- •ФГБОУ ВО «Самарский государственный медицинский университет» Минздрава России
- •Определение чувствительности к антимикробным препаратам
- •Терминологические особенности
- •Знаете ли вы, что…
- •Существует несколько методов определения чувствительности к антибактериальными препаратам:
- •Диско-диффузионный метод
- •Диско-диффузионный метод
- •Постановка чувствительности
- •Постановка чувствительности
- •Постановка чувствительности
- •Постановка чувствительности
- •Диско-диффузионный метод
- •Что такое МПК?
- •Методы определения МПК
- •Метод серийных
- •Метод серийных разведений
- •Пример постановки чувствительности методом
- •Метод серийных разведений
- •Знаете ли вы, что..
- •Эпсилометрический метод (E-test)
- •Эпсилометрический метод (E-test)
- •E-test
- •С микробиологической точки зрения в
- •Критерии чувствительности
- •Критерии чувствительности
- •В настоящее время выделяют следующие клинические категории чувствительности микроорганизма к антибиотику:
- •Важно!
- •Природная резистентность
- •Ожидаемый фенотип чувствительности (ожидаемая чувствительность)
- •Определение чувствительности
- •Российские рекомендации МАКМАХ
- •Фенотипы резистентности и способы их определения
- •Метод определения механизмов
- •Пример иммунохроматографических тестов на продукцию карбапенемаз
- •Что такое B-лактамазы?
- •Что такое ESBL?
- •Что такое карбапенемазы?
- •Что такое MRSA?
- •Встационаре важно
- •Вопросы?
Постановка чувствительности
с помощью ДДМ
Учет результатов проводится с помощью линейки - измеряют диаметр зон задержки роста вокруг дисков и сравнивают с оценочными таблицами
Диско-диффузионный метод
Преимущества метода:
•Быстрый
•Недорогой
•Стандартизированный
•Легко воспроизводимый
•Легко интерпретируемый
•Используется в большинстве лабораторий.
Недостатки метода:
• Невозможность определить МПК для антибиотика
Что такое МПК?
Основным параметром, характеризующим взаимоотношения между микроорганизмом и антибиотиком, является величина минимальной подавляющей концентрации (МПК) препарата.
МПК — это минимальная концентрация антибиотика, подавляющая видимый рост микроорганизма.
Методы определения МПК
•Основным методом определения МПК является метод последовательных разведений.
•Для определения МПК заданные концентрации антибиотика с 2-кратным шагом вносят в питательную среду, которую затем засевают культурой исследуемого микроорганизма и после инкубации оценивают наличие или отсутствие видимого роста в присутствии различных концентраций антибиотика.
•Известны два основных варианта постановки метода последовательных разведений: в агаре и в бульоне.
Метод серийных
(последовательных) разведений
•Основан на прямом определении величины минимальной подавляющей концентрации (МПК), а точнее минимальной концентрации, подавляющей видимый рост исследуемого микроорганизма.
Метод серийных разведений
Пример постановки чувствительности методом
двойных серийных разведений в бульоне (мкг/мл)
128 |
64 |
32 |
16 |
8 |
4 |
2 |
1 |
0,5 |
0,25 |
Контроль |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Метод серийных разведений
Преимущества:
• Определение МПК Недостатки:
•Трудоемкий
•Сложный
•Достаточно дорогой
•Требует чистого раствора антибиотика и большого количества лабораторной посуды
•Не применимый в рутинной практике
Знаете ли вы, что..
Метод последовательных микроразведений в бульоне является стандартизированным методом определения МПК и регламентируется международными стандартами.
Эпсилометрический метод (E-test)
•Узкая полоска полимера, пропитанная антибиотиком в различной концентрации (от минимальной до максимальной)
•Ингибиция роста происходит только в той зоне, где концентрация антибиотика выше МПК.
•МПК в месте границы зоны ингибиции с носителем
