Выделение культур с. Botulinum

К посеву исследуемый материал эмульгируют в фарфоровую ступку как выше указано. По 10 мл материала сеют в 4 флакона с 75-150 мл свижорегенерованого жидкой среды (Китт-Тароцци, Хоттингера, казеиново-грибного). Два флакона прогревают: один при 60 ° С в течение 15 мин (для селекции С. botulinum типа Е), второй - 20 мин при 80 ° С. Два флакона инкубируют при 28 ° С (для типов Е и F) остальные - при 35 ° С в анаеростати или под слоем вазелинового масла толщиной 0,5 см. На 2, 4, 6 и 10-й день с флаконов, где есть рост , изготовляют мазки, окрашивают по Граму и микроскопируют. Возбудитель ботулизма имеет вид крупных грамположительных палочек с овальной субтерминальною спорой, напоминающие теннисные ракетки. Чтобы определить тип ботулотоксина из флакона отбирают 10-15 мл культуральной жидкости, центрифугируют ее и ставят реакцию нейтрализации на белых мышах или РНГА с типичными ботулиновым сыворотками, как выше описано. Для получения изолированных колоний с целью выделения чистой культуры каплю культуральной жидкости из флакона вносят на поверхность анаэробного кровяного или печеночного агара и втирают стеклянной шпателем в агар последовательно в трех чашках. Посевы выращивают в анаеростатах. Через 48 ч инкубации изучают характер колоний. На кровяном агаре колонии могут быть неправильной формы с фестончатыми краями, или гладкие, круглые, с зонами гемолиза вокруг них. Различные типы С. botulinum могут образовывать неодинаковы колонии. При посеве уколом в высокий столбик сахарного агара колонии имеют вид чечевичок или жмуточкив ваты. После микроскопирования типичных колоний их отсеивают на среду Китт-Тароцци, получают чистую культуру и идентифицируют ее по морфологическим, культуральным, токсигенными и биохимическими свойствами путем посева в среде Гисса. Палочки ботулизма ферментируют глюкозу, галактозу, глицерин, мальтозу, сахарозу, фруктозу до кислоты и газа, разжижают желатин, выделяют H2S, не образуют индол. Для дифференциации С botulinum от других анаэробов используют и другие тесты. Определение сероваров возбудителя ботулизма осуществляют с помощью реакции нейтрализации токсина in vivo, методом ИФА или в РНГА. Методика выделения С. perfingens при пищевых отравлениях изложена в разделе анаэробной газовой инфекции.

Профилактика и лечение

Вакцинопрофилактика не проводится. Для лечения используют противоботулиническую поливалентную сыворотку, поскольку антитела к одному серовару токсина не нейтрализуют другие серовары. Эту сыворотку вводят и с целью поздней профилактики лицам, подозреваемым в употреблении зараженных продуктов.