- •ФГБОУ ВО Самарский государственный медицинский университет Минздрава России
- •Микроскопический метод
- •Техника приготовления мазка и микроскопия
- •Знаете ли вы…
- •Виды микроскопии
- •Световая микроскопия
- •Световая микроскопия позволяет исследовать:
- •Для более мелких объектов применяется иммерсионная микроскопия.
- •Темнопольная микроскопия
- •Темнопольная микроскопия
- •Фазово-контрастная микроскопия
- •Сопоставление световой нативной и фазово-контрастной микроскопии
- •Люминесцентная микроскопия
- •Примеры люминесцентной микроскопии
- •Конфокальная микроскопия
- •Применение конфокальной микроскопии для изучения бактериальных биопленок
- •Электронная микроскопия
- •Электронная микроскопия
- •Использование дополнительных методов окраски в микробиологии
- •Выявление свойства кислотоустойчивости
- •Выявление свойства кислотоустойчивости
- •Выявление свойства кислотоустойчивости
- •Алгоритм окраски по методы Циля- Нильсена
- •Кислотоустойчивые бактерии при окраске по Цилю-Нильсену
- •Знаете ли вы…
- •Выявление зерен (гранул) волютина
- •Алгоритм окраски по методу Нейссера
- •Коринебактерии при окраске по методу Нейссера
- •Выявление спор у бактерий
- •Алгоритм окраски по методу Ожешко
- •Окраска спор по методу Ожешко
- •Знаете ли вы…
- •Выявление капсул у бактерий
- •Знаете ли вы…
- •Алгоритм окраски по методу Бурри-Гинса
- •Выявление капсул у бактерий
- •Знаете ли вы…
- •Окраска по Романовскому -Гимзе
- •Простейшие при окраске по Романовскому-Гимзе
- •Микроскопическое изучение риккетсий
- •Риккетсии при окраске различными способами
- •Методы окраски хламидий и микоплазм
- •Микоплазмы при окраске по Романовскому-Гимзе
- •Современные методы окраски, основанные
- •Принцип метода
- •Алгоритм окраски Ауромином ОО/Родамином С
- •Микобактерии при люминесцентной микроскопии
- •Использование флюоресцентных красителей для выявления грибов
- •Алгоритм окраски калькофлюором белым
- •Мицелий гриба при окраске калькофлюором белым
- •Знаете ли вы…
- •Вопросы?
Фазово-контрастная микроскопия
Фазово-контрастная микроскопия использует специальную оптическую систему, которая преобразует различия в фазе в организме в различия в интенсивности света, тем самым создавая контраст светлого и темного на изображении.
Это полезно для изучения внутренних структур живой клетки путем улучшения контрастности и дифференциации структур внутри клетки, которые различаются по своей толщине и показателю преломления.
Сопоставление световой нативной и фазово-контрастной микроскопии
Люминесцентная микроскопия
Люминесцентная микроскопия основана на принципе, согласно которому образцы, окрашенные специальным красителем, связывающимся с клеточной стенкой исследуемого объекта, при воздействии ультрафиолетового излучения, испускают свет с большей длиной волны. Это позволяет объектам выглядеть как ярко светящиеся на темном фоне.
Для люминесцентной микроскопии необходим микроскоп, оснащенный
источником ультрафиолетового света и специальные красители
(например, калькофлюор белый – для грибов, аурамин/родомин для микобактерий).
Примеры люминесцентной микроскопии
Конфокальная микроскопия
Конфокальная микроскопия один из методов микроскопии, позволяющий создавать объемные изображения и изучать динамические процессы, происходящие в клетках.
На сегодняшний день, в микробиологии конфокальная микроскопия служит одним из способов изучения биопленок.
Применение конфокальной микроскопии для изучения бактериальных биопленок
Электронная микроскопия
Электронная микроскопия использует пучок электронов вместо пучка света.
Применяется для изучения вирусов и бактериофагов, а также изучения ультраструктурных особенностей клеток.
Электронная микроскопия
Использование дополнительных методов окраски в микробиологии
Кроме окраски по методу Грама в микробиологии можно использовать другие методы окраски.
Они основаны на выявлении тех или иных особенностей микробных клеток.
Выявление свойства кислотоустойчивости
Для клеточной стенки некоторых грамположительных бактерий (микобактерии, нокардии и др.) характерна более сложная структура.
Основу их клеточной стенки, также, как и у других грамположительных бактерий, составляет муреиновый каркас, однако последний связан с полисахаридами и липидами.
В состав липидов входит много жирных кислот (туберкулостеариновая, миколовая и др.), восков, фосфолипидов, которые придают клеточной поверхности гидрофобность.
