Работа 15. Влияние активаторов и ингибиторов на активность ферментов

Значительное влияние на активность ферментов оказывает присутствие в тканях ряда химических соединений. Одни из них повышают активность энзимов (активаторы), другие - подавляют ферментативную реакцию (ингибиторы или парализаторы). Так, например, ферментативная активность амилазы слюны повышается под влиянием хлорида натрия, панкреатической липазы - желчных кислот, пепсина - соляной кислоты и т.д. Из ингибиторов ферментов известны цианид-ионы (для некоторых "геминовых" ферментов), фосфоорганические соединения (для эстераз), ионы тяжелых металлов – Cu²⁺,Ag⁺,Hg²⁺,Pb²⁺- (для большинства ферментов) и другие. Указанные действия активаторов и парализаторов связаны в основном с влиянием этих веществ на структуру активного центра ферментов, что ведет к изменению способности ферментов связывать субстрат (образовывать фермент-субстратные комплексы). Влияние активаторов и ингибиторов на активность ферментов удобно наблюдать на примере амилазы слюны, которая активируется хлоридом натрия и ингибируется сульфатом меди (II).

Ход работы.В 3 пробирки с 10 каплями разведенной в 5 раз слюны прибавляют: в первую - 8 капель воды и 2 капли 1% раствора хлорида натрия, во вторую - 10 капель воды, в третью - 8 капель воды и 2 капли 1% раствора сульфата меди (II). Содержимое перемешивают, прибавляют во все пробирки по 5 капель 0,5% раствора крахмала и оставляют при комнатной температуре. Через каждые 5 минут (3 раза) в заранее приготовленные 3 пробирки с 2 мл воды, подкрашенной 2 каплями 0,1% раствора иода, отбирают по 2-3 кайли содержимого каждой из опытных пробирок. Наблюдают различия характера окраски в исследуемых случаях. Делают вывод об активности фермента в присутствии хлорида натрия и сульфата меди (II).