- •1. Понятие об инфекционном процессе. Механизмы, пути и факторы передачи
- •3.Понятие о патогенности микробов. Вирулентность. Факторы патогенности. Адгезия, колонизация и инвазия. Определение ферментов патогенности (лецитиназы, плазмокоагулазы, гиалуронидазы и гемолизина).
- •4. Экзотоксины бактерий, их свойства, классификация, механизм действия, получение и применение.
- •5. Эндотоксины, химический состав, свойства, механизм действия. Отличия экзо- и эндотоксинов.
- •6. Экспериментальная инфекция. Цели и способы заражения животных. Этика экспериментальных исследований.
- •7. Понятие о факторах неспецифической резистентности организма. Внешние и внутренние барьеры, клеточные и гуморальные факторы.
- •8. Фагоцитоз. Клетки, участующие в фагоцитозе. Стадии и виды фагоцитоза. Кислород-
- •9. Гуморальные факторы резистентности. Лизоцим, нормальные антитела, белки острой фазы.
- •10. Комплемент, понятие, роль в реакциях неспецифической резистентности, механизм действия. Классический и альтернативный пути активации комплемента.
- •11. Интерфероны, природа, механизм действия, способы получения, применение. Понятие об интерфероногенах.
- •12. Нормограмма резистентности.
- •13. Понятие об иммунитете, его виды. Пути формирования естественного и искусственного иммунитета.Общая характеристика, виды и формы иммунитета .
- •14. Функции иммунной системы. Центральные и периферические органы иммунной системы.
- •15. Генез иммунокомпетентных клеток (макрофаги, в-,т-лимфоциты). Клеточная кооперация в иммуном ответе.
- •16. Понятие об антигенах, их строение и свойства. Антигены бактерий и вирусов.
- •17. Антитела (иммуноглобулины), структура, классы, функции. Понятие о моноклональных антителах. Гибридомы, получение, применение.
- •18. Антителообразование: первичный и вторичный иммунный ответ. Иммунологическая память.
- •19. Типы иммунного ответа при инфекционных заболеваниях.
- •20. Схема Th1 ответа. Эффекторы клеточного ответа.
- •21. Схема Th2 ответа. Эффекторы гуморального ответа.
- •22. Антитоксический иммунитет, его особенности.
- •23. Антивирусный иммунитет и его особенности.
- •24. Механизмы ускользания бактерий от иммунных реакций организма.
- •25. Иммунокомпетентный и иммунокомпрометированный организм.
- •26. Реакция агглютинации, её разновидности, механизм и техника постановления.
- •27. Реакции пассивной агглютинации. Реакции ко-агглютинации, латекс-агглютинации и непрямой гемагглютинации. Механизм и применение.
- •28. Реакция преципитации, ее разновидности, механизм и применение.
- •29. Феномен вирусной гемагглютинации, применение и механизм реакции гемагглютинации (рга). Реакция торможения гемагглютинации (ртга), применение и механизм.
- •30. Реакция нейтрализации (рн) с использованием лабораторных животных (рбн) и культуры ткани (метод цветной пробы). Механизм и применение.
- •31. Серологические реакции с использованием метки. Реакция иммунофлюоресценции (прямая и непрямая риф),иммуноферментный анализ (ифа), радиоиммунный анализ (риа), Механизм реакций.
- •32. Иммуноблотинг. Механизм и применение.
- •33. Типы вакцин. Получение живых, убитых, субъединичных и рекомбинантных
- •34. Анатоксины. Получение анатоксинов. Адъюванты, механизм их действия.
- •35. Получение лечебных иммуноглобулинов и антитоксических сывороток. Проверка их реактогенности и иммуногенности.
- •36. Диагностические препараты. Антигенные препараты (диагностикумы, эритроцитарные диагностикумы, антигены).
- •37. Диагностические сыворотки. Получение и применение. Способ получения адсорбированных агглютинирующих сывороток по Кастеллани.
- •38. Аллергия. Классификация гиперчувствительности по Джеллу и Кумбсу.
- •39. IV тип гиперчувствительности (клеточноопосредованный), его роль в инфекционном процессе. Реализация механизмов клеточного типа аллергии в нестерильном иммунитете.
- •40. Механизм кожно-аллергических реакций. Инфекционные аллергены, как диагностические препараты.
- •41.Роль I типа (анафилактического) и III типа (иммунокомплексного) аллергических реакций в развитии побочных эффектов серотерапии. Правила введения гетерологических сывороток и иммуноглобулинов.
28. Реакция преципитации, ее разновидности, механизм и применение.
Реакция преципитации (РП)
Феномен преципитации заключается во взаимодействии мелкодисперсных антигенов (преципитиногенов) с соответствующими антителами (преципитинами) и образованием преципитата (рис. 1). Постановку РП осуществляют двумя методами: в жидкой среде - по типу реакции флокуляции , кольцепреципитации или в плотной среде в агаре (геле). РП применяют в двух целях: выявление антигенов по известной иммунной преципитирующей сыворотке или антител с использованием известных антигенов. Существует много вариантов постановок реакции, но чаще всего используют следующие методики: реакция преципитации в геле по Оухтерлони , радиальная иммунодиффузия по Манчини , реакция иммуноэлектрофореза , реакция флокуляции , кольцепреципитации .
Рис. 1. Реакция преципитации:1 - антиген; 2 - антитело.
Реакция преципитации в геле по Оухтерлони . Для постановки реакции используют 1% агар Дифко, который разливают расплавленным на предметные стекла или чашки Петри слоем толщиной 0,5 см. В застывшем агаре вырезают лунки диаметром 5 мм специальным приспособлением. В одну лунку помещают взвесь, содержащую исследуемый антиген, в другую - иммунную сыворотку. Антиген и антитела диффундируют в питательную среду, вступают в иммунную реакцию и образуют полосы преципитации. Учет реакции проводят предварительно через 4 часа, окончательно - через 24-48 часов. Реакцию Оухтерлони можно использовать для определения токсичности бактерий, титра антител, активности стандартных диагностикумов или иммунных специфических сывороток (рис. 2).
Рис. 2. Реакция преципитации: А - реакция кольцепреципитации ; Б - реакция преципитации по Оухтерлони .
Реакция кольцепреципитации
Данную реакцию применяют для выявления антигенов с помощью иммунной преципитирующей сыворотки, содержащей специфические антитела. Это качественный метод исследования. Реакцию проводят путем наслаивания на иммунную сыворотку среды, содержащей определенный антиген. Реакцию ставят в узких пробирках объемом 0,1- 0,5 мл. В случае соответствия антигена и антитела на границе между ними через 3-5 мин образуется кольцо преципитации (рис. 2). Необходимым условием образования нерастворимого иммунного комплекса является эквивалентное соотношение антигенов и антител.
Радиальная иммунодиффузия по Манчини
Радиальная иммунодиффузия по Манчини позволяет использовать моноспецифические антисыворотки и эталон с известным содержанием антигена. Тест-антиген и разведения растворов, исследуемых на наличие данного антигена, помещают в лунки, вырезанные рядами в пластине геля, куда предварительно внесена соответствующая моноспецифическая антисыворотка . Антиген диффундирует в гель и, соединившись со специфическими антителами, формирует кольца преципитации, диаметры которых зависят от концентрации антигена в лунках. Полученные результаты используют для построения калибровочной кривой, выражающей зависимость диаметров преципитантов от концентрации антигена в исследуемых растворах (рис. 3). Принцип радиальной диффузии положен в основу метода, применяемого для изучения токсигенности бактериальных культур и отбора из бактериальной популяции клонов с высокой степенью токсичности. В этом случае исследуемые культуры засевают в чашки с агаром , содержащим антитоксическую сыворотку. Вокруг отдельных колоний образуются кольца преципитации, диаметр которых прямо пропорционален степени токсичности штамма (рис. 3).
Рис. 3. Простая радиальная иммунодиффузия :а - кольца преципитации;б - калибровочная кривая.
Реакция иммуноэлектрофореза (ИЭФ)
В основе реакции лежит принцип преципитации. ИЭФ, как правило, используется для исследования антигенной структуры микроорганизмов. Реакцию проводят в два этапа. Вначале проводят электрофоретическое разделение антигена в забуференном агаровом геле. Антигенный комплекс помещают в лунку, которая находится в центре геля, залитого на стеклянную пластинку. Затем через гель пропускают электрический ток, в результате происходит перемещение антигенов на неодинаковые расстояния соответственно своей электрофоретической подвижности. После этого в канавку, которая расположена по краю пластинки, вносят специфическую иммунную сыворотку и помещают во влажную камеру. Антигены и антитела диффундируют в геле навстречу друг другу. В месте их соприкосновения образуются дугообразные линии преципитации. С помощью ИЭФ анализируются состав и количество белков сыворотки крови, спиномозговой жидкости, микробных протеинов (рис. 4).
Рис. 4. Реакция иммуноэлектрофореза .