Влияние сочетанного химического и электромагнитного загрязнения на биологические свойства почв. Монография
.pdf
61
ГЛАВА 4. ОЦЕНКА ВЛИЯНИЯ СОЧЕТАННОГО ЗАГРЯЗНЕНИЯ СВИНЦОМ, НЕФТЬЮ И СВЧ-ИЗЛУЧЕНИЕМ НА БИОЛОГИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА ЧЕРНОЗЕМА ОБЫКНОВЕННОГО
Результаты исследований изменения биологических свойств чернозема обыкновенного под воздействием сочетанного загрязнения свинцом, нефтью и СВЧ-излучением представлены в таблице 3, 4 и на рисунках 1-10.
Таблица 4 Вклад отдельных факторов в изменение биологических свойств чернозема обык-
новенного при сочетанном воздействии нефти, свинца и СВЧ-излучения
|
|
Свинец + СВЧ-излучение |
|
Нефть + СВЧ-излучение |
|||||
|
СВЧ |
Свинец |
Взаимо |
Ошибка |
СВЧ |
Нефть |
Взаимо |
Ошибка |
|
|
действие |
дисперсии |
действие |
дисперсии |
|||||
|
|
|
факторов |
|
|
факторов |
|||
Активность |
37%* |
30%* |
21% |
12% |
9% |
75%* |
13% |
1% |
|
каталазы |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Активность |
19%* |
20%* |
57%* |
4% |
17%* |
45%* |
33%* |
5% |
|
дегидрогеназы |
|||||||||
Численность |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
аммонифици- |
23%* |
41%* |
20%* |
16% |
2% |
30%* |
32%* |
36% |
|
рующих |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
бактерий |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Численность |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
споро- |
5% |
39%* |
44%* |
12% |
3% |
64%* |
25%* |
8% |
|
образующих |
|||||||||
|
|
|
|
|
|
|
|
||
бактерий |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Численность |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
грам- |
- |
- |
- |
- |
29%* |
29%* |
21%* |
21% |
|
отрицательных |
|||||||||
бактерий |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Численность |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
амило- |
44%* |
0,5% |
0,5% |
55% |
31%* |
26%* |
27%* |
16% |
|
литических |
|||||||||
бактерий |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Численность |
22% |
28% |
27% |
23% |
28%* |
40%* |
12% |
20% |
|
актиномицетов |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Численность |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
нефте- |
11% |
17% |
19% |
53% |
9% |
52%* |
29%* |
10% |
|
окисляющих |
|||||||||
бактерий |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Обилие |
- |
- |
- |
- |
18%* |
10%* |
40%* |
32% |
|
микромицетов |
|||||||||
|
|
|
|
|
|
|
|
||
Длина побегов |
24%* |
22%* |
44%* |
10% |
5% |
84%* |
4% |
7% |
|
62
и корней
* p<0,05
63
64
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Таблица 3 |
|
|
|
Влияние сочетанного загрязнения свинцом, нефтью и СВЧ-излучением на биологические свойства |
|
|
||||||||||
|
|
|
|
|
|
чернозема обыкновенного |
|
|
|
|
|
|||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Числен- |
|
|
|
|
|
|
|
|
Актив- |
|
|
Численность |
Числен- |
|
|
Числен- |
Численность |
|
|
|
|
|
Актив- |
|
|
|
ность гра- |
Численность |
Обилие |
|
|||||
|
|
ность |
ность де- |
Длина |
Длина |
аммониифи- |
ность спо- |
|
мотрица- |
аммонифици |
ность ак- |
нефтеокис- |
микроми- |
|
|
|
каталазы, |
гидрогена- |
побегов, |
корней, |
цирующих |
робразую- |
|
тельных |
рующих бак- |
тиноми- |
ляющих |
цетов, |
|
|
|
мл О2/г |
зы, мг |
мм |
мм |
бактерий, |
щих бакте- |
|
бактерий, |
терий, млн/г |
цетов, |
бактерий, |
тыс/г |
|
|
|
|
ТТХ/10 г |
|
|
млн./г |
рий, млн/г |
|
млн/г |
|
млн/г |
млн/г |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Контроль |
13,4±0,28 |
24,98±2,15 |
23,0±0,65 |
12,5±0,50 |
8,48±0,87 |
7,45±0,97 |
3,35±0,35 |
7,95±0,35 |
2,68±0,35 |
1,68±0,19 |
55,61±2,41 |
|
||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Свинец, |
10,0±0,35 |
18,07±0,56 |
18,4±0,42 |
8,8±0,32* |
6,35±0,51* |
5,55±0,59* |
2,87±0,67* |
7,39±0,78 |
1,93±0,45 |
2,05±0,25* |
61,20±3,60 |
|
||
100мг/кг |
* |
* |
* |
|
||||||||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|||||
Нефть, 5% |
6,0±0,43* |
24,96±0,12 |
9,7±0,21* |
5,6±0,17* |
13,84±0,39* |
13,56±0,88* |
5,09±0,27* |
5,69±0,64 |
3,66±0,35 |
1,92±0,11* |
64,99±5,28 |
|
||
* |
|
|||||||||||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
СВЧ, |
11,7±0,74 |
19,12±2,29 |
16,3±0,43 |
8,0±0,29* |
11,20±0,80* |
10,27±0,34* |
4,56±0,08* |
6,16±0,50 |
1,90±0,28 |
1,33±0,07 |
61,32±3,97 |
|
||
450 Вт |
* |
* |
|
|||||||||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||||
Свинец, |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
100мг/кг + |
10,2±1,00 |
19,55±1,80 |
20,3±0,70 |
9,8±0,29* |
4,95±0,49** |
4,67±0,64* |
3,10±0,21 |
5,78±0,68 |
2,22±0,48 |
1,95±0,13 |
47,32±0,98 |
|
||
СВЧ, 450 |
* |
* |
|
|||||||||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||||
Вт |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Нефть, 5% |
|
35,68±1,03 |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
+ СВЧ, 450 |
4,6±0,33* |
11,8±0,44 |
8,1±0,45 |
10,79±0,08* |
10,75±0,96* |
3,67±0,44* |
4,36±0,26 |
2,57±0,08 |
2,09±0,33* |
48,59±1,65* |
|
|||
* |
|
|||||||||||||
Вт |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||
СВЧ, |
9,6±0,14* |
24,22±2,85 |
46,7±0,88 |
52,4±0,81 |
10,72±0,98* |
6,78±0,58 |
4,65±0,35* |
5,27±0,20 |
1,73±0,35 |
1,71±0,23 |
53,92±2,14 |
|
||
800 Вт |
* |
* |
|
|||||||||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||||
Свинец, |
|
18,32±0,99 |
37,1±0,66 |
46,4±1,05 |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
100мг/кг + |
8,3±0,64* |
9,26±0,53 |
7,22±0,24 |
3,84±0,42 |
4,95±0,45 |
1,85±0,35 |
1,64±0,21 |
67,38±4,97 |
|
|||||
СВЧ, 800 |
** |
* |
* |
|
||||||||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|||||
Вт |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Нефть, 5% |
|
|
17,0±0,31 |
24,6±0,59 |
|
|
|
|
|
|
|
83,97±8,99* |
|
|
+ СВЧ, 800 |
4,7±0,87* |
25,54±1,72 |
12,59±0,42* |
12,72±0,76* |
6,06±0,14* |
5,37±0,60 |
2,39±0,16 |
2,23±0,31* |
|
|||||
* |
** |
* |
|
|||||||||||
Вт |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||
Условные обозначения: * p<0,05, ** p<0,01
65
4.1 Влияние на ферментативную активность Влияние на активность каталазы. Каталаза (Н2О2:Н2О2 - оксидоредуктаза,
КФ 1.11.1.6.) катализирует реакцию разложения перекиси водорода на воду и молекулярный кислород. Активность каталазы выражают в мл О2 на 1 г почвы, выделившегося за 1 минуту.
СВЧ-излучение вызывало снижение активности каталазы чернозема обыкновенного: при мощности СВЧ 800 Вт активность снижалась на 28% (p<0,05) от контроля (рис.1). Свинец так же приводил к снижению активности фермента на
26% (p<0,05).
% от контроля
120
контроль
100
80
60
40
20
0
Без хим.загрязнения |
PbO 1000 мг/кг |
Нефть 5% |
Без СВЧ |
+ СВЧ 450Вт |
+ СВЧ 800Вт |
Рис. 1. Влияние сочетанного загрязнения чернозема обыкновенного свинцом, нефтью и СВЧ-излучением на активность каталазы, % от контроля
Сочетанное воздействие усиливало токсическое действие загрязнения свинцом: при мощности 800 Вт активность каталазы снижалась на 38% (p<0,05). Согласно двухфакторному дисперсионному анализу, вклад СВЧ-излучения в изменение активности каталазы составил 37% (p<0,05), вклад свинцового загрязнения – 30%, взаимодействия факторов - 21 (p<0,05).
Внесение нефти в почву вызывало значительное падение уровня активности каталазы – на 55% (p<0,05) по сравнению с контрольным образцом. Сходная кар-
66
тина наблюдалась и при сочетанном загрязнении, когда активность фермента снижалась на 65-66%. Согласно двухфакторному дисперсионному анализу, вклад нефтяного загрязнения в общее снижение активности исследуемого фермента составил около 75%, взаимодействия факторов – 13% (p<0,05), достоверного вклада СВЧ-излучения обнаружено не было.
Влияние на активность дегидрогеназы. Дегидрогеназа (субстрат:
НАД(Ф)-оксидоредуктазы, КФ 1.1.1) катализирует окислительновосстановительные реакции путем дегидрирования органических веществ. Активность дегидрогеназ выражают в мг ТТФ на 10 г почвы за 24 часа.
На активность дегидрогеназы СВЧ-излучение не оказывало значительного воздействия: при мощности излучения 450 Вт было зафиксировано снижение активности исследуемого фермента на 23% (p<0,05) (рис 2).
% от контроля
160
140
120 контроль
100
80
60
40
20
0
Без хим.загрязнения |
PbO 1000 мг/кг |
Нефть 5% |
Без СВЧ |
+ СВЧ 450Вт |
+ СВЧ 800Вт |
Рис. 2. Влияние сочетанного загрязнения чернозема обыкновенного свинцом, нефтью и СВЧ-излучением на активность дегидрогеназы, % от контроля
67
Свинцовое загрязнение снижало активность дегидрогеназы: было отмечено падение активности на 28% (p<0,05) от контрольных значений. При сочетанном загрязнении была зафиксирована сходная картина. Дисперсионный анализ показал, что вклад свинцового и СВЧ-загрязнения составил 20 и 19% соответственно (p<0,05). Совместное действие факторов оказало влияние на активность фермента в размере 57% (p<0,05).
Нефтяное загрязнение не оказало достоверного влияния на активность дегидрогеназы, однако в случае его влияния совместно с СВЧ-излучением мощностью 450 Вт приводило к росту активности дегидрогеназы на 43% (p<0,01). В целом, вклад нефтяного загрязнения в изменение активности фермента при сочетанном загрязнении составил 45% (p<0,05), СВЧ-излучения – 17% (p<0,05), а их взаимодействия – 33% (p<0,05).
В целом, можно сделать вывод, что сочетанное с СВЧ-излучением свинцовое или нефтяное загрязнение не оказывают достоверных комплексных эффектов на каталазу, в отличие от дегидрогеназы, для которой показано достоверное сочетанное воздействие факторов.
4.2. Влияние на почвенную микрофлору Влияние на численность аммонифицирующих бактерий. СВЧ-излучение
вызывало рост числа аммонифицирующих бактерий в почве – до 32% (p<0,05) при мощности излучения 450 Вт (рис. 3).
Свинцовое загрязнение, напротив, уменьшало число исследуемых бактерий в почве на 25% (p<0,05). При сочетанном загрязнении свинцом и СВЧ-излучением мощностью 450 Вт наблюдалось более серьезное снижение численности бактерий: на 48% (p<0,01), при этом при мощности 800 Вт, напротив, достоверных изменений численности по сравнению с контролем не наблюдалось.
68
% от контроля
200
180
160
140
контроль
120
100
80
60
40
20
0
Без хим.загрязнения |
PbO 1000 |
мг/кг |
Нефть 5% |
Без СВЧ |
+ СВЧ 450Вт |
|
+ СВЧ 800Вт |
Рис. 3. Влияние сочетанного загрязнения чернозема обыкновенного свинцом, нефтью и СВЧ-излучением на численность аммонифицирующих бактерий,
% от контроля
Дисперсионный анализ показал, что вклад СВЧ-излучения в изменение численности аммонифицирующих бактерий при сочетанном действии со свинцом составил 23% (p<0,05), свинцового загрязнения – 41% (p<0,05), а их комплексного взаимодействия – 20% (p<0,05).
Нефтяное загрязнение, напротив, вызывало рост числа аммонифицирующих бактерий во всех случаях – до 63% при только нефтяном загрязнении (p<0,05). Двухфакторный дисперсионный анализ сочетанного действия загрязнителей не показал достоверного влияния СВЧ-излучения на численность исследуемых бактерий, однако действие излучения и нефти в комплексе составило 32% (p<0,05), а действие нефти – 30% (p<0,05).
Механизм воздействия СВЧ-поля на бактерий до конце неясен. Известно, что оно способно вызывать нарушения в клеточных мембранах. Это, в свою очередь, может приводить к изменению скорости проникновения в клетку таких токсических веществ, как ионы свинца или молекулы нефти и нефтепродуктов (Воздействие…, 1997).
69
Влияние на численность спорообразующих бактерий. Спорообразующие бактерии – это грамположительные бактерии, способные образовывать покоящиеся клетки, покрытые плотной многослойной оболочкой – споры. Споры намного устойчивее к неблагоприятным факторам, чем вегетативные клетки, и способны пережидать длительную засуху, резкие колебания температур и другие неблагоприятные условия внешней среды.
Спорообразующие аммонифицирующие бактерии увеличивали свою численность под действием СВЧ-излучения мощностью 450 Вт на 38% (p<0,05), однако при мощности 800 Вт данный стимулирующий эффект не наблюдался
(рис 4).
% от контроля
250
200
150
контроль
100
50
0
Без хим.загрязнения |
PbO 1000 мг/кг |
Нефть 5% |
Без СВЧ |
+ СВЧ 450Вт |
+ СВЧ 800Вт |
Рис. 4. Влияние сочетанного загрязнения чернозема обыкновенного свинцом, нефтью и СВЧ-излучением на численность спорообразующих бактерий,
% от контроля
Свинцовое загрязнение подавляло рост спорообразующих бактерий, как отдельно, так и в сочетании с СВЧ-излучением мощностью 450 Вт (на 26 и 37% (p<0,05) соответственно). Однако при увеличении мощности СВЧ-излучения до 800 Вт данный эффект не наблюдался. Дисперсионный анализ показал, что влия-
70
ние свинца на численность спорообразующих бактерий при сочетанном загрязнении составило 39% (p<0,05), а влияние того факта, что свинцовое и нефтяное загрязнение действовали в комплексе – 44% (p<0,05). Достоверного действия только СВЧ-излучения обнаружено не было.
Как и в случае с аммонифицирующими бактериями, нефть вызывала рост численности спорообразующих аммонифицирующих бактерий – до 82% (p<0,01) при загрязнении только внесенной в почву нефтью. Двухфакторный дисперсионный анализ показал, что вклад нефти в рост численности данных бактерий в условиях сочетанного загрязнения нефтью и СВЧ-излучением составил 64% (p<0,05), взаимодействие нефти и СВЧ-излучения – 25% (p<0,05). Достоверного влияния СВЧ-излучения не было обнаружено.
Влияние на численность грамотрицательных бактерий. Клеточная стен-
ка играет немаловажную роль в жизни бактерий, так как осуществляет процессы рецепции, поглощения питательных веществ, движения. Грамотрицательные бактерии имеют особое строение клеточной стенки, состоящей из нескольких слоёв, отличающихся по структуре. Они не способны образовывать споры и в таком виде пережидать неблагоприятные условия окружающей среды.
СВЧ-излучение вызывало увеличение числа грамотрицательных бактерий в почве до 39% при мощности 800 Вт (p<0,05) (рис. 5). Свинцовое загрязнение не оказывало достоверного влияния ни само по себе, ни в сочетании с СВЧизлучением.
Нефтяное загрязнение во всех случаях приводило к росту численности исследуемых бактерий – до 81% (p<0,05) в случае сочетанного воздействия нефти и СВЧ-излучения мощностью 800 Вт. Двухфакторный дисперсионный анализ выявил, что вклад СВЧ-излучения в рост численности грамотрицательных бактерий составил 29% (p<0,05), нефти – 29% (p<0,05), а комплексное действие составило
21% (p<0,05).
