Вопросы, рассматриваемые на аудиторных занятиях:

живых организмов: бактерии (что изучает бактериология), растения

(фитопатология), грибы (микология), животных (зоология) и человека

(медицина). Для понимания их природы требуются знания биохимии

(изучение состава вирусов), генетики и молекулярной биологии

(механизмы репликации и мутации), цитологии (взаимодействие вируса и клетки) и экологии (пути распространения в природе).

Задачи ветеринарной вирусологии

Ветеринарная вирусология как прикладная наука ставит перед собой следующие ключевые задачи:

●​ Фундаментальное изучение вирусов: Исследование структуры,

химического состава, биологии, генетики и механизмов взаимодействия вируса с клеткой-хозяином, а также устойчивости вирусов к факторам внешней среды.

●​ Разработка методов диагностики: Совершенствование существующих и создание новых, быстрых и точных методов диагностики вирусных болезней животных.

●​ Разработка средств и методов борьбы: Создание эффективных вакцин, противовирусных препаратов и систем мероприятий для

профилактики и ликвидации вирусных болезней.

●​ Организация противоэпизоотических мероприятий: Для

недопущения заноса и распространения вирусных инфекций на территорию страны и отдельные хозяйства необходимы строгие меры, включающие:

○​ Вакцинацию восприимчивого поголовья. ○​ Мониторинг и своевременную диагностику.

○​ Карантинные мероприятия.

3.​Устойчивость вирусов к физическим и химическим факторам. Инактивация вирусов.

Вирусы, относящиеся к разным семействам, обладают неодинаковой устойчивостью к окружающей среде. Наиболее устойчивы безоболочечные вирусы с изометрической морфологией вириона. К ним относятся, например, адено-, рео-, пикорнавирусы, которые

сохраняют свою инфекционную активность в течение нескольких дней, тогда как оболочечные вирусы с плеоморфной морфологией, такие как орто- и парамиксовирусы, инактивируются на поверхностях на несколько часов. Однако имеются и исключения. Например, оболочечные вирусы оспы устойчивы к высыханию и сохраняются в экскретах многие недели и месяцы; вирус гепатита В (оболочечные гепадновирусы) устойчивы к действию неблагоприятных факторов среды и сохраняет активность в сыворотке при кратковременном кипячении.

Чувствительность вирусов к разным видам излучения (УФ, рентгеновскому) зависит преимущественно от размеров генома.

Чувствительность вирусов к растворителям (эфиру, ацетону,

хлороформу, формальдегиду и т.д.) и другим химическим веществам зависит от целого ряда свойств, к которым относится наличие или

отсутствие суперкапсидной оболочки, плотность паковки нуклеиновой кислоты в капсид, размеры генома. Оболочечные вирусы

преимущественно сферической и плеоморфной морфологии чувствительны к растворителям и детергентам, тогда как безоболочечные изометрические и бациллоформные вирусы устойчивы к их действию.

Важным свойством вирусов является их чувствительность к pH

среды. В ходе эволюции у вирусов сложилась специфическая особенность репродуцироваться в клетках хозяина, находящихся в среде с определенным кислотно-щелочным соотношением. Так, рео-, корона-, пикорнавирусы, проникающие в организм хозяина алиментарным путем и вызывающие кишечные инфекции, устойчивы к низким значениям ph (2,2-3,0), однако большинство вирусов инактивируются при кислых и щелочных ph.

Инактивация вируса — это процесс, в результате которого вирус теряет способность к размножению и инфицированию, но при этом могут сохраняться его антигенные свойства. Этот процесс уничтожает или

обезвреживает вирусы, что делает их неспособными вызывать заболевание. Инактивация может достигаться различными методами, такими как термическая обработка, обработка ультрафиолетом, изменение pH или применение химических веществ.

Способы инактивации

●​ Термическая обработка: Повышение температуры до

определенного уровня (точка тепловой инактивации) вызывает потерю вирусной активности.

●​ Ультрафиолетовое (УФ) излучение: УФ-свет повреждает ДНК/РНК

вирусов, что препятствует их размножению.

●​ Изменение pH: Воздействие кислых или щелочных условий может

разрушать вирусы, особенно те, что имеют оболочку (капсид).

●​ Химические вещества: Применение химических реагентов (например, аминоэтилэтиленимина) для уничтожения патогенности

вирусов, что используется при производстве вакцин.

4.​Структура вирусологических лабораторий, правила, режим работы. Хранение вирусных культур.

размещение и структура

вирусологическую лабораторию размещают в отдельном здании или в изолированном отсеке ветеринарной лаборатории. отдел должен включать не менее 5–6 комнат, каждая из которых выполняет свою функцию:

●​ для работы с вируссодержащим материалом; ●​ для постановки серологических реакций; ●​ для работы с культурами клеток; ●​ термостатная; ●​ моечная;

●​ склад.​

все помещения изолированы друг от друга, оборудованы боксами с предбоксами, разделёнными стеклянной перегородкой и дверью. в

боксах на рабочих столах размещают только необходимые принадлежности; поверхности покрывают стеклом или пластиком, над рабочим местом устанавливают бактерицидные лампы (БУВ-30). у входа

вбокс располагают дезковрик, пропитанный дезраствором.

впредбоксе устанавливают оборудование (микроскоп, центрифугу, термостат) и хранят стерильную спецодежду, которую надевают перед входом в бокс.

обязательное оснащение лаборатории — ламинарный или настольный бокс с подачей стерильного воздуха для защиты персонала от инфицированного материала.

требования к помещениям

●​ лаборатории должны быть светлыми, полы — из

влагонепроницаемого материала, устойчивого к дезсредствам

(метлахская плитка, линолеум, пластик); ●​ стены и потолки покрывают легко моющимися материалами

(предпочтительно кафель);

●​ окна снабжают мелкими сетками для защиты от насекомых.​

основные правила работы с вируссодержащим материалом

при обращении с материалом необходимо:

1.​ не допускать рассеивания вирусов во внешней среде; 2.​ предотвращать контаминацию посторонней микрофлорой; 3.​ обеспечивать личную безопасность.​

работу проводят только в спецодежде, выходить в ней за пределы

лаборатории и выносить оборудование без дезинфекции запрещено.

весь поступающий материал считается потенциально инфицированным:​

​

банки и ёмкости протирают дезсредством, ставят в кюветы. рабочее место застилают марлей, смоченной 5% раствором хлорамина.

переливание вируссодержащих жидкостей выполняют только над кюветой с дезраствором.

использованные инструменты (пипетки, перчатки, стекла) помещают

в 5% раствор хлорамина, лизола или серной кислоты.

вируссодержащий материал тщательно маркируется и хранится в холодильнике под пломбой; на этикетке указывают вирус, штамм, дату, объём и соответствующие данные из журнала.

документация лаборатории

вирусологическая лаборатория ведёт следующие журналы: ●​ учёт вирусологических исследований; ●​ учёт выделенных вирусов и их уничтожения; ●​ учёт заражённых животных;

●​ учёт движения производственных и музейных штаммов.​

предварительная обработка материала

патологический материал поступает в вскрывочную комнату, где проводят вскрытие трупов и отбор проб. помещение оснащено:

●​ вскрывочным столом; ●​ стерильными инструментами;

●​ посудой для сбора материала; ●​ спецодеждой.​

виварий

виварий предназначен для содержания лабораторных животных. он включает:

●​ карантинное отделение; ●​ отдельные помещения для здоровых и экспериментальных

животных с самостоятельными выходами.​

каждая клетка снабжается паспортом (дата поступления, заражения, масса, номер экспертизы и т.д.).

режим работы и безопасность

при работе необходимо строго соблюдать правила асептики и антисептики.

асептика — меры, предотвращающие попадание вирусов и

микроорганизмов в исследуемый материал и организм человека. включает использование стерильных инструментов, обработку рук и поддержание

чистоты.

антисептика — меры для уничтожения вирусов и микробов на коже и слизистых оболочках.

применяют:

●​ 70% этиловый спирт,

●​ 5% спиртовой раствор йода, ●​ 0,5–3% хлорамин, ●​ 0,5–1% формалин,

●​ 0,1% перманганат калия.​

в боксах ежедневно проводят влажную уборку с дезсредствами, а раз в

неделю — дезинфекцию парами формалина или карболовой кислотой. все инструменты и посуда должны быть стерильными — используют физические и химические методы стерилизации или одноразовые материалы.

правила техники безопасности для студентов

1.​ входить в лабораторию только в халате и головном уборе; 2.​ не класть личные вещи на рабочий стол;

3.​ соблюдать чистоту и порядок, начинать работу только с разрешения преподавателя.

4.​ использовать только стерильные инструменты и посуду;

5.​ открывать пробирки и флаконы у пламени горелки;