипящего насыщенного раствора хлорида натрия, нагревают до кипения и охлаждают.

ФЕРМЕНТЫ ОКСИДОРЕДУКТАЗЫ