2.3.Подготовка посуды и материалов для микробиологических исследования посуды

1.чашка петрия

2.пробирки.

3.колбы

4.мерныая посуда

5.пипетки

6.стекляные поплавки

инвентарь :

1.микробиологические петли и иглы

2.штативы,пинцеты, латки и др.

Порядок обработки посуды

1.убивка (дрожжи, плесень) 160 С в течении 1 часа

2.мойка (сильно загрязненную посуду обрабатывают хромовой смесью, которая растворяет все органические вещества, кипятят в 1-2% HCl и спецсредствами например"Марс"

3.Опаласкивание водой и дистиллированной водой

4.Сушка.

5. Подготовка. (упаковывание в пергамент)

6.стерелизация в сушильном шкафу 180 С 1 час

7.хранение в специальном шкафу. (не более 12 дней)

Питательные среды и их значения

1.покупают в торговой сети в сухом виде и не с истёкший срок в хранении

назначение питательных сред

1.культивирование чистых культур микроорганизмов

2.колличественный учёт

3.выделение отдельных видов микроорганизмов.

технология приготовления среды (среда + дистиллированная вода + кипячение до полного растворения +фильтрация + разлив по пробиркам + стерилизация 121 С 20 минут

для микробиологических исследовании применяют следующие среды

-Кеслер (БГКП)

-Сабуро(дрожжи и плесень)

-физиологический раствор (6,5% NaCl в воде)

среда КМАФАМ

-Стерилизованное обезжиренное молоко

-Гидролизованое молоко и среды на его основе.

2.4.Приготовление питательных сред и их стерилизация

Питательные среды для микробиологической лаборатории завода приобретают в товарной сети в виде сухих порошков стандартизованного состава. Их приготавливают в соответствие с указаниями указателя на этикетке. При использовании сред строго соблюдают сроки хранения.

Вновь приобретаемая партия сред проходит микробиологический контроль на предприятии: культивирование чистых культур микроорганизмов; количественный учет микроорганизмов; выделение определенных видов микроорганизмов.

Сухие питательные среды хранят в герметично закрытыми в темном месте. Комкование, увлажнение, изменение цвета указывает на испорченность среды.

Общая технология питательных сред: В навеску среды в определенном количестве засыпают в колбу с холодной дистиллированной водой. Смесь перемешивают, затем в автоклаве нагревают до кипения. Кипятят до полного растворения, фильтруют, разливают по пробиркам и стерилизуют.

Режим стерилизации:

• Температура 121°С,

• Время выдержки 20 минут.

Температура и время автокланирования определяется составом среды.

Молоко, дрожжевой автолизат, желатин, стерилизуют при температуре 112-115°С в течение 15 минут. Среды, содержащие сахара и витамины стерилизуют при температуре 112-115°С, но с выдержкой 20-30 минут. Остальные среды при 120°С.

Питательные среды. Приготовление, значение, стерилизация. Питательные среды для микробиологической лаборатории завода приобретают в торговой сети. В виде сухих порошков. При использовании строго соблюдается срок её хранения. Значения питательных сред: - культивирование чистых культур, микроорганизмов; - количественный учёт микроорганизмов; - выделение определенных видов микроорганизмов. Общая технология приготовления питательной среды: Навеску среды в определенном количестве засыпают в колбу с холодной дистиллированной водой, смесь перемешивают, затем в автоклаве нагревают до кипения. Кипятят до полного растворения, фильтруют, разливают по пробиркам и стерилизуют. Режим стерилизации при t=1210C в течении 20 мин. Существуют различные способы стерилизации лабораторного оборудования и питательных сред.

Автоклонирование. Автоклав: 1)112-115 15 мин 2)120-121 20 мин Молоко, питательные среды, растворы витаминов, углеводов Прокаливание на огне Стерилизация над пламенем Негорючие теплоустойчивые предметы(петли, иглы) Фламбирование При помощи ваты, смоченной спиртом Поверхность посуды, инструментов, оборудования Стерилизация УФ-облучениями Бактерицидные лампы Воздух помещений Стерилизация текучим паром Автоклав, нагрев до 1000С в течении 30 мин Молоко, питательные среды Приготовление питательных сред А) Гидролизация молока и способ его приготовления: обезжиренное молоко стерилизуют при температуре 1210С с выдержкой 10- 15 мин., охлаждают до 450С. Устанавливают рН от 7,6- 7,8 ед. К 1 литру молока добавляют от 0,5 до 1 г.панкреатина, предварительно растворив в теплой воде. Вносят 5 мл. хлороформа, закупоривают, тщательно перемешивают и термостатируют при температуре 400С с выдержкой 18- 24 часа. Полученную прозрачную жидкость фильтруют через бумажный фильтр. Фильтрат разводят водой в 2 раза и устанавливают рН от 7 до 7,2 ед.и снова стерилизуют при температуре 1210С в течении 15 мин. Б) Агар с гидролизованным молоком: к гидролизованному молоку добавляют 1,5% агара, смесь расплавляют в автоклаве при 1000С, фильтруют, разливают в пробирки, стерилизуют при 1210С в течении 10 мин. В) Стерилизованное обезжиренное молоко: обезжиренное молоко получают при сепарировании или при восстановлении сухого обезжиренного молока, разливают в пробирки и стерилизуют 1210С в течении 15 мин. Г) Сабуро: к литру дистиллированной воды добавляют 18г. агара и оставляют на 30 мин. для набухания. Добавляют 40г. Глюкозы и 10г. Пептона. Расплавляют среду, поднимая температуру до 1200С без выдержки. Среду фильтруют, разливают, стерилизуют при 1150С в течении 15 мин. После расплавления на 1л. Среды вносят 50000 МЕ пенициллина и 40г. стрептомицина.